酸枣多糖抗衰老作用的实验研究论文
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酸枣多糖抗衰老作用的实验研究
1 引言
1.1 酸枣简介
酸枣[Zizyphus jujuba Mill.var.spinosa(Bunge)Hu]又名棘刺、山枣、红珠、檀酸枣、红铃果,属鼠李科落叶灌木或乔木的成熟果实。酸枣色形似枣,其味甘酸,故名[1]。酸枣广泛分布于我国中、北部地区,无论林间地头、石缝崖边、向阳山坡、溪边草丛都适宜它的生长,有很强的适应性,抗逆性强,御寒抗旱、耐盐碱等。酸枣树高1~3m,枝节上有直的和弯曲的刺。叶互生,长椭圆形至蔟状披针形,长2~3.5cm,宽6~12mm,先端钝,边缘有细锯齿,基出三脉。花黄绿色,常2~3朵簇生于叶腋。花萼、花瓣及雄蕊均为5出数。子房上位,2室,埋于花盘中,柱头2裂。核果小,长圆形或近圆形,暗红色,味酸,果核两端常为钝头。花期4~5月,果期9月。酸枣树春季气温13℃~15℃萌动抽枝,17℃以上展叶和花芽分化,19℃以上叶腋出现花蕾,20℃~22℃开花,18℃~22℃果实成熟,10月下旬气温降到15℃开始落叶[2]。
1.2 酸枣的化学成分的研究
1.2.1 酸枣仁化学成分
对酸枣仁的化学成分在80年代就开始进行了研究,得知酸枣仁含有当药素、白桦脂酸、白桦脂醇、酸枣仁皂甙及阿魏酸、维生素C等成分[3]。90年代后期,尤其是近10年来,对酸枣仁的化学成分研究又取得了较大的突破。在酸枣仁的乙醇提取物中,用氢氧化钾和正丁醇处理,分得总黄酮及总皂甙两部分。对总黄酮进行聚酰胺柱层析,从25%乙醇洗脱液中分得两种黄酮甙,经化学法和光谱法鉴定为Spinosin和Zivulgarin[4]。
尹升镇等人从酸枣仁中提取分离得到2种生物碱,经理化常数及紫外线(UV),红外线(IR),核磁共振(IHNMR)和MS波谱分析鉴定为
Lysicamin和Juzirine,均为首次从该属植物中获得[5]。用离子色谱法简单快速地分析了酸枣仁中的阳离子。分析结果表明,酸枣仁中5种常见阳离子Na+、NH+4、K+、Mg2+和Ca2+的含量比例不同。各离子的检出限为0.001~0.013mg/L,线性范围达3个数量级[6]。对酸枣仁采用原子吸收分光光度法等进行了微量元素的测定,并用氨基酸自动分析仪对游离氨基酸进行了测定。结果表明,不同产地酸枣仁中均含有Fe、Mn、Zn、Se等7种人体必需的微量元素及酪氨酸、蛋氨酸、缬氨酸、苏氨酸等8种人体必需氨基酸[7]。酸枣仁中这些新化合物及元素的发现为进一步澄清酸枣仁的治疗作用机理奠定了理论基础。在新化合物发现的同时,运用新方法和新技术对已知的化合物的分离、鉴定、含量测定也作了大量的研究工作,如从酸枣仁的乙醇提取物中,用KOH和正丁醇处理,分得总皂甙、总黄酮、总酚性成分三部分。对酚性成分进行硅胶H干柱层析,以苯-氯仿-冰醋酸为展开剂分得一结晶,经化学法和光谱法及与对照品对照鉴定为阿魏酸[8]。用薄层扫描法测定酸枣仁中酸枣仁皂甙A和B含量,其薄层展开剂选用正丁醇-冰醋酸-水(4:1:5,上层);2%香草醛硫酸乙醇溶液为显色剂。扫描条件:单波长反射法锯齿扫描,λs=632nm,SX=3,slit=1.25mm。测定结果,不同产地的酸枣仁中,酸枣仁皂甙A 和B的含量相差悬殊。对于同一样品中酸枣仁皂甙A的含量明显大于酸枣仁皂甙B的含量[9],对不同产地的酸枣仁的种皮、胚乳和子叶中酸枣仁皂甙A和B的含量进行了测定,结果表明,皂甙A和B主要存在于子叶中,种皮和胚乳中含量甚微。子叶被种皮和胚乳包裹住,“用时捣碎”可破碎种皮和胚乳,使子叶暴露出来,这有利皂甙A和B的充分提取和利用[10]。应用分光光度法,经硫酸-苯酚显色,于490nm处测定吸收度,测定了酸枣仁中多糖的含量。同一产地不同年份采集的3份样品含量分别为0.7185%,0.7519%和0.7856%[11]。还有很多学者运用上述的方法和技术,对不同产地的酸枣仁的成分进行了研究,也取得了实质性进展。
1.2.2 酸枣果肉化学成分
回瑞华等报道了用蒸馏-萃取法提取酸枣果肉中挥发性物质,测得酸枣果肉挥发油的含量为1.80%,用GC/MS法从酸枣果肉挥发油中分离并确定出43种化学成分。用峰面积归一化法通过化学工作站数据处理系统,得出各化学成分在挥发油中的相对百分含量。其中主要成分为
酸类化合物占挥发油总量的52.26%,酚类化合物为9.34%,酯类化合物为23.05%,醛类化合物为2.77%,醚类化合物为2.66%,烷烃化合物为1.89%,其它类化合物仅占 3.77%。共占酸枣果肉中挥发油总量的95.62%[12]。
用蒸馏-萃取法方法提取的酸枣果肉中挥发油中,鉴定出28种化合物,占挥发油总量的94.88%,其主要成分为:酸类化合物(15种)占挥发油总量的55.90%,酯类化合物(2种)占10.84%,醛类化合物(7种)占10.58%,醇类化合物(3种)占17.15%,酮类化合物(1种)仅占0.41%[13]。
实验采用普通的水蒸气蒸馏-溶剂萃取法和同时蒸馏-萃取法提取了挥发油,收率分别为1.80%和2.30%,收率的高低与实验条件和操作方法有关。同时蒸馏-萃取法提取酸枣果肉的挥发油比普通水蒸气蒸馏-溶剂萃取法提取的酸枣果肉的挥发油收率提高了20%,但是化合物组分却减少了很多,这可能是由于同时蒸馏-萃取法温度、压力较高使一些化合物分解造成的。
1.3 酸枣的药理研究
1.3.1酸枣仁的药理研究
酸枣仁是一味常用的中药,为《中国药典》收载品种。酸枣仁功效在《神农本草经》以及《本草纲目》中都有介绍,其味甘、微酸,性平。归心、肝、胆经。质润敛降,养心安神。用于心肝血虚引起的心烦不安、心悸怔忡、失眠、益阴敛汗。可治疗自汗、盗汗。味酸收敛,甘酸化阴,主入心肝,善于补肝宁心,定神除烦,兼可敛汗生津。适于肝血不足、虚烦不眠及体虚多汗、津伤口渴之证。
在对心血管系统的作用方面,张玮[14]研究中发现,酸枣仁总皂苷对正常组大鼠血液流变学指标无影响,但大、中剂量酸枣仁总皂苷可显著降低血瘀大鼠的全血黏度、血浆黏度,减少纤维蛋白原含量,体外血栓长度、湿重指数,提示酸枣仁总皂苷对血瘀大鼠的黏、凝有良好的改善作用,具有去纤、降黏、抗栓作用;张典等[15]指出,不同剂量的酸枣仁总皂苷对自发性高血压大鼠(SHR)血压有明显的降低作用,且在给药后0.5h即有表现,给药后7.5h药效消失,但是与阳性药相比起效缓慢;刘琼等[16]报告,酸枣仁油对实验家兔有明显的调脂作用,能降低甘油三酯