微生物检验

1.何谓敏感、中度敏感、耐药?

（必考敏感或耐药）（名词解释）

敏感：表示测试菌能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭。

中度敏感：指测试菌可被测定药物大剂量给药后在体内能达到的浓度所抑制，或在测定药物浓集部位的体液中，如尿中被抑制。

耐药：表示测试菌不能被在体内感染部位可能达到的抗菌药物浓度所抑制。

2.试述L型细菌及其形成机理和培养特点。

L型细菌，即细菌细胞壁缺陷的细菌，因其首先由李斯特(Lister)研究院所发现，故取其第一个字母而称之。（常考名词解释）

细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，由于作用于细胞壁的抗生素、溶菌酶等因素的影响，当肽聚糖结构遭受破坏或其合成受到抑制时，虽然大多数细菌裂解死亡，但有时也有一些细菌不死，这些细菌即L型菌。L型菌需在高渗低琼脂(0.8％一0.9％)的含血清(20%)培养基中培养，生长缓慢，一般生长期为2—7天，菌落为“油煎蛋”状，需放大100倍左右才能看到菌落，可通过传代培养而返祖。

3. 简述血、脑脊液、尿、粪便、痰及脓汁等送检细菌培养标本的质量要求。（此题重点看）

(1)血液(骨髓)标本：①在治疗前，并在发热高峰时抽取标本进行培养最为适宜。

②静脉穿刺或骨髓穿刺时应严格消毒，防止污染。标本采取后，以无菌技术直接注入血培养瓶内，轻摇混合，使血液(骨髓)不致凝固。必要时，做真菌或厌氧菌培养。⑧采血量为培养液的(1—2)／10，骨髓接种量为1—2mL。

(2)脑脊液标本：①以无菌技术由腰椎穿刺采集脑脊液3—5mL盛于灭菌容器中，立即送检。厌氧培养则应床边接种。②天冷时宜将标本置35℃条件下保温送检，以免某些病原菌死亡。

(3)泌尿、生殖系统标本：①用作尿液培养的标本，一般取中段尿。先用肥皂水及温水洗涤病人外阴部，开始排出之尿应弃去，留取中段尿于无菌试管中。必要时行无菌导尿。均应及时送检。②分泌物及前列腺或生殖系统其他标本可由医生无菌操作采集于无菌试管内送检。（我之前考过这个）

(4)粪便标本：应取新鲜带粘液或脓血、液状、稀便等可疑部分，也可用盐水浸湿的无菌棉拭插入肛门内采取。标本如不能及时送检，可放入甘油盐水中。如霍乱粪便则应放人霍乱弧菌保存液中或碱性蛋白胨水中。

(5)痰液及呼吸道标本；①取痰液标本的时间以清晨为好。用温水漱口数次，然后用力自气管深部咳出痰液于无菌容器内送检。②检查白喉杆菌时，用无菌棉拭轻擦咽、喉、鼻粘膜或病灶部位的伪膜与粘液标本。

(6)脓汁及创伤感染标本：①创伤：用无菌棉拭直接蘸取脓汁或分泌物。②脓肿：患部消毒，无菌抽取脓汁。③检查放线菌的标本应取多量脓汁，尤应注意采集其中“硫磺颗粒”。

4. 试述肠杆菌科的致病因素。

(1)内毒素：可引起发热、白细胞变化及代谢改变等严重者可导致休克。

(2)肠毒素：可致腹泻。

(3)其他致病因素：如穿透肠道上皮和粘附于粘膜的能力等。

5. 引起肠道感染的大肠埃希菌有哪些?其常用检验方法如何?

(1)产肠毒素大肠埃希菌(ETEC) 引起霍乱样肠毒素腹泻(水泻)。能产生两种肠毒素。一种为不耐热肠毒素(LT)、另一种为耐热肠毒素(ST)。检测LT一般使用改良Elek法；检测ST一般使用乳鼠胃内灌注法。

(2)肠侵袭性大肠埃希菌(ELEC) 引起志贺样腹泻(粘液脓血便)。一般使用豚鼠角膜侵袭力试验。

(3)肠致病性大肠埃希菌(EPEC) 主要引起婴儿腹泻。用EPEC多价诊断血清作凝集试验。

(4)肠出血性大肠埃希菌(EHEC) 此菌中最具代表性的是0157：H7血清型，可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征。一般检测是直接筛选不发酵山梨醇的菌落(无色菌落)，生化反应证实为大肠埃希菌，再经乳胶凝集试验测0157抗原。

(5)肠凝聚型大肠埃希菌(EAggEC) 可引起腹泻，用液体培养加凝集试验检测细菌对细胞的粘附性或用DNA探针技术。

6 . 从细菌检验的用途方面，常用的培养基种类有哪些?（一般考选择题）

(1)基础培养基如肉浸液等。

(2)营养培养基如葡萄糖肉汤培养液、营养琼脂、血琼脂等。

(3)鉴别培养基如双糖铁琼脂、枸橼酸盐琼脂、各种单糖发酵管等。

(4)选择培养基如SS琼脂、伊红美蓝琼脂等。

(5)特殊培养基如厌氧培养基、L型细菌培养基、结核杆菌培养基、沙保罗培养基等。