临床常见标本的细菌学检验
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四联球菌 八叠球菌
病原菌
正常 菌群
G-
淋病奈瑟菌 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 变形杆菌 铜绿假单胞菌 沙雷菌 不动杆菌
大肠埃希菌
32
尿液检验的临床意义（清洁中段尿）
菌落数 (CFU/ml)
< 5×10 4 (5~10)×10 4
>10 5
结果评价
盛放容器
原则上应置于无菌容器内； 容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。
4
（二）标本采集
采集时间和部位
抗菌药物使用之间，选择合适部位；
送检时间和方法
采集后应当立即送检 可将标本放入转运培养基中，部分标本可放4℃保存； 脑膜炎和淋病奈瑟军需35~37℃保温送检。
5
（二）标本采集
安全防护
防止污染、传播和自身感染；
观察、前处理
直接 涂片
报告
快速 检验
报告
分离培养 （需、厌氧、CO2培养）
可疑菌落 (必要时先做培养)
增菌(需氧、厌氧、 CO2培养)
涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 报告
19
血液标本常见的病原菌
球菌 杆菌
G+
金葡、表葡 A、B、草、肺链 肠球菌 厌氧链球菌 产单核李斯特菌 炭疽芽孢杆菌 产气荚膜梭菌
亚急性细菌性心内膜炎 不明原因发热
24h内采集3份血；
24h内采集2~3份血标本；
每次采血间隔大于1h； 每次间隔大于1h；
若24h后阴性；
若24~36h培养阴性；
再采集2份以上血；
再采集2份以上血标本。
17
血液的运送
采集后立即送检 可短时间室温保存 切勿冷藏
18
（四）检验程序
标本选择 采集（保存运送）
注意培养时间
加做无菌对照
涂片染色检查
结合培养细菌的生长特点对照判断
8
（四）检验程序
标本选择 采集（保存运送）
观察、前处理
直接 涂片
报告
快速 检验
报告
分离培养 （需、厌氧、CO2培养）
可疑菌落 (必要时先做培养)
增菌(需氧、厌氧、 CO2培养)
涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 报告
尿液的采集
采集方法
直接导尿、小儿收集包、留置导尿管
28
尿液的运送
采集后立即送检 室温保存不超过2h 4 ℃保存不超过8h
淋病奈瑟菌培养不能冷藏
29
（四）检验程序
标本选择 采集（保存运送）
观察、前处理
直接 涂片
报告
快速 检验
报告
分离培养 （需、厌氧、CO2培养）
可疑菌落 (必要时先做培养)
增菌(需氧、厌氧、 CO2培养)
15
血液的采集
特殊患者采血方式
非急性感染可疑菌血症
间歇性寒战或发热
24h内采集2或3份；
发病前0.5~1h采血；
采血间隔不应小于3h；
急性发热可疑菌血症
急性细菌性心内膜炎
10min内采集2份；
在1~2h内采集3份；
接种于需氧和厌氧瓶； 若24h后阴性，再采集3份以上。
16
血液的采集
特殊患者采血方式
涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 报告
30
尿液的检验
菌落计数
定量接种尿液培养标本 根据细菌在平板上的生长情况 定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/ml）
31
尿液标本常见的病原菌
病原菌
正常 菌群
G+
金葡 化脓性链球菌 肠球菌 结核分枝杆菌 葡萄球菌 枯草杆菌 非致病性棒状杆菌
第二十六章
临床常见标本的细菌学检验
第一节 临床标本采集及检验程序
一
检查单据
二
标本采集
三
培养方法
四 检验程序
2
(一) 检查单据
随时登记
姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；
及时检查
标本类型、来源、送检目的。
3
（二）标本采集
无菌操作
血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌； 粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；
9
第二节 临床常见标本的细菌学检验
血液标本
脑脊液标本
尿液标本
生殖道标本
粪便标本
穿刺液、引流液标本
痰液标本
脓液及分泌物标本
10
血液的采集
采血指征
发热（≧38 ℃ ）或低温（ ≦36 ℃ ）； 寒战、白细胞增多（>10 ×109/L ）、核左移； 粒细胞减少、血小板减少、CRP升高； 皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。
静脉穿刺
可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点； 取血后勿换针头，直接注入血培养瓶； 轻轻颠倒混匀以防凝血；
采血量
成人10~20ml/瓶；儿童1~5ml/瓶。
14
血液的采集
采血时间和次数
使用抗菌药物之前即刻采血； 24h内采集2~3次，多次采血宜更换部位； 入院前2周内接受抗菌药：选用中和培养瓶； 间歇性寒战或发热：发病前0.5~1h采血；
11
血液的采集
皮肤消毒
70%乙醇 30s； 10%聚维酮碘或1%~2% 碘酊，由内向外大于3cm； 穿刺后用70%乙醇脱碘； 对碘过敏患者，70%乙醇脱碘60s干燥后采血。
12
血液的采集
采血部位（肘静脉）
疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉 疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓1ml
13
血液的采集
21
血液检验的临床意义
亚急性细菌性心内膜炎
草链、肠球菌
化脓性心包炎
金葡、溶血性链球菌、肺链
肝硬化败血症
金葡、铜绿
烧伤后败血症
金葡、铜绿
22
第二节 临床常见标本的细菌学检验
血液标本 尿液标本 粪便标本 痰液标本
23
尿液的采集
采集指征
尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛 肉眼脓尿或血尿 不明原因发热，无局部感染 留置导尿管的患者出现发热 膀胱排空功能受损，有尿潴留
及时检验和报告
收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果； 国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。
6
（三）培养方法
培养基
增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧 克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等
培养方法
需氧培养
厌氧培养
二化碳培养
7
（三）培养方法
区分污染菌和病原菌
观察菌落是否在划线上
结核分枝杆菌
球菌 杆菌
G-
脑膜炎奈瑟菌 卡他布拉汉菌 伤寒、副伤寒沙门菌 变形杆菌 铜绿假单胞菌 流感嗜血杆菌 大肠埃希菌
不动杆菌
20
血液检验的临床意义
疖、痈、和脓肿继发的败血症
金葡、溶血性链球菌
尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症
大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌
急性细菌性心内膜炎
金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌
24
尿液的采集
采集原则
用药前采集 尿液在膀胱至少停留4h
25
尿液的采集
采集容器
不与尿液发生反应的惰性材料 广口、容积≧50ml 洁净、无菌、加盖、封闭 盖子容易开启 不含防腐剂和抑菌剂
26
尿液的采集
采集方法
清洁中段尿 最常用的尿培养标本收集方法
耻骨上膀胱穿刺 评估膀胱内细菌感染的“金标准”
27
病原菌
正常 菌群
G-
淋病奈瑟菌 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 变形杆菌 铜绿假单胞菌 沙雷菌 不动杆菌
大肠埃希菌
32
尿液检验的临床意义（清洁中段尿）
菌落数 (CFU/ml)
< 5×10 4 (5~10)×10 4
>10 5
结果评价
盛放容器
原则上应置于无菌容器内； 容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。
4
（二）标本采集
采集时间和部位
抗菌药物使用之间，选择合适部位；
送检时间和方法
采集后应当立即送检 可将标本放入转运培养基中，部分标本可放4℃保存； 脑膜炎和淋病奈瑟军需35~37℃保温送检。
5
（二）标本采集
安全防护
防止污染、传播和自身感染；
观察、前处理
直接 涂片
报告
快速 检验
报告
分离培养 （需、厌氧、CO2培养）
可疑菌落 (必要时先做培养)
增菌(需氧、厌氧、 CO2培养)
涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 报告
19
血液标本常见的病原菌
球菌 杆菌
G+
金葡、表葡 A、B、草、肺链 肠球菌 厌氧链球菌 产单核李斯特菌 炭疽芽孢杆菌 产气荚膜梭菌
亚急性细菌性心内膜炎 不明原因发热
24h内采集3份血；
24h内采集2~3份血标本；
每次采血间隔大于1h； 每次间隔大于1h；
若24h后阴性；
若24~36h培养阴性；
再采集2份以上血；
再采集2份以上血标本。
17
血液的运送
采集后立即送检 可短时间室温保存 切勿冷藏
18
（四）检验程序
标本选择 采集（保存运送）
注意培养时间
加做无菌对照
涂片染色检查
结合培养细菌的生长特点对照判断
8
（四）检验程序
标本选择 采集（保存运送）
观察、前处理
直接 涂片
报告
快速 检验
报告
分离培养 （需、厌氧、CO2培养）
可疑菌落 (必要时先做培养)
增菌(需氧、厌氧、 CO2培养)
涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 报告
尿液的采集
采集方法
直接导尿、小儿收集包、留置导尿管
28
尿液的运送
采集后立即送检 室温保存不超过2h 4 ℃保存不超过8h
淋病奈瑟菌培养不能冷藏
29
（四）检验程序
标本选择 采集（保存运送）
观察、前处理
直接 涂片
报告
快速 检验
报告
分离培养 （需、厌氧、CO2培养）
可疑菌落 (必要时先做培养)
增菌(需氧、厌氧、 CO2培养)
15
血液的采集
特殊患者采血方式
非急性感染可疑菌血症
间歇性寒战或发热
24h内采集2或3份；
发病前0.5~1h采血；
采血间隔不应小于3h；
急性发热可疑菌血症
急性细菌性心内膜炎
10min内采集2份；
在1~2h内采集3份；
接种于需氧和厌氧瓶； 若24h后阴性，再采集3份以上。
16
血液的采集
特殊患者采血方式
涂片检查 生化试验 血清学鉴定 药敏试验 动物试验 报告
30
尿液的检验
菌落计数
定量接种尿液培养标本 根据细菌在平板上的生长情况 定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/ml）
31
尿液标本常见的病原菌
病原菌
正常 菌群
G+
金葡 化脓性链球菌 肠球菌 结核分枝杆菌 葡萄球菌 枯草杆菌 非致病性棒状杆菌
第二十六章
临床常见标本的细菌学检验
第一节 临床标本采集及检验程序
一
检查单据
二
标本采集
三
培养方法
四 检验程序
2
(一) 检查单据
随时登记
姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；
及时检查
标本类型、来源、送检目的。
3
（二）标本采集
无菌操作
血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌； 粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；
9
第二节 临床常见标本的细菌学检验
血液标本
脑脊液标本
尿液标本
生殖道标本
粪便标本
穿刺液、引流液标本
痰液标本
脓液及分泌物标本
10
血液的采集
采血指征
发热（≧38 ℃ ）或低温（ ≦36 ℃ ）； 寒战、白细胞增多（>10 ×109/L ）、核左移； 粒细胞减少、血小板减少、CRP升高； 皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。
静脉穿刺
可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点； 取血后勿换针头，直接注入血培养瓶； 轻轻颠倒混匀以防凝血；
采血量
成人10~20ml/瓶；儿童1~5ml/瓶。
14
血液的采集
采血时间和次数
使用抗菌药物之前即刻采血； 24h内采集2~3次，多次采血宜更换部位； 入院前2周内接受抗菌药：选用中和培养瓶； 间歇性寒战或发热：发病前0.5~1h采血；
11
血液的采集
皮肤消毒
70%乙醇 30s； 10%聚维酮碘或1%~2% 碘酊，由内向外大于3cm； 穿刺后用70%乙醇脱碘； 对碘过敏患者，70%乙醇脱碘60s干燥后采血。
12
血液的采集
采血部位（肘静脉）
疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉 疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓1ml
13
血液的采集
21
血液检验的临床意义
亚急性细菌性心内膜炎
草链、肠球菌
化脓性心包炎
金葡、溶血性链球菌、肺链
肝硬化败血症
金葡、铜绿
烧伤后败血症
金葡、铜绿
22
第二节 临床常见标本的细菌学检验
血液标本 尿液标本 粪便标本 痰液标本
23
尿液的采集
采集指征
尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛 肉眼脓尿或血尿 不明原因发热，无局部感染 留置导尿管的患者出现发热 膀胱排空功能受损，有尿潴留
及时检验和报告
收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果； 国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。
6
（三）培养方法
培养基
增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧 克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等
培养方法
需氧培养
厌氧培养
二化碳培养
7
（三）培养方法
区分污染菌和病原菌
观察菌落是否在划线上
结核分枝杆菌
球菌 杆菌
G-
脑膜炎奈瑟菌 卡他布拉汉菌 伤寒、副伤寒沙门菌 变形杆菌 铜绿假单胞菌 流感嗜血杆菌 大肠埃希菌
不动杆菌
20
血液检验的临床意义
疖、痈、和脓肿继发的败血症
金葡、溶血性链球菌
尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症
大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌
急性细菌性心内膜炎
金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌
24
尿液的采集
采集原则
用药前采集 尿液在膀胱至少停留4h
25
尿液的采集
采集容器
不与尿液发生反应的惰性材料 广口、容积≧50ml 洁净、无菌、加盖、封闭 盖子容易开启 不含防腐剂和抑菌剂
26
尿液的采集
采集方法
清洁中段尿 最常用的尿培养标本收集方法
耻骨上膀胱穿刺 评估膀胱内细菌感染的“金标准”
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