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的X连锁的单基因性智力低下综合征。
• 1969年美国Lubs在X连锁智力低下的家系中，发
现带有一条长臂末端具随体样结构的X染色体， 1977年澳大利亚Sutherland将这种随体样结构定 位于Xq27，并命名为脆性部位（fragile site）， 脆性X综合征因此得名。
• 发病率仅次于21-三体综合征 • 群体发病率：
10余项技术组成。 基础，共由10余项技术组成。 共由20余项技术组成。
1
脊髓性肌肉萎缩症
2
脊髓性肌肉萎缩症
• SMA • 由于脊髓前角细胞运动神经元变性
导致近端肌肉萎缩和无力
• 发病率1/10000 • 遗传方式：常染色体隐性遗传
3
临床特征
• 婴儿期学龄前及青春期发病 • 表现为四肢的近端肌肉对称性
成，编码序列长2343bp。
35
• SLC26A4基因编码pendrin蛋白，为膜蛋白分子，介导阴离
子转运。
• pendrin蛋白在耳内主要表达于内淋巴导水管及内淋巴囊，
球囊和椭圆囊，耳蜗内的外侧沟，参与维持内耳的离子浓度。
36
• 检测方法：对21个外显子直接测序
37
药物性耳聋
已知的耳毒性药物有近百种
loss, NSHL)：指不伴有耳外组织异常或 病变的耳聋。
• 遗传方式：常隐、常显、X连锁、线粒
体遗传
24
耳聋相关基因
• 已经定位120多个 NSHL基因位点 。 • 克隆确认了41个核基因 。 • 线粒体基因2个。 • 最常见的致病基因：
GJB2 、SLC26A4 、mtDNA A1555G
25
14
15
16
测序
• 对SMN基因EXON7、8进行直接测序 • 可确证PCR-酶切法的检测结果 • 可避免PCR-酶切法酶切不全造成的
假阴性结果
17
18
19
MLPA
20
21
22
非综合征型耳聋
23
耳聋简介
• 听力丧失是最常见的感觉障碍。 • 发病率：1/500 新生儿 • 非综合征型耳聋(nonsyndromic hearing
7
8
9
PCR-酶切法检测SMN基因
原理:
• SMN2的7、8号外显子分别存在一个DraI 和
DdeI酶切位点，而SMN1 没有
• 其PCR产物进行酶切后可以检测SMN1是否有
7、8号外显子的缺失
10
PCR反应体系
11
7号外显子PCR反应条件
12
8号外显子PCR反应条件
13
PCR产物酶切体系及条件
合区的编码区。
• 该突变可增强AmAn与12SrRNA的结合，干扰线粒体蛋白质和ATP的合
成，最终导致耳聋。
• 有文献报道大部分的mtDNA A1555G 突变患者，在没有使用AmAn的情
况下也会致聋, 而AmAn只是加快了这个过程。
41
脆性X综合征
42
• 脆性X综合征（fragile X syndrome），是最常见
基因疾病
※基因组疾病
1bp 1Kb 2Mb
6Mb
染色体疾病 100Mb
亚带、带、区、臂
…… 整条、整组染色体
基因病诊断高技术平台 基因组疾病诊断高技术平台 染色体病诊断高技术平台
以PCR加DNA测序 以SNP array加Bac克隆原
以染色体G显带技术加染色体
为基础，共由
位杂交（FISH）技术为
ຫໍສະໝຸດ Baidu
原位杂交技术（FISH）为基础，
26
• 1998年夏家辉院士等成功地克隆了人类遗
传性耳聋（GJB3）疾病基因。
• 中国本土克隆的第一个基因。
• Nature Genetics volume 20 december
1998, P370-373.
• Mutations in the gene encoding gap
junction protein -3 associated with
进行性无力及萎缩
• 肌张力降低，腱反射减退或消失 • 呼吸衰竭 • 肌电图:神经元性损害 • 肌酶学检测:多为正常
4
临床类型
5
发病机制
6
SMN基因
• 定位：5q11.2-11.3。 • 结构：长20kb，8个外显子， • 突变：98.7%为外显子7和/或8的缺失
2.3%为点突变与缺失相结合的 杂合子
autosomal dominant hearing
impairment
27
28
29
30
GJB2基因
• 定位于13q11,gDNA长5510 bp,含有2个外
显子，只有2号外显子参与编码,编码区长 681bp
31
• GJB2基因编码产物为间隙连接蛋白分子26
（connexin 26，CX26）
45
• 特殊面容
颜面瘦长、前额突出 、耳朵大 、下颌大 、嘴 大唇厚、上门齿长 腭弓高 头围大
• 大多数男性患者在青春期发育后出现大睾丸
46
38
线粒体12SrRNA基因
• 在线粒体基因突变导致耳聋的患者中，绝大部
分是由于A1555G突变引起。
39
• 检测方法：PCR+测序
引物名称
引物序列
12SrRNA-F 12SrRNA-R
CCTCAACAGTTAAATCAAC CTCTGGTTCGTCCAAGTG
40
• mtDNA A1555G 突变发生在12SrRNA 与氨基糖甙类抗生素（AmAn）结
• 氨基甙类抗生素（链霉素、卡那霉素、新霉素、
庆大霉素等），最为常见。
• 大环内酯类抗生素（红霉素等） • 抗癌药（长春新碱、2－硝基咪唑、顺氯氨铂） • 水杨酸类解热镇痛药（阿司匹林等） • 抗疟药（奎宁、氯奎等） • 袢利尿剂（速尿、利尿酸） • 抗肝素化制剂（保兰勃林） • 铊化物制剂（反应停）
• CX26在细胞与细胞间形成间隙连接，在感觉毛细
胞受到声音的刺激后钾离子回流到内淋巴液的过 程中起着重要的作用。
32
检测方法：PCR+测序
33
• 目前已报道的致病突变有191种。 • 其中235delc为最常见的突变形式，占75%
34
SLC26A4基因
• 定位于7q31，gDNA长约57kb,由21个外显子组
男性全突变率 1：3600~4000， 女性全突变率 1：4000~6000
43
44
FXS临床特征
• 智力障碍
男性患者大多数都表现为中度至重度智力障，这与 甲基化嵌合体及前突变/全突变嵌合体有关
约有30%-50%的女性全突变携带者患病，大多数 表现为难以觉察的或轻度的智力障碍，女性全突变携 带者是否患病及患者智力障碍的差异是由于X染色体 差异性失活所致。
• 1969年美国Lubs在X连锁智力低下的家系中，发
现带有一条长臂末端具随体样结构的X染色体， 1977年澳大利亚Sutherland将这种随体样结构定 位于Xq27，并命名为脆性部位（fragile site）， 脆性X综合征因此得名。
• 发病率仅次于21-三体综合征 • 群体发病率：
10余项技术组成。 基础，共由10余项技术组成。 共由20余项技术组成。
1
脊髓性肌肉萎缩症
2
脊髓性肌肉萎缩症
• SMA • 由于脊髓前角细胞运动神经元变性
导致近端肌肉萎缩和无力
• 发病率1/10000 • 遗传方式：常染色体隐性遗传
3
临床特征
• 婴儿期学龄前及青春期发病 • 表现为四肢的近端肌肉对称性
成，编码序列长2343bp。
35
• SLC26A4基因编码pendrin蛋白，为膜蛋白分子，介导阴离
子转运。
• pendrin蛋白在耳内主要表达于内淋巴导水管及内淋巴囊，
球囊和椭圆囊，耳蜗内的外侧沟，参与维持内耳的离子浓度。
36
• 检测方法：对21个外显子直接测序
37
药物性耳聋
已知的耳毒性药物有近百种
loss, NSHL)：指不伴有耳外组织异常或 病变的耳聋。
• 遗传方式：常隐、常显、X连锁、线粒
体遗传
24
耳聋相关基因
• 已经定位120多个 NSHL基因位点 。 • 克隆确认了41个核基因 。 • 线粒体基因2个。 • 最常见的致病基因：
GJB2 、SLC26A4 、mtDNA A1555G
25
14
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16
测序
• 对SMN基因EXON7、8进行直接测序 • 可确证PCR-酶切法的检测结果 • 可避免PCR-酶切法酶切不全造成的
假阴性结果
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MLPA
20
21
22
非综合征型耳聋
23
耳聋简介
• 听力丧失是最常见的感觉障碍。 • 发病率：1/500 新生儿 • 非综合征型耳聋(nonsyndromic hearing
7
8
9
PCR-酶切法检测SMN基因
原理:
• SMN2的7、8号外显子分别存在一个DraI 和
DdeI酶切位点，而SMN1 没有
• 其PCR产物进行酶切后可以检测SMN1是否有
7、8号外显子的缺失
10
PCR反应体系
11
7号外显子PCR反应条件
12
8号外显子PCR反应条件
13
PCR产物酶切体系及条件
合区的编码区。
• 该突变可增强AmAn与12SrRNA的结合，干扰线粒体蛋白质和ATP的合
成，最终导致耳聋。
• 有文献报道大部分的mtDNA A1555G 突变患者，在没有使用AmAn的情
况下也会致聋, 而AmAn只是加快了这个过程。
41
脆性X综合征
42
• 脆性X综合征（fragile X syndrome），是最常见
基因疾病
※基因组疾病
1bp 1Kb 2Mb
6Mb
染色体疾病 100Mb
亚带、带、区、臂
…… 整条、整组染色体
基因病诊断高技术平台 基因组疾病诊断高技术平台 染色体病诊断高技术平台
以PCR加DNA测序 以SNP array加Bac克隆原
以染色体G显带技术加染色体
为基础，共由
位杂交（FISH）技术为
ຫໍສະໝຸດ Baidu
原位杂交技术（FISH）为基础，
26
• 1998年夏家辉院士等成功地克隆了人类遗
传性耳聋（GJB3）疾病基因。
• 中国本土克隆的第一个基因。
• Nature Genetics volume 20 december
1998, P370-373.
• Mutations in the gene encoding gap
junction protein -3 associated with
进行性无力及萎缩
• 肌张力降低，腱反射减退或消失 • 呼吸衰竭 • 肌电图:神经元性损害 • 肌酶学检测:多为正常
4
临床类型
5
发病机制
6
SMN基因
• 定位：5q11.2-11.3。 • 结构：长20kb，8个外显子， • 突变：98.7%为外显子7和/或8的缺失
2.3%为点突变与缺失相结合的 杂合子
autosomal dominant hearing
impairment
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28
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30
GJB2基因
• 定位于13q11,gDNA长5510 bp,含有2个外
显子，只有2号外显子参与编码,编码区长 681bp
31
• GJB2基因编码产物为间隙连接蛋白分子26
（connexin 26，CX26）
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• 特殊面容
颜面瘦长、前额突出 、耳朵大 、下颌大 、嘴 大唇厚、上门齿长 腭弓高 头围大
• 大多数男性患者在青春期发育后出现大睾丸
46
38
线粒体12SrRNA基因
• 在线粒体基因突变导致耳聋的患者中，绝大部
分是由于A1555G突变引起。
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• 检测方法：PCR+测序
引物名称
引物序列
12SrRNA-F 12SrRNA-R
CCTCAACAGTTAAATCAAC CTCTGGTTCGTCCAAGTG
40
• mtDNA A1555G 突变发生在12SrRNA 与氨基糖甙类抗生素（AmAn）结
• 氨基甙类抗生素（链霉素、卡那霉素、新霉素、
庆大霉素等），最为常见。
• 大环内酯类抗生素（红霉素等） • 抗癌药（长春新碱、2－硝基咪唑、顺氯氨铂） • 水杨酸类解热镇痛药（阿司匹林等） • 抗疟药（奎宁、氯奎等） • 袢利尿剂（速尿、利尿酸） • 抗肝素化制剂（保兰勃林） • 铊化物制剂（反应停）
• CX26在细胞与细胞间形成间隙连接，在感觉毛细
胞受到声音的刺激后钾离子回流到内淋巴液的过 程中起着重要的作用。
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检测方法：PCR+测序
33
• 目前已报道的致病突变有191种。 • 其中235delc为最常见的突变形式，占75%
34
SLC26A4基因
• 定位于7q31，gDNA长约57kb,由21个外显子组
男性全突变率 1：3600~4000， 女性全突变率 1：4000~6000
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44
FXS临床特征
• 智力障碍
男性患者大多数都表现为中度至重度智力障，这与 甲基化嵌合体及前突变/全突变嵌合体有关
约有30%-50%的女性全突变携带者患病，大多数 表现为难以觉察的或轻度的智力障碍，女性全突变携 带者是否患病及患者智力障碍的差异是由于X染色体 差异性失活所致。