高致病性猪蓝耳病的组织病理学研究
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山东畜牧兽医
２ ０ １ ３年第 ３ ４ 卷
高致病 性猪蓝耳病 的组织病理 学研 究
张秀亮① 李 丽② （ ①山东 省潍坊市寒亭区畜牧兽医 局 ２ ６ １ １ ０ ０ ②山东 省莱阳市沐浴店兽医站）
摘要 采集具有 典型 高致 病性 猪蓝耳病病 变特征 的心、肝、脾 、肺 、肾、小肠 和淋 巴结等制作成石蜡切 片，经Ｈ ． Ｅ
对猪链球菌的谷氨酸 脱氢 酶基 因设计 了分型Ｐ Ｃ Ｒ的引物 ， பைடு நூலகம்
对常见血清型的猪链球菌进行鉴 定。袁佳杰等【 ４ Ｊ 从忠病猪 中分离 到了多种细菌 。农业 部于２ ０ ０ ７ 年５ 月研 制成功疫苗 并广 泛应 用，并取 得 了不 错 的免疫 效果 。本试验 采集具 有 典型高致病 性猪 蓝耳病 病变特 征 的心 、肝 、脾 、肺 、 肾、小肠和 淋 巴结 等制作 成石 蜡切 片 ，观 察其病 理变化
，
给养殖业带来 了极 大地 损失 。余旭平等ｆ ｌ 】 对浙江 省几
个 不 同规模 、不 同发病情 况 的猪场 的空气 细菌 含量进行
了测试 ，结果发现 该病 的严重 程度 与猪 舍 内空气的细 菌
含量存在 明显 的正相关 性 。朱 军莉等【 】 设计 了３ 条 引物 进 行Ｐ Ｃ Ｖ ｏ １ 和Ｐ Ｃ Ｖ － ２ 的检测 ，结 果表 明 ，Ｐ Ｃ Ｖ － ２ 的阳性 率为 ３ ６ ． １ ７ ％，Ｐ Ｃ Ｖ － Ｉ 单独感染 阳性 率为３ ４ ． ０ ４ ％。张秀亮 等【 ３ 】 针
１ ． ２ 主要 试 剂 １ ０ ％甲醛溶 液 、５ ０ ％酒 精 、７ ０ ％酒精 、 ８ ０ ％酒 精 、９ ０ ％酒精 、９ ５ ｔ 冶酒精 、 １ ０ ０ ％酒精 、酒 精 二 甲
轻托起 ，切片 切取 …定长 度之 后 ，用毛笔 或镊 子轻轻 取
苯、二 甲苯石蜡 、石蜡Ｉ 、石 蜡Ｉ Ｉ 、苏木 精染 色液 、伊红
Ｉ Ｉ （ １ ５ ｍｉ ｎ ） ，使组织达 到透 明。 ２ ． ５ 浸蜡 此 步骤 是 在温 箱 内进行 ，温度 调 至５ ８ ＂ Ｃ左 右 ，使 它恰好 熔化 石蜡 。浸 蜡过 程 为：二 甲苯石蜡（ １ ： １ ） （ １ ５ ｍｉ ｎ ） 一石蜡Ｉ （ ３ ０ ｍｉ ｎ ） － － － ） 石蜡Ｉ Ｉ （ １ ｈ ． ２ ｈ ） 。 ２ ． ６ 包埋 、修 块 包埋 盒用 光亮且 厚的纸折叠成纸盒 井 进行编 号。采用的石蜡熔 点为５ ４ － － ５ ６ ℃ 。包埋方法 是把预
染色液 。
出至４ Ｏ ～ ４ ５ ℃ 的恒温 水箱 中展 片。等切 片展 开后ｆ ｌ ｊ 清 沽的
载玻 片从水 中捞 出，拨 正位置 ；把 贴好切 片的载玻 片放 在染色架上竖立排水 ，然后烤片 。
２ 试验方法
２ ． １ 组织 固定 小块病料 采集 后迅速 放入 １ ０ ％甲醇溶液 中进行固定，固定时间在２ ４ ｈ 以上 。 ２ ． ２ 水洗 固定好 的组织块 用流水冲 洗 １ ２ ～ ２ ４ ｈ ，把福 尔
特点 。
热 的 包埋 盒 放平 ，将 温 箱 中 熔 化好 的石蜡 倒 进 包埋 盒 内，迅速 用预热 的镊 子轻轻 将组织 放人 包埋盒 内，将要
切 的面朝 下摆正位 置 ，等到 石蜡表 面凝 同之后 ，将 包埋 盒轻轻 放人冷水 内，经 ３ ０ ａｉ ｒ ｎ 后耿 出，剥开包埋盒 ，取 出
有合胞体等。 关键词 高致病性猪蓝耳病 组织病理学 研究
中图分类号：￥ ８ ５ ２ ． １ ６ ＋ ６ 文献标 识码 ：Ａ 文章编号 ：１ ０ ０ ７ — １ ７ ３ ３ （ ２ ０ １ ３ ） ０ １ — ０ ０ １ ６ ． ０ ２
马林清洗 出来 ，防止福尔马林残 留于组织中影响切片。
发生 ， 目前该疾病 已成 为影 响养猪 业发 展的主 要疾病之
一
温下进行 ，顺序 为３ ０ ％酒精（ １ ｈ ） － － ． ５ ０ ％酒精（ １ ｈ ） － － ， ７ ０ ％酒精 ｆ ２ ｈ ） － ＇ ＊ ８ ０ ％酒精（ ２ ｈ ） － － ＊ ９ ０ ％酒精（ ２ ｈ ） － ＊ ９ ５ ％酒精 过夜 一１ ０ ０ ％ 酒精Ｉ （ １ ． ５ ｈ ） － ｑ０ ０ ％酒精Ｉ Ｉ （ １ ． ５ ｈ ） 。 ２ ． ４ 透明 采用 二 甲苯在 室温下进 行透 明组织块 。过程 是二 甲苯 酒 精（ １ ５ ｍｉ ｎ ） 一 二 甲苯Ｉ （ １ ０ ｍｉ ｎ ） － － － ， 二 甲 苯
２ ０ ０ １ 年７ 月开始 ，在 浙江省和 周边地 区大面 积爆发 了
一
种主要表现 为病 猪持续 高温 、皮肤 发红 、食欲废 绝 、
２ ． ３ 脱水
采用逐 级提高 酒精浓度 进行脱水 。脱水在室
呼吸综合 症为主要 特征 的猪病 ，有 极高 的发病 率和死亡 率。给养 殖业带 来 了极 大 的破坏 。２ ０ ０ ６ 年南方 多省均有
粘 贴 在 一‘ 个 小 方 形 的 术块 上 ，然 后将 其 固 定在 切 片机
上 。装上锋 利 的切 片 刀（ 刀 的斜度 为 ｌ ５ 。 ） ，调整蜡 块切面 使之与 刀 口平 行。把 厚度调节器调在５ ｕ ｍ左右。左手平持 毛笔 ，右 手旋 动切 片机把 。切 片带 出来 之后 ，用毛笔轻
染色 后观察 ，显 示。 肾小管 上皮 细胞 变性 、坏死 、脱 落减 少、肾脏局部 出血 、肾小球见有萎 缩；肺的病例变化差异较 大，
可见到肺气肿、出血、肺泡壁增厚 、单核淋巴细胞等炎性细胞渗出和肺泡内充满纤维素样蛋白渗出物等；肝脏见液化性
坏死灶、肝 小叶 间结缔组 织增 生；脾脏 的动脉鞘部位淋 巴细胞减 少，噬酸性粒 细胞浸 润，脾小体周 围出血；淋 巴结中见
蜡 块 ，把 组 织 蜡 块 的上 下 两 端 修 平
１ 材料与试剂
１ ． １ 病料 选 取具 有 高致 病 性猪 蓝 耳 病典 型 症状 的病 猪 ，采集心 、肝 、牌 、肺 、 肾、小肠 和淋 巴结等 组织 ，
取材部位为病灶 与正常组织的结合部位。
２ ． ７ 切 片、贴 片 将烧热 的解剖 刀平烙蜡块底 面 ，迅速
２ ０ １ ３年第 ３ ４ 卷
高致病 性猪蓝耳病 的组织病理 学研 究
张秀亮① 李 丽② （ ①山东 省潍坊市寒亭区畜牧兽医 局 ２ ６ １ １ ０ ０ ②山东 省莱阳市沐浴店兽医站）
摘要 采集具有 典型 高致 病性 猪蓝耳病病 变特征 的心、肝、脾 、肺 、肾、小肠 和淋 巴结等制作成石蜡切 片，经Ｈ ． Ｅ
对猪链球菌的谷氨酸 脱氢 酶基 因设计 了分型Ｐ Ｃ Ｒ的引物 ， பைடு நூலகம்
对常见血清型的猪链球菌进行鉴 定。袁佳杰等【 ４ Ｊ 从忠病猪 中分离 到了多种细菌 。农业 部于２ ０ ０ ７ 年５ 月研 制成功疫苗 并广 泛应 用，并取 得 了不 错 的免疫 效果 。本试验 采集具 有 典型高致病 性猪 蓝耳病 病变特 征 的心 、肝 、脾 、肺 、 肾、小肠和 淋 巴结 等制作 成石 蜡切 片 ，观 察其病 理变化
，
给养殖业带来 了极 大地 损失 。余旭平等ｆ ｌ 】 对浙江 省几
个 不 同规模 、不 同发病情 况 的猪场 的空气 细菌 含量进行
了测试 ，结果发现 该病 的严重 程度 与猪 舍 内空气的细 菌
含量存在 明显 的正相关 性 。朱 军莉等【 】 设计 了３ 条 引物 进 行Ｐ Ｃ Ｖ ｏ １ 和Ｐ Ｃ Ｖ － ２ 的检测 ，结 果表 明 ，Ｐ Ｃ Ｖ － ２ 的阳性 率为 ３ ６ ． １ ７ ％，Ｐ Ｃ Ｖ － Ｉ 单独感染 阳性 率为３ ４ ． ０ ４ ％。张秀亮 等【 ３ 】 针
１ ． ２ 主要 试 剂 １ ０ ％甲醛溶 液 、５ ０ ％酒 精 、７ ０ ％酒精 、 ８ ０ ％酒 精 、９ ０ ％酒精 、９ ５ ｔ 冶酒精 、 １ ０ ０ ％酒精 、酒 精 二 甲
轻托起 ，切片 切取 …定长 度之 后 ，用毛笔 或镊 子轻轻 取
苯、二 甲苯石蜡 、石蜡Ｉ 、石 蜡Ｉ Ｉ 、苏木 精染 色液 、伊红
Ｉ Ｉ （ １ ５ ｍｉ ｎ ） ，使组织达 到透 明。 ２ ． ５ 浸蜡 此 步骤 是 在温 箱 内进行 ，温度 调 至５ ８ ＂ Ｃ左 右 ，使 它恰好 熔化 石蜡 。浸 蜡过 程 为：二 甲苯石蜡（ １ ： １ ） （ １ ５ ｍｉ ｎ ） 一石蜡Ｉ （ ３ ０ ｍｉ ｎ ） － － － ） 石蜡Ｉ Ｉ （ １ ｈ ． ２ ｈ ） 。 ２ ． ６ 包埋 、修 块 包埋 盒用 光亮且 厚的纸折叠成纸盒 井 进行编 号。采用的石蜡熔 点为５ ４ － － ５ ６ ℃ 。包埋方法 是把预
染色液 。
出至４ Ｏ ～ ４ ５ ℃ 的恒温 水箱 中展 片。等切 片展 开后ｆ ｌ ｊ 清 沽的
载玻 片从水 中捞 出，拨 正位置 ；把 贴好切 片的载玻 片放 在染色架上竖立排水 ，然后烤片 。
２ 试验方法
２ ． １ 组织 固定 小块病料 采集 后迅速 放入 １ ０ ％甲醇溶液 中进行固定，固定时间在２ ４ ｈ 以上 。 ２ ． ２ 水洗 固定好 的组织块 用流水冲 洗 １ ２ ～ ２ ４ ｈ ，把福 尔
特点 。
热 的 包埋 盒 放平 ，将 温 箱 中 熔 化好 的石蜡 倒 进 包埋 盒 内，迅速 用预热 的镊 子轻轻 将组织 放人 包埋盒 内，将要
切 的面朝 下摆正位 置 ，等到 石蜡表 面凝 同之后 ，将 包埋 盒轻轻 放人冷水 内，经 ３ ０ ａｉ ｒ ｎ 后耿 出，剥开包埋盒 ，取 出
有合胞体等。 关键词 高致病性猪蓝耳病 组织病理学 研究
中图分类号：￥ ８ ５ ２ ． １ ６ ＋ ６ 文献标 识码 ：Ａ 文章编号 ：１ ０ ０ ７ — １ ７ ３ ３ （ ２ ０ １ ３ ） ０ １ — ０ ０ １ ６ ． ０ ２
马林清洗 出来 ，防止福尔马林残 留于组织中影响切片。
发生 ， 目前该疾病 已成 为影 响养猪 业发 展的主 要疾病之
一
温下进行 ，顺序 为３ ０ ％酒精（ １ ｈ ） － － ． ５ ０ ％酒精（ １ ｈ ） － － ， ７ ０ ％酒精 ｆ ２ ｈ ） － ＇ ＊ ８ ０ ％酒精（ ２ ｈ ） － － ＊ ９ ０ ％酒精（ ２ ｈ ） － ＊ ９ ５ ％酒精 过夜 一１ ０ ０ ％ 酒精Ｉ （ １ ． ５ ｈ ） － ｑ０ ０ ％酒精Ｉ Ｉ （ １ ． ５ ｈ ） 。 ２ ． ４ 透明 采用 二 甲苯在 室温下进 行透 明组织块 。过程 是二 甲苯 酒 精（ １ ５ ｍｉ ｎ ） 一 二 甲苯Ｉ （ １ ０ ｍｉ ｎ ） － － － ， 二 甲 苯
２ ０ ０ １ 年７ 月开始 ，在 浙江省和 周边地 区大面 积爆发 了
一
种主要表现 为病 猪持续 高温 、皮肤 发红 、食欲废 绝 、
２ ． ３ 脱水
采用逐 级提高 酒精浓度 进行脱水 。脱水在室
呼吸综合 症为主要 特征 的猪病 ，有 极高 的发病 率和死亡 率。给养 殖业带 来 了极 大 的破坏 。２ ０ ０ ６ 年南方 多省均有
粘 贴 在 一‘ 个 小 方 形 的 术块 上 ，然 后将 其 固 定在 切 片机
上 。装上锋 利 的切 片 刀（ 刀 的斜度 为 ｌ ５ 。 ） ，调整蜡 块切面 使之与 刀 口平 行。把 厚度调节器调在５ ｕ ｍ左右。左手平持 毛笔 ，右 手旋 动切 片机把 。切 片带 出来 之后 ，用毛笔轻
染色 后观察 ，显 示。 肾小管 上皮 细胞 变性 、坏死 、脱 落减 少、肾脏局部 出血 、肾小球见有萎 缩；肺的病例变化差异较 大，
可见到肺气肿、出血、肺泡壁增厚 、单核淋巴细胞等炎性细胞渗出和肺泡内充满纤维素样蛋白渗出物等；肝脏见液化性
坏死灶、肝 小叶 间结缔组 织增 生；脾脏 的动脉鞘部位淋 巴细胞减 少，噬酸性粒 细胞浸 润，脾小体周 围出血；淋 巴结中见
蜡 块 ，把 组 织 蜡 块 的上 下 两 端 修 平
１ 材料与试剂
１ ． １ 病料 选 取具 有 高致 病 性猪 蓝 耳 病典 型 症状 的病 猪 ，采集心 、肝 、牌 、肺 、 肾、小肠 和淋 巴结等 组织 ，
取材部位为病灶 与正常组织的结合部位。
２ ． ７ 切 片、贴 片 将烧热 的解剖 刀平烙蜡块底 面 ，迅速