石细胞的测定方法

法一冷冻法：将梨皮削去, 按果实的四分法取样注意勿将果心周围的石细胞取入, 每组样品取200g果肉, 放入塑料袋中, 置于低温冰箱(-16----20℃)过夜。次日取出, 待解冻后加水约100ml,用组织捣碎机捣碎(1500转/分)1分钟, 取出放入800毫升的大烧杯中, 加约200毫升水, 用玻棒搅拌, 静置片刻, 去掉上面的果肉渣, 再加水搅拌,倒去上层物, 反复3-4次。最后呈现在下面的是颗粒完整的石细胞。分别用孔径0.75,0.5和0.25毫米的分样筛过筛, 得到的便是干净、完整的直径大于0.75毫米, 直径在0.75-0.5毫米直径在0.25-0.5毫米的石细胞。再用滤纸吸干水分, 分别称重, 计算每百克果肉所含石细胞的量。

法二冷冻法：每种处理设重复。每个重复200 g果肉。取1.0cm3种果肉切块，一16—20℃冰柜中冷冻24h，样品解冻后，22000 r／min匀浆3min。将匀浆转移至1000 mL烧杯中。加水至800 mL．用玻璃棒搅拌1 min，静置3 rain，倾出上层悬浮液。如此反复漂洗，直至洗净(一般需要漂洗3～4次)。收集最初几次漂洗倾出的悬浮液，漂洗。合并所得石细胞，用粗滤纸过滤。将石细胞铺开，连同滤纸置烘箱中6O～65℃烘2 h，取出，干燥器中冷却至室温。收集石细胞，称量，精确到1 mg

法二冷冻酶解法：去除果皮和果核，切块四分法取果肉100 g，放于一2O℃冰箱中冷冻24 h，解冻后加少许水用组织捣碎机(1 500 r／min)打浆1分钟，转入量筒中，加适量水搅拌，静置片刻吸去上部带果肉液

体，反复几次，留下稍带果肉的石细胞，再转入烧杯中，煮沸10 min，冷却至室温，调pH值至3.5，加入果胶酶3滴，4o℃酶解2 h。转入量筒中去除果肉渣，石细胞用孔径0．75 mm、0．5 mm和0．25 mm的分样筛过筛，不同大小的石细胞分别转入培养皿，用滤纸吸干水分，室内晾干30 min，称取鲜重；然后放入80℃烘箱中30 min，称取干重。