血细胞检验的几个主要项目的镜检方法

血细胞检验的几个主要项目的镜检方法

——唐湘

器材显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球

试剂红细胞稀释液（枸橼酸钠1.0g。36%甲醇液1.0ml。氯化钠0.6加蒸馏水稀释100ml混匀过滤2次，备用）

白细胞稀释液（配制成浓度为2%的冰乙酸液:2ml冰乙酸+98ml 蒸馏水，再滴2-3滴亚甲兰）

血小板稀释液(草酸铵法稀释液：分别溶解草酸铵1．0g及EDTA·Na20．012g，合并后加蒸馏水至100ml，混匀)

标本EDTA抗凝血

一、红细胞计数

操作

1 加稀释液取小试管1支，加红细胞稀释液2ml。

2 加血用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10μl，擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管2～3次，立即混匀。

3 充池混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池，室温下平放3～5分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。

4 计数用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。

5计算红细胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1010

=N/100×1012

注意事项

1. 将红细胞稀释液充入计数池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。

2. 红细胞在计数池中若分布不均，每个中方格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正常数值范围内，2次红细胞计数相差不得超过5%。

二、白细胞计数

操作

1.加稀释液用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。

2.加血用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl，擦去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管2～3次，混匀。

3.充池混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细胞悬液冲入计数池，室温下平放3～5分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。

4. 计数用低倍镜依次计数4个大方格内的白细胞数。

5.计算红细胞/L=N/4×10×106×20=N/20×109/L

注意事项

1.在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。

2.白细胞在计数池中若分布不均，大方格间细胞计数相差一般不超过10%。

3.白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的方法。

4.白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使白细胞计数偏高，此

时应计算白细胞校正值。

三、血小板计数

操作

1.加稀释液用吸管吸取稀释液0.38ml于小试管中。

2.加血用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl，擦去管外余血，轻轻加至血小板稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管2～3次，混匀。

3.充池混匀后用微量吸管将血小板悬液充入计数池，室温下静置10～15分钟，待血小板充分下沉后于显微镜计数。

4. 计数用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的血小板数。

5.计算血小板/L=N×5×10×106×20=N×109/L

注意事项

1.混匀充分，不可过度振荡，以免血小板破坏、聚集或有气泡，引起计数误差。

2.在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。

3.时间较长，血小板会失去光泽而不易辨认，应在1h内计数完毕

4.每份标本最好计数2次，若计数误差在10%以内，取其均值报告，若计数之差大于10%，应作第3次计数，取2次相近结果的均值报告。

血细胞计数室各计数区的计数对象、范围和单位换算