蛋白质与非蛋白含氮化合物检验

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(一)血浆蛋白质的功能
❖ 维持血浆胶体渗透压 ❖ 运输作用 ❖ 免疫作用 ❖ 催化作用 根据血浆酶的来源和功能分三类:血浆功能酶,外
分泌酶,细胞酶 ❖ 维持血浆正常的pH ❖ 营养作用 ❖ 凝血抗凝血和纤溶作用
(二)血浆蛋白的分类
1、依据电泳(electrophoresis)结果分类
白蛋白 (albumin) 1球蛋白(globulin) 2球 蛋 白 球蛋白 球蛋白
β-球蛋白:
转铁蛋白、低密度脂蛋白、C4 、 β2-微球蛋白、
纤维蛋白原、C3
γ-球蛋白 : IgA 、 IgG 、 IgM 、 C-反应蛋白
2、 功能分类法:
❖ 运输载体类 血浆脂蛋白:包括CM、VLDL、LDL、HDL等 前白蛋白与白蛋白 甲状腺素结合球蛋白 皮质素结合球蛋白
类固醇激素结合球蛋白 视黄醛结合蛋白 转铁蛋白 触珠蛋白 血色素结合蛋白 铜蓝蛋白
近年来免疫化学分析技术的进展,使许多血浆蛋白质、 尤其是微量血浆蛋白质的检测成为可能,与电泳法结合可以为 血浆蛋白质的分析和临床意义提供更有价值的资料。
血浆蛋白质与电泳区带的关系 :
前白蛋白
白蛋白
α1-球蛋白 : α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白 、甲胎蛋白、 高密度脂蛋白
α2-球蛋白: 结合珠蛋白、α2-巨球蛋白、铜蓝蛋白
蛋白质与非蛋白含氮化合物检验
Protein and non-protein nitrogen compound Laboratory
Major Objectives
熟悉正常与疾病时血清蛋白质电泳的图谱特征,各电泳区带 的主要蛋白质。 掌握血浆蛋白主要组分的性质、功能、临床意义和检测方法。 熟悉原发性和继发性氨基酸代谢紊乱、氨基酸血症与氨基酸 尿症的概念。 了解苯丙酮尿症、酪氨酸血症、白化病、尿黑酸尿症的发病 的生化机制及检测方法。 熟悉氨基酸的检测方法
0.2~0.4
35~52
0.9~2.0 0.5~1.2
3×10-5 1.7~3.25 0.3~2.0 1.3~3.0 0.1~0.4 2.0~3.6 0.6~1.55 0.9~1.8 0.1~0.4 0.001~0.002 2.0~4.0
各电泳区带的主要蛋白质及其含量
前清蛋白 清蛋白 α1-球蛋白
α2-球蛋白 β-球蛋白
γ-球蛋白
前清蛋白
清蛋白
α1-抗胰蛋白酶 α1-酸性糖蛋白 甲胎蛋白 高密度脂蛋白
触珠蛋白 α2-巨球蛋白 铜蓝蛋白
转铁蛋白 低密度脂蛋白 C4 β2-微球蛋白 纤维蛋白原 C3
IgA IgG IgM C-反应蛋白
α2-球蛋白 β-球蛋白
γ-球蛋白
血浆蛋白质的性质功能及其与电泳区带的关系
蛋白Fra Baidu bibliotek种类
前清蛋白
清蛋白
α1-抗胰蛋白酶 α1-酸性糖蛋白
甲胎蛋白 高密度脂蛋白 结合珠蛋白 α2-巨球蛋白
铜蓝蛋白 转铁蛋白 低密度脂蛋白
C3 C4 β2-微球蛋白 纤维蛋白原 IgG IgA IgM C-反应蛋白
成人参考值 (g/ L)
0.2~0.4g/L
35~55
0.9~2.0 0.5~1.5 3×10~5 1.7~3.25
0.3~2.0 1.25~4.1 0.2~0.5
2.0~3.5 0.6~1.55
0.001~0.002 2.0~4.0 0.7~1.5
0.7~4.0 7.0~16 0.4~2.3
0.008
电泳区带 前清蛋白 清蛋白 α1-球蛋白
操作:
醋纤膜电泳
染色 晾干 染色 分离
透明 洗脱
光密度仪扫描
比色
计算得出各种蛋白 质含量
定量
测得蛋白组分百 分比
半定量
A
B
白蛋白 1 2
白蛋白 1 2
血清蛋白电泳图谱
分辨率高时: 可有β1和β2;α2中也可有两条; 如果采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,在适当条件下可以分出
30多个区带。
各电泳区带的主要蛋白质
血浆蛋白质受到广泛重视,进展中的领域有以下几个方面:
❖ 生物化学家分离纯化各种血浆蛋白质组分、物理性质、蛋白质 组成及排列顺序、以及结合蛋白质的结合物。
❖ 生理学家对研究血浆蛋白质功能感兴趣。 ❖ 血浆蛋白质具有遗传的变异。 ❖ 临床生化试验中血浆蛋白质的分类为最常规的工作之一。 ❖ 在进化与个体发育生化研究中。 ❖ 广泛用于组织与细胞培育。 ❖ 在不少疾病的发病机制中(A硬化,肿瘤)血浆蛋白质涉及。
一、血浆蛋白质的功能和分类
血浆蛋白质(plasma protein)总浓度约为 60-80g/L, 它们是血浆的主要固体成分。蛋白质种类很多,目前已 分离的有500多种,其中既有单纯蛋白质也有结合蛋白 质。
分离蛋白质常用的方法包括:电泳法、超速离心法。 近十年来使用不少新技术,用于分析血浆内较微量的个别蛋白 质,并研究其在疾病时的变化,有助于疾病的诊断并提供有价值 的病理生理信息。 如图脂蛋白的组成:
机体蛋白质:生机物体大主分要子的
含量:人体固体成分的45%
种类:10万,3000~5000种/单细胞 功能:生长,代谢、血凝、运动、 免疫、信息传递等
体液蛋白质的检测:
疾病发生
体液蛋白质异常
第一节 蛋白质与非蛋白含氮化合物
一、血浆蛋白质的功能和分类 二、血清蛋白质电泳组分的临床分析 三、血浆蛋白质及其异常 四、其他体液蛋白质
教学重点与难点
❖ 重点:血浆蛋白主要组分的性质、功能、临床意义和检测方法; 几种常见的原发性氨基酸代谢紊乱以及高尿酸血症、痛风发病 的生化机制与检测方法。
❖ 难点:血浆蛋白主要组分的功能、原发性氨基酸代谢紊乱以及 高尿酸血症、痛风发病的生化机制;氨基酸的检测方法。
Brief Contents
❖第一节 体液蛋白质及其代谢紊乱 ❖第二节 氨基酸代谢紊乱 ❖第三节 嘌呤核苷酸代谢紊乱 ❖第四节 蛋白质和氨基酸检测
❖ 蛋白酶抑制物:包括α1-抗胰蛋白酶、α1抗糜蛋白酶、 α2-巨球蛋白等6种以上
❖ 血清酶类: 血浆固有酶如LCAT等 组织细胞少量释放 的细 胞内酶细胞破裂而进入血循环的细胞内酶
❖ 蛋白类激素: 胰岛素、胰高血糖素、生长激素等 ❖ 补体蛋白类 ❖ 凝血蛋白类 ❖ 免疫球蛋白类
醋纤膜电泳正常百分含量 清蛋白: 57%~68% α1球蛋白:1.0%~5.7% α2球蛋白:4.9%~11.2% β球蛋白: 7%~13% γ球蛋白: 9.8%~18.2%
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