4.5同工酶
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AST
ALP
正常和几种病理状况时血清LD同工酶的琼脂糖凝 胶电泳分离图谱
临床常用的同工酶及其亚型检测的临床意义
同工酶及其亚型
CK同工酶
AST同工酶 ALP同工酶 GGT同工酶 AMY同工酶
LD同工酶
临床意义 急性心肌梗死时血清中CK-MB急剧升高,进行性肌萎缩时CK-MM 升高，神经系统疾病时CK-BB升高 心肌梗死是血清中ASTm活性显著升高 胆疾病和恶性肿瘤的诊断 原发性肝癌时GGT-II显著升高 急性胰腺炎时P-AMY显著升高 心肌梗死时LD1明显增高,肝功能损伤时LD2明显增高某些恶性肿瘤 时,LD亚基有向M亚基移行的趋势
（RIA、EIA、FIA、CLIA）
动力学分析法
CK、LD、ACP CK、LD、ACP、ALP、AMY
Baidu Nhomakorabea
底物特异性分析法 抑制剂分析法
底物Km,亲和力不同 对小分子I的特异性抑制不同
pH分析法 热失活分析法
最适pH不同 热稳定性不同
ACP,CK,LD （α-羟丁酸）
LD（草酸），ACP（L-酒石酸），ALP （尿素和L-苯丙氨酸），ChE（氟和可卡 因）
同工酶分类
遗传性同工酶：（Genetic Origins of Enzyme Variants） 非遗传性同工酶亚型：（Nongenetic Causes of Multiple
Forms of Enzymes）
三、同工酶及亚型的分析方法
（一）电泳法:电荷不同 （二）层析法（离子交换，亲和):电荷不同 （三）免疫分析法 ：抗原－抗体 （四）动力学分析法 ：酶S, Km, I，最适
谢 谢！
ACP同工酶
前列腺疾病和恶性肿瘤的诊断
糖原磷酸化酶(GP)同工 酶
芳香基硫酸酯酶(ARS)同 工酶
急性心肌梗死时,血清GP-BB显著升高 膀胱癌时尿中ARS-A和ARS-B显著升高
醛缩酶(ALD)同工酶 原发性肝癌和消化道癌ALD-A活性显著升高
谷胱甘肽转移酶(GST)同
工酶
GST-α是肝细胞损伤的指标,GST-π对肺癌诊断具有重要价值
pH, 热稳定性差异 （五）蛋白酶水解法 ：
方法
表 常用同工酶（或亚型）的分析方法 同工酶（或亚型）的性质差异 同工酶、亚型
电泳法 （区带电泳、等电聚焦）
电荷不同
层析法（离子交换，亲和） 电荷不同 免疫分析法
所有同工酶、亚型 CK,LD, ALP
免疫抑制法
特异性抗体反应性不同
免疫化学测定法
特异性抗体反应性不同
第四章 酶学测定技术
一、概念-同工酶（ isozyme， isoenzyme）
同工酶是能催化相同化学反应，但因编码基因不同而致氨 基酸序列不同，并呈现空间构象、理化性质、生物学性质以 及器官分布和细胞内定位不同的一类酶。
本质－同工酶分子组成不同 DNA → mRNA → Protein
蛋白质
结构域相同：功能相似 分子组成不同：理化、生物学性质不同
二、同工酶及亚型
1.同工酶（ isoenzyme）： 由不同遗传基因编码的多肽链单体、纯聚体、或杂化体。
2.同一基因的mRNA不同剪接本亚型： 由同一基因，同一RNA，不同剪接本形成的同工酶亚型
3.不同修饰同工酶亚型： 由同一基因，同一mRNA翻译生成的酶蛋白，经不同化学修饰 形成的同工酶亚型。 不同化学修饰：酰胺键水解、磷酸化、二硫键生成、肽键断 裂和糖基的添加等。
ALP
正常和几种病理状况时血清LD同工酶的琼脂糖凝 胶电泳分离图谱
临床常用的同工酶及其亚型检测的临床意义
同工酶及其亚型
CK同工酶
AST同工酶 ALP同工酶 GGT同工酶 AMY同工酶
LD同工酶
临床意义 急性心肌梗死时血清中CK-MB急剧升高,进行性肌萎缩时CK-MM 升高，神经系统疾病时CK-BB升高 心肌梗死是血清中ASTm活性显著升高 胆疾病和恶性肿瘤的诊断 原发性肝癌时GGT-II显著升高 急性胰腺炎时P-AMY显著升高 心肌梗死时LD1明显增高,肝功能损伤时LD2明显增高某些恶性肿瘤 时,LD亚基有向M亚基移行的趋势
（RIA、EIA、FIA、CLIA）
动力学分析法
CK、LD、ACP CK、LD、ACP、ALP、AMY
Baidu Nhomakorabea
底物特异性分析法 抑制剂分析法
底物Km,亲和力不同 对小分子I的特异性抑制不同
pH分析法 热失活分析法
最适pH不同 热稳定性不同
ACP,CK,LD （α-羟丁酸）
LD（草酸），ACP（L-酒石酸），ALP （尿素和L-苯丙氨酸），ChE（氟和可卡 因）
同工酶分类
遗传性同工酶：（Genetic Origins of Enzyme Variants） 非遗传性同工酶亚型：（Nongenetic Causes of Multiple
Forms of Enzymes）
三、同工酶及亚型的分析方法
（一）电泳法:电荷不同 （二）层析法（离子交换，亲和):电荷不同 （三）免疫分析法 ：抗原－抗体 （四）动力学分析法 ：酶S, Km, I，最适
谢 谢！
ACP同工酶
前列腺疾病和恶性肿瘤的诊断
糖原磷酸化酶(GP)同工 酶
芳香基硫酸酯酶(ARS)同 工酶
急性心肌梗死时,血清GP-BB显著升高 膀胱癌时尿中ARS-A和ARS-B显著升高
醛缩酶(ALD)同工酶 原发性肝癌和消化道癌ALD-A活性显著升高
谷胱甘肽转移酶(GST)同
工酶
GST-α是肝细胞损伤的指标,GST-π对肺癌诊断具有重要价值
pH, 热稳定性差异 （五）蛋白酶水解法 ：
方法
表 常用同工酶（或亚型）的分析方法 同工酶（或亚型）的性质差异 同工酶、亚型
电泳法 （区带电泳、等电聚焦）
电荷不同
层析法（离子交换，亲和） 电荷不同 免疫分析法
所有同工酶、亚型 CK,LD, ALP
免疫抑制法
特异性抗体反应性不同
免疫化学测定法
特异性抗体反应性不同
第四章 酶学测定技术
一、概念-同工酶（ isozyme， isoenzyme）
同工酶是能催化相同化学反应，但因编码基因不同而致氨 基酸序列不同，并呈现空间构象、理化性质、生物学性质以 及器官分布和细胞内定位不同的一类酶。
本质－同工酶分子组成不同 DNA → mRNA → Protein
蛋白质
结构域相同：功能相似 分子组成不同：理化、生物学性质不同
二、同工酶及亚型
1.同工酶（ isoenzyme）： 由不同遗传基因编码的多肽链单体、纯聚体、或杂化体。
2.同一基因的mRNA不同剪接本亚型： 由同一基因，同一RNA，不同剪接本形成的同工酶亚型
3.不同修饰同工酶亚型： 由同一基因，同一mRNA翻译生成的酶蛋白，经不同化学修饰 形成的同工酶亚型。 不同化学修饰：酰胺键水解、磷酸化、二硫键生成、肽键断 裂和糖基的添加等。