生物技术药物质量控制
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❖ 自1982年第一个基因重组药物—重组胰岛素上 市以来，全世界约有60余种重组产品开发成功， 包括基因工程药物、基因工程抗体，重组疫苗、 反义核苷酸药物、基因治疗药物、DNA疫苗。
❖ 我国在“七五”、“八五”、“九五”期间国 家“863”高技术项目支持下，先后建立一系列 基因重组制品质量标准和质控方法，共完成国 家一类、二类新药20余种产品的质量标准研究。
生物技术药物的质量控制
生物技术药物的特点： 1、来源：活的生物体（细菌或细胞）； 2、结构：复杂（包括组成、空间结构）； 3、生产：涉及生物材料和生物学过程（发
酵、细胞培养，分离纯化等）， 有其固有的易变性。
生物技术药物的质量控制
质量控制包括两个方面： 1、生产过程中质量控制GMP（硬件、软件） 2、最终目标产品的质量控制（方法学研究）
分布和效力测定； ❖ DNA疫苗的安全性和效力检测方法研究； ❖ 干细胞治疗产品的质量标准的建立（干细胞鉴定及
活力测定） 。
我国基因工程产品安全管理 法规和技术指南
《传代细胞系生产生物制品的规程》 《人用鼠源性单克隆抗体质量控制要点》 《预防用新生物制品临床研究的技术要求》 《人用重组DNA制品质量控制要点》 《人的体细胞治疗申报临床试验指导原则》 《人基因治疗申报临床试验指导原则》 《药理毒理检查指导原则》 《药品生产质量管理办法》 《药品注册管理办法》
生物技术药物质量标准研究的依据
一、主要依照《重组DNA产品质量控制要 点》、《中国生物制品规程》、《中国药典》 等要求进行。 二、参考世界卫生组织（WHO）和美国FDA 颁布的指南、ICH文件和《欧洲药典》。
检定标准、检定方法：准确可靠、切实可行； 保证产品安全、有效。
生物技术药物质量标准研究的内容
1、目标产品的均一性 2、建立目标产品生物学活性或免疫学效价测定方法 3、研究建立目标产品的免疫学活性的测定方法及质
控标准 4、研究建立国家标准品或参考品 5、建立目标产品生产相关杂质的限量分析方法和标
准 6、制定出保证上述生物技术产品临床安全、有效、
与WHO标准相一致ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ质量控制标准和规范化的检定 方法
生物技术药物
1、概念： 采用DNA重组技术或其他新 生物技术生产的治疗和预防 药物。 重组DNA药物
2、分类 ｛ 重组蛋白质药物
1、重组蛋白质或重组多肽药物包括：
细胞因子类：rIFN、IL-2、EPO等； 抗细胞素治疗：CD4可溶性受体等； 重组溶血栓类：rSK、rSAK等； 人源化单克隆抗体制剂； 重组疫苗和菌苗制剂。
❖ 取兔离体动脉条剪成约1.5cm 长、2～3 mm 宽的螺旋环，悬挂于含10mL通氧的37℃台 氏液(取NaC1 8.0 g、KC1 0.2 g、CaCl 20.2g、NaH2PO40.05g、MgSO4·7H2O 0.1g、NaHCO3 1.0 g、Glucose 1.0g用蒸 馏水配成1 000 mL的溶液， 置于玻璃或塑料 瓶中，用1 mol·L-1 NaOH 溶液调pH 至7.4) 的麦氏浴槽中，加负荷1g，稳定1h，期间每 20min换1次台氏液： 连接多导记录仪，调 节灵敏度，记录血管的张力变化。
质量控制方法学研究具体内容
一、生物学活性测定和比活性 二、蛋白质纯度检查 三、蛋白质含量测定 四、蛋白质药物理化性质的鉴定 五、蛋白质的二硫键分析 六、对糖蛋白的特殊要求 七、残余杂质检查 八、安全性及其他检测项目 九、生物技术药物待测样品保存
一、生物学活性测定和比活性
1、意义： 1）基因工程产品的化学本质为蛋白质、多肽， 其活性由产品的氨基酸序列或其空间结构所形成 的活性中心所决定的，与其绝对质量不一致。 2）基因工程产品的生物学活性与药效学基本相 一致。 3）利用生物学活性建立的测定效价体系，是给 药品定量的依据，保证产品药效的重要手段。
生物技术药物质量控制
李平生
概述
❖ 利用人体内的天然物质治疗人类的疾病或达到某 种医学效果一直是医学上的一个重要研究领域。
❖ 20世纪70年代以来产生了DNA重组技术，这种 新技术是现代生物技术的主体，近年来首先在医 药领域获得了飞速发展。生物技术的应用2/3用于 医药，生物技术新型药物和疫苗已有50多种产品 投放市场，400多种正在进行临床试验，2000多 种在临床前研究。
重组产品质量控制上存在的难点
❖ 建立重组药物的生物学活性测定方法； ❖ 理化测定标准品的稳定性； ❖ 人源化单抗中的人源化程度检测方法及标准研究； ❖ 重组人白蛋白等大剂量重组产品安全性评价问题； ❖ 反义核酸药物理化特性测定和效力测定，即如何评
价反义核酸的体内及体外活力； ❖ 基因治疗药物的安全性评价包括反转录病毒、生物
效价测定一般原则
1、国际通用方法； 2、测定结果须用国际或国家标准品
校 正，以国际单位表示。
生物学活性测定方法分类
1）体外细胞培养测定法
a、促进细胞生长作用（G-CSF:NFS-60） b、抑制细胞生长作用 (TNF:L929) c、间接保护细胞作用 (IFN:VISH;VSV) 2）离体动物器官测定法 采用家兔主动脉条测定重组脑利钠肽生物 活性。 3）体内测定法 4）生化酶促反应测定法 5）免疫学活性测定法
❖ 据报道，国外6500万人接受重组乙肝疫苗、100 万人接受t-PA治疗，超过50万人使用EPO，每天 约有1000万人接受重组人胰岛素的治疗。
❖ 生物技术产品的生产和管理按生物制品的 要求进行，不仅对最终产品的质量实施有 效控制，而且特别重视对生产工艺的全过 程进行质量控制,其中包括对每个生产步 骤的验证、质量检定（QC）、质量保证 部（QA）对生产和质量检定的全过程进 行严格的管理。
2、重组DNA药物包括： ❖ 寡核苷酸药物：反义核酸等； ❖ 基因药物：腺病毒-IL-2、腺相关病毒-凝
血Ⅸ因子；腺病毒- P53 ❖ 细胞治疗制剂：抗原致敏的人树突状细胞 ❖ DNA疫苗：治疗乙型肝炎、爱滋病的核
酸疫苗等。
我国生物技术药物质量标准研究现状
❖ 现代医药生物技术的发展以及人类基因组计划 的完成和遗传病基因的不断发现，对医药领域 产生了巨大影响。
❖ 我国在“七五”、“八五”、“九五”期间国 家“863”高技术项目支持下，先后建立一系列 基因重组制品质量标准和质控方法，共完成国 家一类、二类新药20余种产品的质量标准研究。
生物技术药物的质量控制
生物技术药物的特点： 1、来源：活的生物体（细菌或细胞）； 2、结构：复杂（包括组成、空间结构）； 3、生产：涉及生物材料和生物学过程（发
酵、细胞培养，分离纯化等）， 有其固有的易变性。
生物技术药物的质量控制
质量控制包括两个方面： 1、生产过程中质量控制GMP（硬件、软件） 2、最终目标产品的质量控制（方法学研究）
分布和效力测定； ❖ DNA疫苗的安全性和效力检测方法研究； ❖ 干细胞治疗产品的质量标准的建立（干细胞鉴定及
活力测定） 。
我国基因工程产品安全管理 法规和技术指南
《传代细胞系生产生物制品的规程》 《人用鼠源性单克隆抗体质量控制要点》 《预防用新生物制品临床研究的技术要求》 《人用重组DNA制品质量控制要点》 《人的体细胞治疗申报临床试验指导原则》 《人基因治疗申报临床试验指导原则》 《药理毒理检查指导原则》 《药品生产质量管理办法》 《药品注册管理办法》
生物技术药物质量标准研究的依据
一、主要依照《重组DNA产品质量控制要 点》、《中国生物制品规程》、《中国药典》 等要求进行。 二、参考世界卫生组织（WHO）和美国FDA 颁布的指南、ICH文件和《欧洲药典》。
检定标准、检定方法：准确可靠、切实可行； 保证产品安全、有效。
生物技术药物质量标准研究的内容
1、目标产品的均一性 2、建立目标产品生物学活性或免疫学效价测定方法 3、研究建立目标产品的免疫学活性的测定方法及质
控标准 4、研究建立国家标准品或参考品 5、建立目标产品生产相关杂质的限量分析方法和标
准 6、制定出保证上述生物技术产品临床安全、有效、
与WHO标准相一致ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ质量控制标准和规范化的检定 方法
生物技术药物
1、概念： 采用DNA重组技术或其他新 生物技术生产的治疗和预防 药物。 重组DNA药物
2、分类 ｛ 重组蛋白质药物
1、重组蛋白质或重组多肽药物包括：
细胞因子类：rIFN、IL-2、EPO等； 抗细胞素治疗：CD4可溶性受体等； 重组溶血栓类：rSK、rSAK等； 人源化单克隆抗体制剂； 重组疫苗和菌苗制剂。
❖ 取兔离体动脉条剪成约1.5cm 长、2～3 mm 宽的螺旋环，悬挂于含10mL通氧的37℃台 氏液(取NaC1 8.0 g、KC1 0.2 g、CaCl 20.2g、NaH2PO40.05g、MgSO4·7H2O 0.1g、NaHCO3 1.0 g、Glucose 1.0g用蒸 馏水配成1 000 mL的溶液， 置于玻璃或塑料 瓶中，用1 mol·L-1 NaOH 溶液调pH 至7.4) 的麦氏浴槽中，加负荷1g，稳定1h，期间每 20min换1次台氏液： 连接多导记录仪，调 节灵敏度，记录血管的张力变化。
质量控制方法学研究具体内容
一、生物学活性测定和比活性 二、蛋白质纯度检查 三、蛋白质含量测定 四、蛋白质药物理化性质的鉴定 五、蛋白质的二硫键分析 六、对糖蛋白的特殊要求 七、残余杂质检查 八、安全性及其他检测项目 九、生物技术药物待测样品保存
一、生物学活性测定和比活性
1、意义： 1）基因工程产品的化学本质为蛋白质、多肽， 其活性由产品的氨基酸序列或其空间结构所形成 的活性中心所决定的，与其绝对质量不一致。 2）基因工程产品的生物学活性与药效学基本相 一致。 3）利用生物学活性建立的测定效价体系，是给 药品定量的依据，保证产品药效的重要手段。
生物技术药物质量控制
李平生
概述
❖ 利用人体内的天然物质治疗人类的疾病或达到某 种医学效果一直是医学上的一个重要研究领域。
❖ 20世纪70年代以来产生了DNA重组技术，这种 新技术是现代生物技术的主体，近年来首先在医 药领域获得了飞速发展。生物技术的应用2/3用于 医药，生物技术新型药物和疫苗已有50多种产品 投放市场，400多种正在进行临床试验，2000多 种在临床前研究。
重组产品质量控制上存在的难点
❖ 建立重组药物的生物学活性测定方法； ❖ 理化测定标准品的稳定性； ❖ 人源化单抗中的人源化程度检测方法及标准研究； ❖ 重组人白蛋白等大剂量重组产品安全性评价问题； ❖ 反义核酸药物理化特性测定和效力测定，即如何评
价反义核酸的体内及体外活力； ❖ 基因治疗药物的安全性评价包括反转录病毒、生物
效价测定一般原则
1、国际通用方法； 2、测定结果须用国际或国家标准品
校 正，以国际单位表示。
生物学活性测定方法分类
1）体外细胞培养测定法
a、促进细胞生长作用（G-CSF:NFS-60） b、抑制细胞生长作用 (TNF:L929) c、间接保护细胞作用 (IFN:VISH;VSV) 2）离体动物器官测定法 采用家兔主动脉条测定重组脑利钠肽生物 活性。 3）体内测定法 4）生化酶促反应测定法 5）免疫学活性测定法
❖ 据报道，国外6500万人接受重组乙肝疫苗、100 万人接受t-PA治疗，超过50万人使用EPO，每天 约有1000万人接受重组人胰岛素的治疗。
❖ 生物技术产品的生产和管理按生物制品的 要求进行，不仅对最终产品的质量实施有 效控制，而且特别重视对生产工艺的全过 程进行质量控制,其中包括对每个生产步 骤的验证、质量检定（QC）、质量保证 部（QA）对生产和质量检定的全过程进 行严格的管理。
2、重组DNA药物包括： ❖ 寡核苷酸药物：反义核酸等； ❖ 基因药物：腺病毒-IL-2、腺相关病毒-凝
血Ⅸ因子；腺病毒- P53 ❖ 细胞治疗制剂：抗原致敏的人树突状细胞 ❖ DNA疫苗：治疗乙型肝炎、爱滋病的核
酸疫苗等。
我国生物技术药物质量标准研究现状
❖ 现代医药生物技术的发展以及人类基因组计划 的完成和遗传病基因的不断发现，对医药领域 产生了巨大影响。