细胞内钙离子的检测方法

产品简介： 贝博钙离子检测试剂盒采用 BBcellProbeTM F3 细胞内钙离子浓度的荧光探针检测钙离
子。BBcellProbeTM F3 穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3，从而被滞留 在细胞内。Fluo-3 游离配体几乎是非荧光性的，其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。但 是，当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，荧光会增加 60 至 100 倍，最大激发 波长为 506nm，最大发射波长为 526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为 488nm 左右， 发射波长为 525～530nm。可以使用荧光显微镜、酶标仪、激光共聚焦显微镜或流式细胞 仪检测细胞内钙离子浓度的变化。
波长 526nm。
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试剂盒以外自备试剂和仪器 ● Hanks balanced salt solution（HBSS）或HEPES或PBS ● 移液器及吸头 ● 荧光显微镜
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电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品号 BB-4104 BB-4105 BB-4106 BB-4107 BB-4108 BB-4112 BB-4123 BB-4137 BB-4132
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产品说明书
使用方法：
使用注意事项： ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液
体洒落。 ● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。 ● 染色后立即进行分析。 ● 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先确
2、 将 BBcellProbeTM F3 染色工作液加入细胞，在 37℃孵育 20 分钟。 3、 加入 5 倍体积的含有 1%胎牛血清的 HBSS，再继续孵育 40 分钟。 4、 用 PBS 或 HBSS 洗涤细胞 2-3 次。用 HBSS 重悬细胞 5、 37℃下孵育 10 分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长 488-506nm，发射
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产品 细胞周期检测试剂盒 JC-1 线粒体膜电位试剂盒 Caspase 3 活性检测试剂盒 Caspase 8 活性检测试剂盒 Caspase 9 活性检测试剂盒 Caspase 10 活性检测试剂盒 细胞凋亡形态学检测试剂盒 Rhodamine 123 染色试剂盒 AO/EB 双染试剂盒
定最佳条件。以下方法仅供参考。 ● 可以在染色溶液中加入等体积的 20% Pluronic F127 溶液，Pluronic F127 可以帮助 BBcellProbeTM
F3 更快进入细胞，不建议在 Pluronic F127 中长期保存 BBcellProbeTM F3 溶液。
1、 染色工作液的配制： 用 HBSS 稀释 BBcellProbeTM F3 溶液 400 倍-4000 倍，配制成 BBcellProbeTM F3 染色 工作液。 【注】：推荐该探针加载浓度在 400-4000 倍稀释，具体的使用浓度需根据实验要求进行 优化。为了避免过度加载造成细胞毒性，建议在取得有效结果的基础上尽量使用最低探 针浓度。
产品说明书
细胞内钙离子检测试剂盒（BBcellProbeTM F3 法）
产品组成：
产品编号 规格
钙离子染色液
BB-48112-1 50 -500T 25ul
BB-48112-2 100 -1000T
50ul
储存条件： -20℃避光保存。
有效期： 一年。
注意事项： ● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。 ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管 底，避免开盖时试剂损失。 ● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清 洗并彻底清除残留清洁剂。 ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。 ● 钙离子染色液为 DMSO 溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管 壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固 在吸头内壁产生损耗。 ● 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。