一种增强免疫力的保健食品及其制备方法

一种增强免疫力的保健食品及其制备方法
技术领域
本发明涉及保健食品领域，公开了一种增强免疫力的保健食品及其制备方法。

背景技术
免疫力是指人体免疫系统抵御病原体感染的能力。

免疫系统由胸腺(青春期以后即逐渐萎缩、退化)、脾脏和淋巴组织等组成。

健全的人体免疫系统主要作用之一是机体防御功能，即保护机体不受损害，帮助机体消灭外来的细菌、病毒以及避免发生疾病。

免疫力是一个从弱到强，再从强到弱的动态发展过程。

0～12岁前的儿童免疫器官发育不完善，体内有抗体活性的免疫球蛋白分泌量少，免疫功能不健全，这时的孩子极容易生病。

13～45岁期间是免疫功能相对稳定期，免疫功能相对完善。

但是由于这一阶段的人容易受到生活、学习、工作的压力影响，使体内的抗体和生长因子分泌量大幅度波动，这种就会造成体内的免疫球蛋白含量不稳定，导致免疫力下降而生病。

46岁以后人体的免疫器官功能开始衰退，体内有抗体活性的免疫球蛋白和生长因子分泌下降，免疫力下降，开始诱发老年性疾病。

各种原因使免疫系统不能正常发挥保护作用，在此情况下，极易招致细菌、病毒、真菌等感染，因此免疫力低下最直接的表现就是容易生病。

因经常患病，加重了机体的消耗，所以一般有体质虚弱、营养不良、精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现，生病、打针吃药便成了家常便饭。

每次生病都要很长时间才能恢复，而且常常反复发作。

长此以往会导致身体和智力发育不良，还易诱发重大疾病。

枸杞，为茄科植物宁夏枸杞的干燥成熟果实，是一味传统常用中药，始载于《神农本草经》。

《本草纲目》谓其补肾、润肺、生精、益气。

《圣惠方》载枸杞子酒补虚损、强筋骨、悦颜色、健身体。

枸杞味甘，性平，主要归肝、肾、肺经。

其甘补平和，质润多液，入肾可益精充髓助阳；走肝能补血明目；归肺以润肺止咳；凡肝肾不足和肺肾阴虚所致诸症，均可应用。

为滋阴助阳，益精补血之良药。

其化学成分主要含胡萝卜素、硫胺素、核黄素、烟酸、抗坏血酸、谷甾醇、亚油酸、玉蜀黍黄素、甜菜碱、酸浆果红素及微量元素等。

现代医学通过大量药理实验和临床实验证明，枸杞的确具有促进调节免疫功能、保肝功能，抗衰老功能及抗疲劳等药理作用。

桑葚，为多年生桑科桑树的成熟果穗。

桑葚的营养丰富，含有人体所必需的多种营养成分，如维生素、铁、钙等矿物元素及人体必需的种氨基酸和微量元素等，并含有果胶、无机盐类和紫红色色素等，中医认为，桑葚味甘酸，性寒，具有补肝益肾、养血生津、滋阴补血、
润肠通便，生津止渴等功效。

现代研究认为，桑葚具有调节免疫、降血糖、降脂、抗衰老、护肝等作用。

女贞子，为木犀科女贞属植物女贞的成熟果实，其味甘、苦，性凉，入肝、肾经,，具有滋补肝肾、明目乌发之功效, 用于治疗眩晕耳鸣、腰膝酸软、须发早白、目暗不明等症。

女贞子始载于《神农本草经》，列为上品。

现代药理学研究表明，女贞子具有提高机体免疫功能、抗炎抑菌、升高白细胞、降血糖、调血脂、保肝护肝、抑制血栓形成、抗衰老及抗疲劳、改善雌激素缺乏所致钙失衡、提高肿瘤患者免疫力和抗癌等功效。

牛蒡子，来源于菊科两年生草本植物牛蒡属牛蒡的干燥成熟果实，为常用中药，又称大力子、牛子、鼠粘子等，药材主产于东北和浙江省。

牛蒡子性寒、味辛苦，归肺胃二经。

具有疏散风热、祛痰止咳、解毒透疹、利咽消肿等功效。

药理学研究证明有抗肿瘤、抗糖尿病、抗炎、抗病毒、抗菌等作用。

菟丝子，为旋花科一年生寄生性蔓草菟丝子或大菟丝子的成熟种子，具有补肝肾、益精明目、固精缩尿、止泻安胎的功效。

菟丝子作为一种免疫增强剂，能够参与体内多种免疫调节。

楮实子，为桑科植物构树的干燥成熟果实。

性甘、味寒，无毒。

以补肾入药应用有几千年的历史，《神农本草经》、《名医别录》俱将其列为上品。

刘汉基《药性通考》载“楮实子，能充肌肤，助腰膝，益气力，补虚劳，悦颜色，壮筋骨，明目。

”
基于以上论述，本发明选择以上六种中药材，经合理组方，适当添加辅料，经现代化的制剂工艺，开发出一种具有增强免疫力作用的保健食品。

发明内容
本发明的目的在于提供一种增强免疫力的保健食品及其制备方法，为实现以上发明目的，本发明提供如下技术方案：
一、本发明生产的增强免疫力的保健食品，按下列重量份的原料及辅料制备而成：
枸杞10-20重量份、桑葚10-15重量份、女贞子2-5重量份、菟丝子2-5重量份、牛蒡子1-3重量份、楮实子1-4重量份。

更为优选的枸杞20重量份、桑葚10重量份、女贞子3重量份、菟丝子5重量份、牛蒡子3重量份、楮实子2重量份。

二、本发明提供一种增强免疫力保健食品的制备方法，其所述制备步骤包括以下方面：
1、枸杞、桑葚、女贞子、菟丝子、牛蒡子、楮实子六味药材，洗净后备用；
2、取适量牛蒡子干燥后粉碎，过60目筛，与菟丝子混合均匀，加入50～80%乙醇回流提取
3次，每次加7～10倍量乙醇回流1～3小时，提取液过滤，浓缩至相对密度1.3～1.35。

3、枸杞、桑葚、女贞子、楮实子以及步骤2中醇提的药渣加7～10倍量水，提取1～2次，每次1～3小时，提取液过滤，浓缩至相对密度1.3～1.35。

4、将步骤2和步骤3中得到的浓缩液干燥，粉碎，过80目筛，得到的干膏粉加入95%乙醇制软材，然后用过18目筛制粒，于55-60℃下干燥，然后再过20目筛整粒。

5、将步骤4所得的颗粒加入相对于整粒所得颗粒的重量0.5%崩解剂羧甲淀粉钠和相对于整粒所得颗粒的重量0.1%润滑剂硬脂酸镁，5%的微晶纤维素，充分混匀5分钟灌胶囊或压成片剂，每粒胶囊/片剂0.5g。

三、与现有技术相比，本发明具有如下特点：
1、该发明采用了科学的配方，配方中有枸杞、桑葚、牛蒡子、女贞子、菟丝子、楮实子六味药食同源的中药材，采用现代工艺加工而成，不仅充分保留了原药材的生理活性物质和营养成分，还具有提高免疫力的功能。

2、实施本发明所用的主要原料——枸杞、桑葚，该原料不但资源丰富，而且价格低廉。

重要的是营养丰富，还具有众多的保健功效，是一种绿色天然的养生佳品。

3、本发明成品制备工艺简单，降低了本发明的保健食品的制作成本；本发明的保健食品通过增强免疫力功能实验和安全性评价实验可知，本发明的保健食品增强免疫力功能显著，且安全无毒副作用，可以长期服用。

具体实施方式
本发明公开了一种增强免疫力的保健食品及其制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。

特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。

本发明所述产品以及制备方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

实施例一：
一、本例生产的一种增强免疫力的保健食品，按下列重量份的原料制备而成：
枸杞15重量份、桑葚10重量份、女贞子2重量份、菟丝子2重量份、牛蒡子2重量份、楮实子1重量份。

二、本例生产的一种增强免疫力的保健食品的制备方法，其所述制备步骤包括以下方面：
1、枸杞、桑葚、女贞子、菟丝子、牛蒡子、楮实子六味药材，洗净后备用；
2、取适量牛蒡子干燥后粉碎，过60目筛，与菟丝子混合均匀，加入60%乙醇回流提取
3、枸杞、桑葚、女贞子、楮实子以及步骤2中醇提的药渣加10倍量水，提取2次，每次1小时，提取液过滤，浓缩至相对密度1.3～1.35。

4、将步骤2和步骤3中得到的浓缩液干燥，粉碎，过80目筛，得到的干膏粉加入95%乙醇制软材，然后用过18目筛制粒，于55-60℃下干燥，然后再过20目筛整粒。

5、将步骤4所得的颗粒加入相对于整粒所得颗粒的重量0.5%崩解剂羧甲淀粉钠和相对于整粒所得颗粒的重量0.1%润滑剂硬脂酸镁，5%的微晶纤维素，充分混匀5分钟灌胶囊或压成片剂，每粒胶囊/片剂0.5g
实施例二：
一、本例生产的一种增强免疫力保健食品，按下列重量份的原料制备而成：
枸杞15重量份、桑葚10重量份、女贞子2重量份、菟丝子2重量份、牛蒡子2重量份、楮实子1重量份。

二、本例生产的一种增强免疫力保健食品的制备方法，其所述制备步骤包括以下方面：
1、枸杞、桑葚、女贞子、菟丝子、牛蒡子、楮实子六味药材，洗净后备用；
2、取适量牛蒡子干燥后粉碎，过60目筛，与菟丝子混合均匀，加入70%乙醇回流提取2次，每次加7倍量乙醇回流2小时，提取液过滤，浓缩至相对密度1.3～1.35。

3、枸杞、桑葚、女贞子、楮实子以及步骤2中醇提的药渣加10倍量水，提取2次，每次2小时，提取液过滤，浓缩至相对密度1.3～1.35。

4、将步骤2和步骤3中得到的浓缩液干燥，粉碎，过80目筛，得到的干膏粉加入95%乙醇制软材，然后用过18目筛制粒，于55-60℃下干燥，然后再过20目筛整粒。

5、将步骤4所得的颗粒加入相对于整粒所得颗粒的重量0.5%崩解剂羧甲淀粉钠和相对于整粒所得颗粒的重量0.1%润滑剂硬脂酸镁，5%的微晶纤维素，充分混匀5分钟灌胶囊或压成片剂，每粒胶囊/片剂0.5g
实施例三：
一、本例生产的一种增强免疫力保健食品，按下列重量份的原料制备而成：
枸杞10重量份、桑葚10重量份、女贞子5重量份、菟丝子4重量份、牛蒡子3重量份、楮实子2重量份。

二、本例生产的一种增强免疫力保健食品的制备方法，其所述制备步骤包括以下方面：
1、枸杞、桑葚、女贞子、菟丝子、牛蒡子、楮实子六味药材，洗净后备用；
2、取适量牛蒡子干燥后粉碎，过60目筛，与菟丝子混合均匀，加入80%乙醇回流提取
3、枸杞、桑葚、女贞子、楮实子以及步骤2中醇提的药渣加8倍量水，提取2次，每次1小时，提取液过滤，浓缩至相对密度1.3～1.35。

4、将步骤2和步骤3中得到的浓缩液干燥，粉碎，过80目筛，得到的干膏粉加入95%乙醇制软材，然后用过18目筛制粒，于55-60℃下干燥，然后再过20目筛整粒。

5、将步骤4所得的颗粒加入相对于整粒所得颗粒的重量0.5%崩解剂羧甲淀粉钠和相对于整粒所得颗粒的重量0.1%润滑剂硬脂酸镁，5%的微晶纤维素，充分混匀5分钟灌胶囊或压成片剂，每粒胶囊/片剂0.5g
在具体实施方式中，本发明对技术方案进行了试验研究，用来证明本发明的技术效果，所述试验包括体重、脏器/体重比值、足跖厚度（细胞免疫功能试验）、淋巴细胞的增值能力（细胞免疫功能试验）、抗体生成细胞数（体液免疫功能试验）、半数溶血值(HC50) （体液免疫功能试验）、碳廓清指数（单核-巨噬细胞功能试验）、吞噬细胞的吞噬率和吞噬指数（单核-巨噬细胞功能）、NK细胞活性（NK细胞活性试验）。

以下研究本发明保健食品保健食品的增强免疫力功能依据《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》内容进行试验。

其中，试验样品、动物、药物与试剂、仪器、剂量设置、实验动物与给药等如下：
1、样品
人体口服推荐摄入量为每日三次，每次三粒/片，每粒/片0.5g（体重按60kg计），4.5g/60kg·BW，取胶囊/片剂内容物进行试验。

2、动物
昆明种小鼠，清洁级，全雌，体重18～22g
3、药物与试剂
ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验（MTT法）：RPMIl640培养液、小牛血清、2-ME、青
霉素、链霉素、刀豆蛋白A(ConA)、盐酸、异丙醇、MTT、Hank’s液(pH7.2-7.4)
迟发型变态反应（绵羊红细胞SRBC诱导小鼠DTH：足趾增厚法）：绵羊红细胞(SRBC)
抗体生成细胞检测（Jerne改良玻片法）：Hank’s液、绵羊红细胞(SRBC)、补体(豚鼠血清)、SA缓冲液、琼脂糖、RPMIl640培养液。

血清溶血素的测定（半数溶血值的测定HC50法）：绵羊红细胞(SRBC) 、SA缓冲液、都氏试剂(碳酸氢钠1.0g，高铁氰化钾0.2g，氰化钾0.05g，加蒸馏水至1000mL)
碳廓清指数（单核-巨噬细胞功能试验）：印度墨汁、0.1%Na2CO3
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验：甲醇、丙酮、鸡红细胞、生理盐水、Giemsa染液
NK细胞活性测定：RPMIl640培养液、、Y AC-1细胞、乳酸锂、硝基氯化四氮唑、吩嗪二甲酯硫酸盐、氧化型辅酶I、0.2mol/L的Tris-HCl缓冲液(pH 8.2)、1%NP40
4、仪器
ES-2100A电子天平、BS223S电子天平、755分光光度计、酶标仪、二氧化碳培养箱、低速离心机、恒温水浴、显微镜、倒置显微镜、螺旋测微仪。

洁净工作台、无菌手术器械、微量注射器(25μL)、细胞计数器、24孔和96孔平底细胞培养板、96孔U型细胞培养板、玻璃平皿、纱布、试管、玻片架、200目筛网、计时器、血色素吸管、载玻片等。

5、剂量设置
剂量设置原则：本保健食品推荐剂量为成人(按60kg体重计)，人拟用剂量为4.5g/60kg·BW·日。

实验设人体推荐量的5倍、10倍、30倍，即每日0.375g/kg·BW、0.75g/kg·BW、2.25g/kg·BW，低、中、高3个剂量配制浓度分别为0.375、0.75、2.25mg/mL，另设蒸馏水为阴性对照组。

6、实验动物与给药
将160只昆明种小鼠分为4批，每批随机分为4组，每组10只。

（1）免疫Ⅰ组进行迟发型变态反应实验、半数溶血值(HC50)的测定和抗体生成细胞数的测定；
（2）免疫Ⅱ组进行碳廓清实验；
（3）免疫Ⅲ组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验；
（4）免疫Ⅳ组进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定。

每日经口服饮用给予各实验组保健食品一次，空白组给予蒸馏水，连续饲喂30天。

7、判断标准
《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)规定：在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性四个方面任两个方面结果阳性，可判定该受试样品具有增强免疫力功能作用。

其中细胞免疫功能测定项目中的两个实验，即小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应实验，结果均为阳性，或任一实验的两个剂量组结果阳性，可判定细胞免疫功能测定结果阳性。

体液免疫功能测定项目中的两个实验，即抗体生成细胞检测、血清溶血素测定，结果均为阳性，或任一实验的两个剂量组结果阳性，可判定体液免疫功能测定结果阳性。

单核-巨噬细胞功能测定项目中的两个实验，即小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验，结果均为阳性，或任一实验的两个剂量组结果阳性，可判定单核-巨噬
细胞功能结果阳性。

NK细胞活性测定实验的一个以上剂量组结果阳性，可判定NK细胞活性结果阳性。

8、数据处理
一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值＜F0.05，结论：各组均数间差异无显著性，F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

9、具体实验数据如下
表1 对免疫Ⅰ组小鼠体重的影响
组别
动物数
（只）初始体重
X±SD(g)
中期体重
X±SD(g)
末期体重
X±SD(g)
增重
X±SD(g)
空白组10 19.7±1.326.9±0.733.7±2.014.0±2.4低剂量组10 19.8±1.327.6±1.634.5±2.214.7±1.6中剂量组10 19.6±1.627.0±2.233.8±2.714.2±3.2高剂量组10 20.3±1.627.8±1.935.1±2.314.8±1.7
表2 对免疫Ⅱ组小鼠体重的影响
组别
动物数
（只）初始体重
X±SD(g)
中期体重
X±SD(g)
末期体重
X±SD(g)
增重
X±SD(g)
空白组10 19.97±1.25 27.81±2.04 35.15±1.51 15.18±2.02 低剂量组10 19.99±1.17 27.72±2.21 34.80±1.63 14.81±2.05 中剂量组10 20.02±1.15 28.36±1.90 35.01±0.98 14.99±1.04 高剂量组10 20.23±1.29 28.00±2.47 34.72±1.89 14.49±1.92
表3 对免疫Ⅲ组小鼠体重的影响
组别动物数初始体重中期体重末期体重增重
（只）X±SD(g) X±SD(g) X±SD(g) X±SD(g) 空白组10 19.28±1.07 27.14±1.63 34.22±1.78 14.94±1.76 低剂量组10 19.22±1.04 27.55±2.35 34.54±1.45 15.32±1.32 中剂量组10 19.29±0.96 27.10±2.67 35.11±2.19 15.82±2.44 高剂量组10 19.67±1.18 27.44±2.39 34.99±1.37 15.32±1.79
表4 对免疫Ⅳ组小鼠体重的影响
组别
动物数
（只）初始体重
X±SD(g)
中期体重
X±SD(g)
末期体重
X±SD(g)
增重
X±SD(g)
空白组10 20.37±1.40 27.38±2.74 33.85±2.92 13.48±2.61 低剂量组10 20.49±1.31 28.26±2.10 34.68±1.73 14.19±1.76 中剂量组10 20.48±1.20 27.17±1.84 34.72±1.71 14.24±2.48 高剂量组10 20.48±1.22 28.26±2.10 35.14±1.05 14.66±1.41
由表1～4可见，各剂量组实验初期、实验中期、实验末期小鼠体重及实验期间小鼠体重增长与空白对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05) ，即本发明保健食品对小鼠体重无不良影响，安全性高。

表5 对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响
组别
动物数
（只）
脾脏/体重胸腺/体重
X±SD(mg/g)P值X±SD(mg/g)P值
空白组10 0.501±0.043 ―0.296±0.027 ―
低剂量组10 0.514±0.047 0.797 0.306±0.019 0.663 中剂量组10 0.522±0.026 0.457 0.312±0.026 0.328 高剂量组10 0.532±0.032 0.188 0.317±0.026 0.148 由表5可见，经口给予小鼠不同剂量的本保健食品30天，对小鼠脾脏/体重比值和胸腺/体重比值均无显著影响(P＞0.05)。

表6 小鼠淋巴细胞转化能力试验结果
组别
动物数
（只）淋巴细胞增殖能力(OD差值) X±SD P值
空白组10 0.010±0.007 —
低剂量组10 0.018±0.014 0.441
中剂量组10 0.019±0.017 0.328
高剂量组10 0.026±0.014 0.033 从表6中可以看出，经口给予小鼠不同剂量的本保健食品30天，各剂量组小鼠淋巴细胞转化能力与对照组比较，均无显著影响(P＞0.05)
表7 小鼠迟发型变态反应(DTH)试验结果
组别
动物数
（只）
注射后24h足跖肿胀度
X±SD(mm) P值
空白组10 0.249±0.077 ―
低剂量组10 0.290±0.053 0.072
中剂量组10 0.341±0.068 0.023
高剂量组10 0.353±0.092 0.009 由表7可知，经口给予小鼠不同剂量的本保健食品30天，中、高剂量组足跖肿胀度明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01)。

表8 小鼠抗体生成细胞检测结果
组别
动物数
（只）
溶血空斑数
X±SD(×103/全脾) P值
空白组10 46±34 - 低剂量组10 47±26 0.684
中剂量组10 73±20 0.009
高剂量组10 88±49 0.035 由表8可知，经口给予小鼠不同剂量的本保健食品30天，中、高剂量组小鼠抗体生成细胞数明显高于空白组，差异具有显著性(P＜0.05或P＜0.01)。

表9 小鼠半数溶血值(HC50)试验结果
组别
动物数
（只）
半数溶血值
X±SD P值
空白组10 159.0±21.2 －
低剂量组10 166.5±17.0 0.688
中剂量组10 172.6±19.3 0.247
高剂量组10 176.4±15.5 0.103 由表9可见，经口给予小鼠不同剂量的本保健食品30天，各剂量小鼠半数血值与对照组比较，差异无显著性（P>0.05）
表10 小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力试验结果
组别
动物数
（只）吞噬指数(a)
x±s
P值
空白组10 5.329±0.859 －
低剂量组10 5.667±1.111 0.7470
中剂量组10 6.212±0.726 0.094
高剂量组10 6.601±0.916 0.010 由表10可见，经口给予小鼠不同剂量的本保健食品30天，高剂量组小鼠吞噬指数显著高于空白组，差异有显著性(P＜0.05)。

表11小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬指数试验结果
组别动物吞噬指数P值
空白组10 0.927±0.082 —
低剂量组10 0.973±0.136 0.734 中剂量组10 1.004±0.125 0.365 高剂量组10 1.022±0.136 0.211 由表11可见，经口给予小鼠不同剂量的本保健食品30天，各剂量组与空白组比较，无显著性差异(P＞0.05)。

即各剂量组对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力无明显影响。

表12 小鼠NK细胞活性试验结果
动物数
组别
NK细胞活性（%）P值
（只）
空白组10 52.6±13.5 ―
低剂量组10 61.3±19.6 0.521
中剂量组10 68.4±16.0 0.114
高剂量组10 75.4±16.90 0.010 由表12可见，经口给予小鼠不同剂量的本保健食品30天，高剂量组对小鼠NK细胞活性与空白组比较，有显著性差异(P<0.05)。

综上所述，在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核‑巨噬细胞功能、NK细胞活性四个方面中细胞免疫和体液免疫两个方面结果为阳性，可判定其具有增强免疫力功能。

结论：口服本发明的保健食品具有增强免疫力功能且安全、方便等优点。