HPLC法测定如意金黄散中姜黄素的含量

※通讯作者：杨光琼，E-mail ：Yangguangqiong@

HPLC 法测定如意金黄散中姜黄素的含量

杨

敏1，2，杨光琼3※，赵

青1

（1.南通大学杏林学院，江苏南通226007；2.南通大学医学院，江苏南通226001；3.松滋市中医院，湖北松滋434200）

【摘要】目的：建立HPLC 法测定如意金黄散中姜黄素含量的方法。方法：色谱柱为Shimadzu VP-ODS 柱（250mm ×4.6mm ，5

μm ），流动相为甲醇-9.6%冰醋酸（50:50），流速1.0mL/min ，检测波长为420nm ，柱温为25℃。结果：姜黄素在波长为0.4944~2.4720μg （r=0.9999）内呈良好的线性关系，回收率分别为98.84%（RSD=1.76%）。结论：本方法简便、准确。

【关键词】高效液相色谱法；如意金黄散；姜黄素文章编号：1009-5519（2011）10-1461-02

中图分类号：R28

文献标识码：A

Determination of curcumin content in Ruyi Jinhuang Power by RP-HPLC

YANG Min 1，2，YANG Guang-qiong 3※，ZHAO Qing 1

(1.Xinglin College ，Nantong University ，Nantong ，Jiangsu 226001，China ；2.Medical College ，Nantong University ，Nantong ，Jiangsu 226001，China ；3.Songzi Municipal Hospital of Chinese Medicine ，Songzi ，Hbei 434200，China)

【Abstract 】Objective ：To establish a method for determination of curcumin in Ruyi Jinhuang Power by HPLC.Methods ：The sample

was separated on the Shimadzu C18column(250mm ×4.6mm ，5μm)with methanol －9.6%glacial acetic acid(50:50)as the mobile phase.The flow rate was 1.0mL/min.The detection wavelength was 420nm and the column temperature was 25℃.Results ：Curcumin had the good linear relationship in the range of 0.4944－2.4720μg (r=0.9999).The average recovery rate was 98.84%(RSD=1.76%).Conclusion ：The method is simple and accurate.

【Key words 】HPLC ；Ruyi Jinhuang Powder ；

Curcumin

现代医药卫生2011年第27卷第10期

如意金黄散出自陈实功的《外科正宗》，由天花粉、大黄、姜黄、黄柏、白芷、天南星、厚朴等多味药组成，为《中国药典》2010年版一部收录的品种。具有活血散瘀、消肿止痛之功效，用于治疗疮疡肿痛、丹毒流注、跌打损伤等症[1]。药典规定每1g 如意金黄散中含姜黄素不得少于1.0mg 。目前国内有20多个厂家生产如意金黄散，不同厂家生产的产品各种成分的含量差异较大，特别是姜黄素以外的活性成分。目前对如意金黄散中单体的含量测定有不少文献报道[2~6]。本研究采用高效液相色谱法（HPLC ）法测定不同厂家如意金黄散中姜黄素的含量，为该制剂的质量控制提供参考。

1仪器与试药

岛津LC-20AD 高效液相色谱仪，SPD-20A 型紫外检测器

（日本Shimadzu 公司）；KQ-250VDW 型双频数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AUW120D 型电子天平（日本Shi -

madzu 公司）；姜黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号0823-9802，含量≥99.8%）。如意金黄散购自鞍山制药有限公

司、北京同仁堂制药有限公司、江苏天然707制药有限公司、营口宏升药业有限公司、大丰人民医院自制。甲醇为色谱纯，水为自制重蒸水，其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1

溶液配制

2.1.1

对照品溶液的制备：精密称取经P 2O 5减压干燥器中干燥

36h 姜黄素标准品4.12mg ，置于25mL 棕色容量瓶内，加甲醇20mL ，超声处理20min 使溶解，放至室温后加甲醇定容至刻度。

用0.22μm 有机膜过滤，得到姜黄素对照品溶液。

2.1.2供试品溶液的制备：精密称取如意金黄散药品1.50g ，置

入50mL 容量瓶中，加入30mL 甲醇，超声30min ，放冷至室温，用甲醇定容至刻度，用0.22μm 有机膜过滤，得到供试品溶液。

2.1.3阴性溶液的制备：按处方比例称取除去姜黄素的其他中

药按如意金黄散制备工艺制成阴性样品，按2.1.2项下方法操作，即得。

2.2色谱条件：色谱柱Shimadzu VP-ODS 柱（250mm ×4.6mm ，5μm ）；流动相为甲醇-9.6%冰醋酸（50:50）。柱温25℃；流速1.0mL/min ；检测波长420nm 。对照品、供试品和阴性对照溶液色谱

图见图1。

2.3线性关系考察：分别精密吸取上述对照品溶液3、6、9、12、

15μL 注入高效液相色谱仪，以峰面积Y 对进样量X （μg ）进行线

性回归得回归方程，Y=4.27×106×-2.74×105(r=0.9999，n=5)，结果显示姜黄素的进样量与峰面积在0.4944~2.4720μg 范围内线性有良好的线性关系。

2.4精密度试验：精密量取对照品溶液20μL ，重复进样6次，姜黄素峰面积的RSD 分别为1.15%。

2.5

重复性试验：精密取如意金黄散样品（北京同仁堂）6份，

按上述方法测定姜黄素含量的RSD 为0.82%。结果表明本方法重复性良好。

2.6稳定性试验：取供试品（北京同仁堂）溶液，分别在配置后

0、2、8、16、20、24h 进样测定，姜黄素峰面积的RSD 为1.13%，结

果表明供试品溶液在24h 内基本稳定。

2.7回收率试验：精密称取5份已知含量的样品，精密加入对

照品溶液适量，按供试品溶液制备方法处理，计算各成分的平均加样回收率，结果见表1。

2.8样品含量测定：取5个厂家的如意金黄散样品，按“2.1”项

下方法，每个厂家平行制备3份供试品溶液，按上述色谱条件测定，由外标法计算其含量，结果分别为2.12、1.56、1.75、2.44、

1.34（mg/g ）。3讨论

3.1

检测波长的选择：2005版《中国药典》[1]720一部姜黄采用高

效液相色谱法测定以430nm 为测定波长，本实验在290nm 、294nm 和420nm 分别测试发现，虽然都有吸收，但420nm 处吸收灵敏度高，且避免了杂质的干扰，故选定420nm 作为检测波长。

3.2流动相的选择：文献几乎全部使用乙腈或甲醇-醋酸水作

为流动相，其中药典以乙腈-40%冰醋酸（48:52）作为流动相。本实验使用乙腈-9.6%冰醋酸（50:50），结果色谱峰峰形尖锐，保留时间适当，样品中的各色谱峰能完全分开。参考文献：

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.化学工业出版社，

2010：247.

[2]

陈逸红，张芬娥，王慧洁.HPLC 法测定如意金黄散中姜黄素的含量[J].中成药，2004，26（12）：1075.[3]韩刚，张卫国，王超，等.高效液相色谱法测定如意金黄散中5

种成分的含量[J].中国医院药学杂志，2007，27（1）：124.

[4]张

艺，毛

平，李琴韵.毛细管区带电泳法测定金黄散中盐酸小檗碱及盐酸巴马亭的含量[J].中成药，2003，25（11）：877.[5]

毛泉明，毛

平，叶福媛，等.反相高效液相色谱法测定如意金黄贴

膏中小檗碱的含量[J].中国医院药学杂志，2002，22（8）：477.

[6]胡淑萍，周新蓓，欧阳荣.高效液相色谱法测定如意金黄散中大黄素，大黄酚的含量[J].中国实验方剂学杂志，2003，9（2）：19.

收稿日期：2010-12-31

表1

加样回收率试验（n=5）

药品

姜黄素

127.07127.07127.07127.07127.07

样品量（μg ）

164.8164.8164.8164.8164.8

加入量（μg ）

281.53288.64294.88291.37285.96

测得量（μg ）

回收率（%）

98.84

平均回收率

（%）

RSD （%）

96.4698.89101.0399.8397.98

1.76

图1

HPLC 色谱图

（A 对照品；B 供试品；C 阴性）

A B

C

1462