基于核壳色谱柱快速测定栀子中栀子苷和西红花苷—1含量

基于核壳色谱柱快速测定栀子中栀子苷和西红花苷—1含量

目的建立快速同时测定栀子药材中栀子苷和西红花苷-1含量的分析方法。方法采用常规液相色谱仪系统，Agilent Poroshell 120 EC-C18核壳色谱柱（100 mm×4.6 mm，2.7 ?m），流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液，梯度洗脱，检测波长时间程序为240 nm（0～7 min）、440 nm（7～14 min）。采用液质联用技术对色谱图中的主要成分进行指认。结果栀子苷和西红花苷-1分别在0.2～6.0 ?g和0.04～1.2 ?g进样量范围内呈良好的线性关系（r=0.999 9）；仪器精密度、稳定性、重复性试验RSD均小于3%；平均加样回收率分别为99.89%和101.74%，RSD 均小于3%。采用液质联用技术对色谱图中的8个主要成分进行了指认，包括3个环烯醚萜类成分和5个西红花酸类成分。结论该方法简便、快速、准确、重复性好，可为建立高效的栀子药材质量评价标准提供依据。

Abstract：Objective To establish a rapid method for simultaneous determination of geniposide and crocin-1 in Gardeniae Fructus. Methods A conventional liquid chromatography system was used. An Agilent Poroshell 120 EC-C18 column （100 mm × 4.6 mm，2.7 ?m）was used with the mixture of acetonitrile-0.2% formic acid solution as the mobile phase in gradient elution. Detection wavelength was as follow：240 nm （0–7 min），440 nm （7–14 min）. At the same time HPLC-MS/MS technology was used to identify the main components of the chromatogram. Results The calibration curves of geniposide and crocin-1 were in good linearity among the ranges of 0.2–6.0 ?g and 0.04–1.2 ?g，respectively （r=0.999 9）. For the precision test，stability test，repeatability test，the RSD were less than 3%. The average recoveries were 99.89% and 101.74%，respectively，and all the RSD were less than 3%. Eight major components were identified by HPLC-MS/MS technology，including three iridoids and five crocetin derivatives. Conclusion The developed method is simple，rapid，accurate and reproducible，which can provide a basis for quality evaluation of Gardeniae Fructus.

Keywords：Gardeniae Fructus；geniposide；crocin-1；rapid analysis

梔子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实，具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒等功效。研究表明，栀子中含量较高且具有较强药理活性的成分主要有2大类，即以栀子苷为代表

的环烯醚萜类和以西红花苷为代表的西红花酸类成分[1-2]。栀子苷具有抗炎、利胆等作用[3]，西红花苷在抗炎、抗心肌缺血、抗血栓、抗动脉粥样硬化、降血脂等方面具有显著的药理作用[4]。

在前期系列工作基础上[5-6]，为提高检验效率、降低成本，本研究引入新型的核壳色谱柱，基于常规HPLC系统，建立同时测定栀子中2种主要成分栀子苷和西红花苷-1的快速分析方法，对栀子道地产区的样品进行含量测定，同时采用液质联用技术对色谱图中的主要成分进行指认。1 仪器与试药

Aglient1200型高效液相色谱仪（配备在线脱气四元泵、自动进样器、柱温箱、DAD检测器），岛津LCMS-8040三重四极杆质谱仪，MUS/1006型超声波清洗器（深圳现代超声实业有限公司），A&DER-180A型万分之一分析天平（日本A&D公司）。

栀子苷（批号110749-201316）、西红花苷-1（批号111588-201303）对照品，中国食品药品检定研究院；乙腈、甲醇为色谱纯，德国Merck公司；甲酸为分析纯，广州市化学试剂厂；水为超纯水，其他试剂均为分析纯。6批栀子药材均来自道地产区江西，购自广州市采芝林药业有限公司，批号分别为160510、160702、160706、161001、161007、161103，经广州白云山明兴制药有限公司中心化验室陈文荣高级工程师鉴定为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

采用Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱（2.7 ?m，100 mm×4.6 mm），流动相为0.2%甲酸（A）-乙腈（B），梯度洗脱（0～7 min，7%～30%B；7～14 min，30%～75%B），流速为1.0 mL/min，检测波长为240 nm（0～7 min）、440 nm（7～14 min），柱温为40 ℃，进样量为10 ?L。

2.2 质谱条件

正离子模式检测；雾化气和干燥气均为氮气；干燥气流速10 L/min；雾化气流速3 L/min；脱溶剂管温度为300 ℃，加热模块温度为400 ℃；毛细管电压3 kV；全扫描范围为m/z 100～1200；柱后分流，流动相进入质谱检测器的量为0.5 mL/min。

2.3 对照品溶液的制备