山西产苦参种子生物碱类化学成分分析及其资源化价值探讨

山西产苦参种子生物碱类化学成分分析及其资源化价值探讨

[摘要] 该文基于中药资源化学及中药资源循环利用的研究思路及开发策略，以苦参种子资源化利用为目的，采用UPLC-Q-TOF-MS和UPLC-TQ-MS联用技术分析了苦参成熟干燥种子中生物碱类资源性化学成分的组成及其含量，并与同属近缘植物苦豆子成熟干燥种子进行比较，以期发现苦参种子的潜在资源利用价值。研究结果显示：苦参种子与苦豆子种子所含生物碱类化学成分组成具有高度相似性；苦参及苦豆子种子中7种生物碱总量分别为11.203， 15.506 mg·g-1。其中，氧化苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱在苦参种子中的含量较为丰富，提示苦参种子可作为获取苦参碱类生物碱的重要原料资源加以开发利用。研究结果为苦参种子的资源化利用及产业化开发提供了理论基础，为创新苦参资源价值，提升苦参资源的利用效率提供了支撑。

[关键词] 苦参；苦豆子；种子；生物碱类；资源化利用

[Abstract] According to the research strategy of resource chemistry of Chinese medicinal materials and Chinese medicinal resources recycling utilization， this study intends to explore the potential resource-oriented utilization value of the seed of Sophora flavescens by contrasting with its kindred plant S. alopecuroides. This

study established a rapid UPLC-Q-TOF-MS/MS and UPLC-TQ-MS/MS method to determine the alkaloids in the seed of S. flavescens. Results of UPLC-Q-TOF-MS/MS analysis showed that the alkaloids in the seed of S. flavescens were highly similar with S. alopecuroides.In the determination of 7 kinds of alkaloids， the total content was 11.203 and 15.506 mg·g-1 in the seed of S. flavescens and S. alopecuroides，respectively. The content of oxymatrine， oxysophocarpine and sophoridine is high in the seed of S. flavescens. The results indicated that the seeds of S. flavescens. could be an important material resource to obtain alkaloids.

[Key words] Sophora flavescens；Sophora alopecuroides； seed； alkaloids； resources utilization doi：10.4268/cjcmm20161724

苦参Sophora flavescens Ait.为豆科槐属多年生草本或亚灌木状植物，常生于海拔1 500 m以下的山坡、沙地草坡灌木林中或田野附近，主要分布于我国南北各省区，以及印度、日本、朝鲜、俄罗斯西伯利亚等地。近年来，我国山西长治、河南西部、山东西南部、陕西中南部，以及安徽、湖北、贵州等地开展苦参人工种植及半野生抚育，形成了苦参资源面积不断扩大，苦参药材产量供过于求的现实状态。由此也产生了大量的花和果实，其

资源利用价值如何，是药农、生产企业和政府关注的经济民生和社会问题。

现代研究表明[1-4]，苦参植物根中主要的功效物质为其喹喏里西啶型生物碱类化学成分。该类资源性化学成分具有抗肿瘤、抗乙肝病毒、抗炎、抑菌杀虫等生物活性，常用于清热燥湿、杀虫、利尿等临床配方调剂和中药制剂产品的生产，以及生物农药、兽药等产品的开发[5-6]。目前该类化学物质资源的获取途径主要是从同属植物苦豆子S. alopecuroides L.种子中获得。依据中药资源化学的研究思路和启示[7-8]，提出了苦参种子是否可替代苦豆子作为苦参素等喹喏里西啶型生物碱资源性化学成分原料的科学问题。

基于此，在前期研究工作的基础上，以我国目前拥有约20万亩（1亩=667 m2）的山西振东制药集团建立的长治苦参人工种植和半野生抚育基地生产的苦参种子为研究对象，分别采用UPLC-Q-TOF-MS和UPLC-TQ-MS技术分析苦参成熟种子中生物碱类资源性化学成分的组成及其含量，并与同属近缘植物苦豆子成熟种子进行比较，以探讨其开发利用价值和资源化利用策略，最终为苦参非药用部位的资源化利用提供科学依据。

1 材料

药材的采集：苦参成熟种子样品于2015年10月采自山西长治苦参GAP种植基地，苦豆子成熟种子样品于2015年10月采自宁夏盐池，经南京中医药大学段金廒教授鉴定分别为豆科槐属植

物苦参S. flavescens及苦豆子S. alopecuroides的成熟种子。标本存放于南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心。

Waters ACQUITY UPLC系统（包括四元泵溶剂系统，在线脱气机和自动进样器；Waters公司，Milford，USA）；Waters Xevo TQ 质谱仪、Waters Q-TOF Premier飞行时间质谱仪（Waters 公司，Milford，USA）；MassLynx 4.1质谱工作站软件（Waters 公司）；BT125型电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；Milli-Q Advantage超纯水系统（美国Millipore公司）；KQ-250E 型超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）；Beckman Coulter Microfuge 16型离心机（美国贝克曼库尔特有限公司）。化学对照品苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、槐定碱、槐胺碱、金雀花碱、N-甲基金雀花碱购自合肥博美生物科技有限公司。其纯度经HPLC 检测均大于98%。乙腈为色谱纯，购自德国默克公司；去离子水为Milli-Q Advantage超纯水系统自制；其他化学试剂均为分析纯，购自上海国药化学试剂公司。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的配制

精密称取对照品金雀花碱（1）、氧化苦参碱（2）、氧化槐果碱（3）、槐定碱（4）、槐胺碱（5）、苦参碱（6）、槐果碱（7）适量，加甲醇制成混合对照品贮备液。取一定体积的上述贮备液加甲醇稀释后，制成不同浓度的对照品溶液，用以线性关系考察，