组织工程皮肤的临床研究进展

的血管长入一’７ Ｊ＿。
活性复合皮：以异体或异种胶原作为细胞支
架，再将培养的自体表皮或异体表皮细胞膜片植于 其上形成的复合皮肤。复合皮肤替代物是最接近正
常皮肤的组织工程皮肤。 ２组织工程皮肤的临床应用
１．２．２脱细胞真皮支架：同种异体真皮＋自体表皮 制成的复合皮中自体表皮是来自自体刃厚皮或培养 的角朊细胞膜片。而异体真皮中由于细胞成份有较 强的抗原性。易导致免疫排斥反应，使移植失败，故
成２ ｍｌＴｌ厚的多孔结构纤维编织体，覆以０．２ ｍｍ厚
的既有表皮层又含有真皮层的组织化工程皮肤，由 Ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ公司生产，是目前惟一经美国食品和 药品管理局批准上市的商品化器官型活性皮肤替代 物，价格昂贵，２５美元／ｃｍ２。它是在含有人成纤维 细胞（同种异体）的胶原凝胶表面种植异体人表皮细 胞，再经培养而成。其不足之处是创面感染率高 （１０．５％），创面收缩率比中厚皮高（１０％～１５％），胶 原成分易被胶原酶消化降解。此外，异体表皮细胞
Ｉ．Ｉ．３
自／异体表皮细胞混合膜片：自／异体表皮细
胞混合移植可以达到以较少的自体表皮细胞覆盖较 大创面的目的。虽然异体表皮细胞移植后只能在创 面上做暂时存留，但他们合成与分泌的多种生长因 子却能有效的促进自体表皮细胞的生长与扩增。将 某些生长因子基因转染体表皮细胞后用于创面移 植，这些转基因细胞可在创面释放足量的生长因子， 促进创面愈合。在表皮细胞培养中可通过基因修饰 来影响细胞素的合成与分泌，就可增强细胞对创面 愈合的效应。 Ｉ．Ｉ．４表皮干细胞膜片：经体外培养所得到的表皮 细胞膜片中大部分为终末分化细胞，已失去进一步 分化的能力，限制了该技术的进一步应用。表皮干 细胞的体外培养成功为这项技术提供了广阔的应用 空间。由于表皮干细胞在皮肤中总的比例很低，且 体外分离培养、纯化及在培养中如何维持其为分化
自体表皮细胞膜片：１９７５年Ｒｈｅｉｎｅｗａｌｄ等
利用照射处理过的３Ｔ３成纤维细胞作为滋养层，培 养人表皮细胞获得成功［１］。１９８１年Ｏ’Ｃｏｎｎｅｌ等首 次应用此方法在体外培养出适合于移植的自体表皮 细胞膜片［ｚ］。应用组织工程学的基本方法，将体外 培养的高浓度角朊细胞吸附在生物相容性良好并可 被人体逐步吸收的细胞外基质上使其扩增，进行人 工皮肤构建和移植。该替代物最大优点是能用少许
想的替代物。烧伤创面治疗是应用组织工程皮肤技 术最早的领域，特别是Ⅱ度以上需要进行皮肤移植 的烧伤患者，包括早期创面覆盖及后期瘢痕修整。 Ｃｌａｙｍａｎ等把Ｉｎｔｅｇｒａ用于烧伤后引起的增生性瘢 痕蓖建，术中将瘢痕组织全部切除达一定深度，以保 证移植物植入到无瘢痕且血运丰富的血管床区，术 后其功能恢复良好［１１｜。刘亚玲等用组织工程 ＡｃｔｉｖＳｋｉｎ（艾尔肤公司，陕西）对３１例深度烧伤创 面进行修复。结果显示深Ⅱ度创面２５例，愈合时间
ｏｒ
ｐｒｏｂｅｎｅｃｉｄ ｄｏＤ，ＡＮＤＲＥＷ
ＡＢＣＢｌ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ
ａｒｅ
Ｔ，ＬＥＡＣＨ
ＪＰ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｍｍｏｎ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ
ａｌｔｅｒ ｂｌｏｏｄ ｂｒｉａｎ ｂａｒｒｉｅｒ
ｏｆ ｌｅｖｅｔｉｒａｃｅｔａｍ
ｒａｔｓ
ｎｏｔ
复合皮肤替代物：正常表皮真皮交界的基底膜
修复１９例慢性皮肤溃疡，与对照组相比应用后创面
明显缩小，试验组的平均愈合时间明显少于对照组
（２４ ｄ讲６４
部分有参差不齐的网状棘结构，大大增加了接触面
积，这对皮肤的强度和耐磨性都有重要意义。在分
子水平，真皮能促进表皮的生长和成熟。锚定纤维
ｄ），在使用ＡｃｔｉｖＳｋｉｎ过程中患者皮肤
第３０卷第６期 ２００９年６月
河 北 医 学 学 科 大 报 ＪＯＵＲＮＡＩ。ＯＦ ＨＥＢＥＩ ＭＥＤＩＣＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
Ｖ０１．３０
Ｎｏ．６ ２００９
Ｊｕｎｅ
・６３７・
［１６３
ＳＩＤＤＩＱＵＩ ｍｕｈｉｄｒｕｇ
Ａ，ＫＥＲＢ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ
Ｒ，ＷＥＡＬＥ ＭＥ。ｅｔ ａ１．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ
［收稿日期］２００９一Ｏｌ一０５；［修回日期］２００９—０３—０４ ［作者简介］沈奕（１９６９－－），女，上海崇明人，江苏省连云港市第 二人民医院副主任医师。医学学士。从事皮肤科疾病诊治研究。
万方数据
・
６３８
・
河北医科大学学报
第３０卷第６期
状态等关键性技术问题上有待于进一步完善。因此，
自体表皮干细胞膜片尚处于实验室阶段‘引。 １．２真皮替代物
ＥＪ］．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ，２００３，３４８
［１９］ＢＡＮＫＳＴＡＨＬ ＪＰ，ＨＯＦＦＭＡＮＮ Ｋ，ＢＥＴＨＭＡＮＮ
Ｇｌｕｔａｍａｔｅ
ｉｓ
Ｋ，ｅｔ
ａ１．
ｃｒｉｔｉｃａｌｌｙ ｏｆ
ｉｎｖｏｌｖｅｄ
ｉｎ
ｉｎ
ｓｅｉｚｕｒｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｔｈｅ
［１７］ＨＵＮＧ
ＣＣ，ＣＨＥＮ ｉｎ
ＣＣ，ＬＩＮ
ＣＪ，ｅｔ ａ１．Ｆｕｎｏｔｉｏｎａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ
比对照组提前６ ｄ（Ｐ＜Ｏ．０５）Ｌ１２３；ｎｌ度创面６例，愈
后，表皮细胞能够牢固的与脱细胞真皮结合，并不断
的扩展、增厚和上皮化。
１．２．３人工合成真皮支架：可作为支架的有尼龙网
膜、多聚半乳糖网。在网上种植成纤维细胞可作为
真皮类似物。其自体表皮或角朊细胞则来自自体刃 厚皮或新生儿的角朊细胞。此类材料存在大小不等 的微孔，有利于纤维血管结构的长入，有的真皮类似
ｃｏｌｏｎｉｅｓ ｆｒｏｍ ｓｉｎｇｌｅ
ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ，１９７５，６（３）：３３１—３３６．
２．４白癜风：ｖａｎ～Ｇｅｅ等用体外培养的自体黑素细 胞和角质化细胞的透明质酸混悬液撒播在已被激光 处理过的白斑病损区，３周后数字成像系统显示 ６２％患者移植区恢复了颜色［１ ９｜。Ｐｉａｎｉｇｉａｎｉ等从自 体正常皮肤取一小块活体表皮在用患者血清作为基 质的透明质酸生物膜上进行表皮细胞培养构建表皮 膜片，移植于经窄谱中波紫外线照射３周后的病损 区，经１８个月的随访，结果发现７５％局部和节段 型、３０％泛发型患者恢复着色［２州。卢涛等从自体表 皮培养出黑素细胞悬液，移植到１０例患者的白斑 区，３个月后６例在治疗点较周围自斑加深，２例色 素沉着较明显，并略发红，接近周围正常肤色［２１｜。 ２．５光化性紫癜：光化性紫癜又叫老年型紫癜，是 一种老年性退行性变化的皮肤病。Ｂａｎｔａ等对１例 老年男性光化性紫癜志愿者前臂薄层去皮，然后移 植Ａｐｌｉｇｒａｆ，创面愈合良好，移植部位可正常耐受牵 拉，美容效果也不错Ｌ２引。 ２．６外伤及外科继发性难以修复的皮损：组织工程 皮肤可以治疗瘢痕、巨痣、太田痣、纹身及一些肿瘤 等切除后形成继发皮损。Ｋｏｐｐ等用胶原结构的替 代物移植于２３例黑素瘤、鳞癌、血管肉瘤、基底细胞 癌及脑纺垂体瘤等手术继发性头皮缺损，仅有６例 患者由于头皮脓肿而延迟了创面愈合，其余患者都 较快愈合比３‘。Ｒｏｂｅｒｔａｎｃｉｓ等报道，在伊拉克、阿富 汗战争期间应用组织工程皮肤治疗战伤性皮肤缺 损，可以预防感染和创面干燥，减少疤痕形成，缩短 治愈时间，从而减轻伤员痛苦阻］。Ｍａｉｅｒ等用 Ａｐｌｉｇｒａｆ治疗ｌＯ例外伤性撕脱伤致皮肤萎缩，所有 患者均在６０岁以上，且多数长期使用激素，皮肤薄
１．１．１
的皮肤提供大量可供移植的皮源¨“］。
Ｉ．Ｉ．２
自体表皮细胞加载体：表皮细胞体外培养成
膜所需要的时间较长，为了缩短时间，有人将表皮细 胞种植到生物膜载体上再行移植。这一技术的产物 以“激光皮”为代表。“激光皮”的载体是用半合成的 透明质酸衍生物制成透明薄膜，用激光在膜上钻出 许多透膜微孔，将膜置于培养皿中，种植表皮细胞后 可发现表皮细胞在膜上方和下方形成克隆，然后将 膜从培养皿中取出，转移至受皮区。
【参考文献】 ＲＨＥＩＮＥＷＡＬＤ ＪＧ。ＧＲＥＥＮ Ｈ．Ｓｅｒｉａｌ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ
ｅｐｉｄｅｒｍａ ｋｅｒａｔｉｏｎ ｏｃｙｔｅｓ：ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｒａｌｉｎｌｌｉｎｇ
２．３营养不良型大疱性表皮松解症：Ｆｉｖｅｎｓｏｎ等 报道，用Ａｐｌｉｇｒａｆ治疗５例营养不良型大疱性表皮
物在新生真皮形成的过程中逐渐被生物降解‘…。
１．２．４活性真皮替代物：在真皮替代物中加入成纤 维细胞，提高真皮替代物诱导创而血管内皮细胞向 内移行的能力，加速ＩｌＩＬ管化速度，提高其促进表皮细
胞的生长、分化和基底膜形成的能力。Ｄｅｒｍａｇｒａｆｔ
合时间比对照组提前２０ ｄ（Ｐ＜０．０５）。Ｌｉｄａ等ｕ列 以口腔黏膜角质化细胞为种子细胞，以同种脱细胞 真皮为支架进行体外培养构建的组织工程皮肤治疗 大面积烧伤，也取得满意疗效。
组织工程皮肤是通过在体外培养扩增大量的功 能细胞，复合到支架材料，通过细胞与支架的相互作 用，诱导、生长形成三维的有活性的皮肤替代物。组 织工程皮肤在一定程度上克服了原有的皮肤供区不 足、免疫排斥、传播疾病等各种问题，为急性或慢性 皮肤损伤提供了全新的治疗理念，具有远大的开发 前景。本文就组织工程皮肤的分类及其临床应用作 一综述。 １组织工程皮肤的分类 组织工程皮肤可分为表皮替代物、真皮替代物 和复合皮替代物３种类型。 １．１表皮替代物
２．２慢性皮肤溃疡：Ｏｍａｒ等［１ ４］用Ｄｅｒｍａｇｒａｆｔ治
是活性真皮替代物的代表，具有较高的生物活性，植 入切痂创面后，基底的成纤维细胞和毛细血管内皮 细胞浸润较快，抗感染能力较强，不易被蛋白酶降
解。”。
１．３
疗静脉性慢性皮肤溃疡，创面１２周内愈合率高于对
照组（５０％协１２．５％），创面缩小明显好于对照组 （８４％＂ＵＳ １６％）。聂鑫等‘１５３用组织工程ＡｃｔｉｖＳｋｉｎ
ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
［Ｊ］．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ
Ｒｅｓ，２００４，５８（２—３）：８５—９１．
・综
述・
组织工程皮肤的临床研究进展
沈
奕（综述），李海燕（审校）
（江苏省连云港市第二人民医院皮肤科，江苏连云港２２２０２３） 【关键词】皮肤，人工；治疗应用；综述文献ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７—３２０５．２００９．０６．０４１ 【中图分类号】Ｒ３１８．１；Ｒ６２２．１ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１００７—３２０５（２００９）０６—０６３７—０４
松解症患儿，５～７ ｄ后观察，治疗部位９０％～１００％ 治愈，１０～１４ ｄ后，许多治愈部位接近正常皮肤，手
部及掌部皮损得到８０％～９０％改善ｕ…。 Ｄａｇｒｅｇｏｒｉｏ等用Ｉｎｔｅｇｒａ为１例并发鳞状上皮细胞 癌的隐性遗传营养不良型大疱性表皮松解症患者进
行移植，手术７周后移植物全部成活［１ ８‘。
可引起免疫排斥反应等问题，目前尚不能用于大面 积深度烧伤创面Ｌ１０］。
１．３．２
的硅胶薄膜暂时替代表皮，可以减少水分的丢失和 防止微生物的入侵。Ｉｎｔｅｇｒａ是一种具有与真皮相 似正常三维结构的双层人工皮肤，由硅膜（表皮层） 和从牛跟腱提纯的胶原与从鲨龟软骨中提取的６一 硫酸软骨素交联而成的真皮垫（真皮层）构成。 Ｉｎｔｅｇｒａ可引起排斥反应和炎症反应，在真皮垫和创 面的界面或真皮垫内无广泛的异物反应或炎症细胞 浸润。在初步临床应用中获得满意的效果。它的真 皮支架为多孔隙状，容纳自体成纤维细胞，利于自身
１．２．１
能帮助表皮牢固的黏附于真皮。创面缺乏真皮组 织，仅仅移植表皮不能获得良好的黏附。表皮和真 皮的复合皮片更接近生理皮肤的质量。
１．３．１
生物材料合成真皮替代物：目前在实验室尚
复合皮的组成：Ａｐｌｉｇｒａｆｔ是第一种商品化
无法合成真正意义上的真皮组织。有学者用小牛肌 腱胶原、６一硫酸软骨素与氨基葡聚糖的结合物构建
在制备该真皮过程中需经特殊处理。主要使真皮脱 细胞化而保留真皮基质部分。它能促进表皮的增 殖、分化和摹底膜的形成，诱导成纤维细胞和血管内 皮细胞有序的生长和分化等。与表皮细胞共｜一移植
２．１烧伤：自体皮肤移植是治疗烧伤的首选，但是 对于大面积烧伤，自体皮肤不能满足需求，异体皮肤
引起明屁的免疫排斥，组织工程皮肤无疑是较为理
ｅｐｉｌｅｐｓｙ ＡＢＣＢＩ
ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｅｐｉｌｅｐｓｙ
ｕｓｉｎｇ
ａ
ｇｅｎｅ－ｗｉｄｅ
ｔａｇｇｉｎｇ
ａｐｐｒｏａｃｈ［Ｊ］．
ｗｉｔｈ
ａ
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ
ｉｎ
ｔｈｅ
Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２００７．１７（３）：２１７－２２０．
ｄｒｕｇ－ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ ｇｅｎｅ （１５）：１４４２—１４４８．
ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ
ｄｒｕｇｓ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔ
［２０］ＰＯＴＳＣＨＫＡ Ｈ，ＢＡＬＴＥＳ Ｓ，ＬＯＳＣＨＥＲ
ｍｕｈｉｄｒｕｇ
ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ ｂｙ
Ｗ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ
ｎｏｔ
Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２００８，１８（５）：３９０—４０２．
ｖｅｒａｐａｍｉｌ
ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ
ｇｅｎｅ
ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ
ｂｒａｉｎ［Ｊ］．
ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ＡＢＣＢｌ ｏｆ ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ
ａｎｄ ｔｈｅ ｉｍｐａｃｔ
ｏｎ
Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００８。５４（６）：１００６—１０１６．
未发现排斥反应，也未发现溃疡复发的病例。张兆
万方数据
河北医科大学学报
第３０卷第６期
・
６３９
・
清等利用组织工程学方法。以牛胶原为支架，自体骨 髓间充质干细胞作为种子细胞构建成组织工程化复 合皮肤，对１例双下肢溃疡１５年的患者进行移植，４
周后溃疡面积缩小４０％，９周后溃疡面积缩小 ９０％［１６］。
尽管目前已经有多种较为成熟的组织工程皮肤 产品应用于临床，并且又研制了多种类型的人工皮 肤，但是它们大多数只是在结构上与人体皮肤类似， 只具有皮肤的屏障功能，缺乏皮肤附件，所以它们并 不具备完整的皮肤功能，并没有达到真正的皮肤重 建。因此，进一步阐明胚胎发育的机制，将生长因 子、干细胞生物技术与生物材料工程学相结合才是 开发新的完美皮肤产品的关键所在。