枸杞中枸杞多糖的提取及其含量测定

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2011级药学班

A6组

丁艺兰，冯霞

枸杞中枸杞多糖的提取及其含量测定

一、实验目的：

1、解中药品种品质研究的思路和方法

2、熟悉枸杞多糖的了化学性质和提取方法

3、掌握查阅文献和数据处理的方法

二、实验原理:

枸杞为茄科植物枸杞的成熟果实，它既可以作为药材，又可以作为保健食品。经研究发现其主要活性成分之一就是枸杞多糖。枸杞多糖是一种水溶性糖系蛋白多糖，主要由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6种单糖成分组成。现代医学研究证明：它具有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫力、降血脂等作用，能改善老年人易疲劳、食欲缺乏和视力模糊等症状。

萃取是有机化学实验室中用来提取和纯化化合物的手段之一。通过萃取，能从固体或液体混合物提取出所需的化合物。它的基本原理是利用化合物在两种不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从一种溶剂内转移到另一种溶剂中。经过反复的多次萃取，将绝大部分的化合物提取出来。萃取常见的有液-液萃取和液-固萃取。在本次实验中，是利用水溶液从枸杞子粉末中提取出多糖类化合物，属于液-固萃取。本实验使用水提醇沉法提取宁夏枸杞的枸杞多糖。

三、实验步骤

1、枸杞多糖的提取

称取干燥的枸杞80g，用研钵研成粉末状，放入烧杯内，加入一定料液比(1：8、1：10、1：12)的水溶液，放入微波搅拌器中放置30min，温度70-100摄氏度之间，功率300w，过滤，得滤渣，再加入一定料液比(1：8、1：10、1：12)的水溶液，放入微波搅拌器中放置30min，温度70-100摄氏度之间，功率300w，合并滤液，采用旋转蒸发器真空浓缩，得到的浓缩物用乙醇(乙醇终浓度大于80%)沉淀，滤布过滤，得滤渣用丙酮。石油醚混合液(体积比1：1)于50～60℃回流0.5h，滤布过滤，得沉淀，烘干，得到枸杞粗多糖。

2、Sevage法脱蛋白

取一定量的粗多糖，加蒸馏水完全溶解，使其浓度约为100mg/m L，用Sevage法脱蛋白，按枸杞多糖水溶液体积的20%加入三氯甲烷，再加入三氯甲烷体积的20%的正丁醇，剧烈振摇20min，使其充分混匀，1000r/min离心，倾出上清液，除去中间变性蛋白和下层三氯甲烷，重复以上操作直至中间层无变性蛋白，得到脱蛋白多糖。

3、含量测定

（1）对照品溶液制备精密称取105 ℃干燥至恒重的葡萄糖对照品50 mg，置500 mL 量瓶中，用适量水溶解后，稀释至刻度，摇匀，即得0．1 mg·mL

（2）样品溶液的制备枸杞子样品粉碎，备用。取各种枸杞子粗粉约0．5 g，精密称定。加乙醚100 mL，加热回流1 h，静置，放

冷，小心弃去乙醚液，残渣置水浴上挥尽乙醚。加入80%乙醇100 mL，加热回流1 h，趁热滤过，滤渣与滤器用热80% 乙醇30 mL 分次洗涤，滤渣连同滤纸置烧瓶中，加水150 mL，加热回流2 h。趁热滤过，用少量热水洗涤滤器，合并滤液与洗液，放冷，移量中用水稀释至刻度，摇匀即得供试品溶液。

（3）样品测定精密量取样品溶液1 mL，置具塞试中加水1．0 mL，照标准曲线制备项下的方法，“各精密加入5% 苯酚溶液1 mL”起，依法测定A 值，从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的质量

四、实验结果分析

（1）精制枸杞多糖的得率

枸杞多糖得率（%）=枸杞多糖( g )/枸杞子( g )

（2）蛋白质含量

将提取液与Sevage试剂[氯仿：正丁醇=5：1（V/V）]5：1 混合，振荡，离心，变性后的蛋白质介于提取液与Sevage 试剂交界处。将粗蛋白放入真空干燥箱中干燥，得黄色蛋白干燥物。

枸杞蛋白含量（%）=枸杞粗蛋白( g )/枸杞子( g )

[参考文献]

1、《宁夏枸杞多糖的提取分离与组成》苟春林、张艳、李健

2、《枸杞多糖的提取分离及其组成研究》苟春林，苟金萍，张艳，

王晓菁，姜瑞