骨细胞分离培养及其与成骨细胞鉴别比较的实验研究

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ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｉｓｒｔｉｃｓ．Ｍｅｈｏｔｄｓ：Ｏｓｔｅｏｃｙｔｅｓａｎｄｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｂｏｎｅｔｉｓｓｕｅｏｆ３－ｄａｙ — ｏｌｄｒａｔｓ
ｎｅｓｅＭｅｄｉｃｌａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００５３，Ｚｈｅｊｉａｎｇ，ＣｈｉｎａＡＢＳＴＲＡＣＴＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｏｒｅｓｔａｂｌｅｍｅｔｈｏｄｔｏｉｓｏｌａｔｅｏｓｔｅｏｃｙｔｅｓｉｎｖｉｔｒｏ，ａｎｄｔｈｅｎｔｏｉｆｎｄｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓｗｉｔｈ
ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｄｃｕｌｔｕｒｅｏｆｏｓｔｅｏｃｙｔｅｓａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｉｔｏｎｏｆｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓｉｎｒａｔｓＴＡＮＧＸｉａｏ — ｋａｎｇ，
泌较成骨细胞低，且有统计学差异。结论：实验室条件下能培养出骨细胞，该类细胞和成骨细胞有明显区别。
【关键词】骨细胞；成骨细胞；细胞分离
ＤＯＩ：１０．３９６９，ｑ．ｉｓｓｎ．１００３ — ００３４．２０１３．０３．０１４
ＣＨＥＮＧＷａｎ，ＸＵＢｉｎｇ，ｒＩＮＧＨａｎｇ，ＴＯＮＧＰｅｉ－ｊｉａｎ，ａｎｄＸＩＡ０Ｌｕ－ｗｅｉ．ＴｈｅＦｉｒｓｔＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌｆｆｅｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＣｈｉ —
ｕｓｉｎｇｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅｄｉｇｅｓｔｉｏｎ．Ｔｈｅｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｉｆｅｄｔｈｒｏｕｇｈｃｅｌｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｆｔｅｒ２４ｈｏｕｒｓｌａｔｅｒ．Ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓ —
养２４ｈ后进行细胞形态学观察。第１代细胞用碱性磷酸酶试剂盒采用重氮盐法（改良Ｋａｐｌｏｗ氏法）染色，采用免疫细胞化学法对细胞的骨钙素（ＢＧＰ）染色，测定碱性磷酸酶并计算其活性。结果：骨细胞多呈星状或树枝状，且有很多的突触；成骨细胞呈长梭彤，有少量的突触。骨细胞碱性磷酸酶染色，胞浆内ｃＡＫＰ颗粒不明显；成骨细胞碱性磷酸酶染色，胞浆内可见众多ｃＡＫＰ颗粒。骨细胞ＢＧＰ染色阳性明显，成骨细胞ＢＧＰ染色阳性不如骨细胞明显。ＡＬＰ在骨细胞中分
汤小康，程婉，许兵，应航，童培建１，２肖鲁伟
（１．浙江中医药大学第一临床医学院，浙江杭州３１００５３；２．浙江省中医院，浙江杭州３１０００６）
【摘要】目的：建立比较稳定的骨细胞实验室分离培养方法，并将其部分生物学特性与实验室培养的成骨细胞进行比较研究，明确两者区别。方法：采用序列酶消化法，分别从３只３ｄＳＤ乳鼠骨骼中分离培养骨细胞和成骨细胞，培
ｐｈａｔａｓｅ（ＡＬＰ）ｋｉｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｓｔａｉｎｔｈｅｉｆｒｓｔｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｅｌｌｓｂｙＫａｐｌｏｗ－ｗａｙ，ｔｈｅｂｏｎｅｇｌａｐｒｏｔｅｉｎ（ＢＧＰ）ｏｆｔｈｅｃｅｌｌｓｗｅｒｅ
中国骨伤２０１３年３月第２６卷第３期ＣｈｉｎａＪＯ￣ｈｏｐＴｒａｕｍａ，Ｍａｒ．２０１３，Ｖｏ１．２６，Ｎｏ．３
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基础ｘｄｌ－究・
骨细胞分离培养及其与成骨细胞鉴别比较的实验研究