小麦对高盐胁迫的耐受性研究

中央民族大学生命与环境科学学院 植物生理学综合性设计实验报告

2010年5月28日

小麦对高盐胁迫的耐受性研究

Study on Salt Tolerance of Wheat

小麦对高盐胁迫的耐受性研究

覃亚刘磊牛淑岚马福秀

（中央民族大学生命与环境科学学院,北京,100081）

摘要：目的为了了解高盐胁迫对小麦的伤害以及小麦对盐胁迫逆境的生理适应状况。方法用100、200、300、400、500mmol的NaCl溶液共5个水平对小麦幼苗进行为期七天的盐胁迫处理。结果随着盐胁迫浓度的增加细胞膜透性、脯氨酸含量呈上升趋势,相对含水量则只在一定范围内呈现上升趋势。结论小麦在受到盐胁迫时表现出较强的耐盐能力。

关键词：小麦；高盐胁迫；耐盐性

中图分类号：Q945

Study on Salt Tolerance of Wheat

Qin Ya, Liu Lei, Shulan Niu, Fuxiu Ma

(Minzu University of China, College of Life and Environmental Science, Bei Jin ,100081) Abstract：Objective In order to understand how high salt stress on wheat damage and wheat to salt stress the physiological adaptations in adversity.Methods In 100, 200, 300, 400, 500 mmol NaCl of the total solution 5 levels on wheat seedlings for seven days of salt stress processing. Results With the increasing of the concentration of salt stress cell membrane permeability, proline content is rising and the relative water content is only in a certain range showed a rising trend. Conclusions Wheat in salt stress by showing strong resistance to salt ability. Keywords: Wheat; High Salt Stress; Salt Tolerance

ClC Number: Q945

前言

土壤盐渍化是危害世界农业的一个重要的环境因素。土壤中高浓度的盐分会使离子失衡、氧化伤害、水分亏缺、营养缺乏，并导致生物大分子被破坏、生长迟缓、甚至植株死亡。关于植物耐盐性机理研究，以及耐盐作物品种的选育已经成为近年来植物研究领域和生物技术领域的研究热点[1]。本研究通过测量处在逆境下的小麦的多种生理指标来探究小麦的耐盐机制。

1. 材料和方法

1.1实验材料

小麦种子若干

1.2主要仪器

电导仪、电子分析天平、分光光度计、离心机、恒温水浴锅、研钵、容量瓶（50mL、200mL）、移液管、玻棒、小烧杯、普通试管、滤纸等。

1.3主要试剂

80%乙醇、酸性茚三酮试剂、冰醋酸、磷酸、脯氨酸标准母液、活性炭、石英砂等。1.4实验方法

1.4.1 材料处理

播种小麦21盆，每盆20粒种。浇灌自来水让小麦发芽，萌发为小麦幼苗。每隔一天给相应的各小麦实验组滴灌盐水，每次浇透，盐胁迫7天。

小心拔出盆内的小麦，将小麦清洗干净尤其是植株的根系。做好标记，放在已做好标记的吸水纸上，吸干水分。剪下每株小麦的根系，按处理的组别与组号放在对应的已洗净的小烧杯内，并用蒸馏水充分冲洗。留下的叶片放在原来的吸水纸上。

1.4.2 小麦叶片水分含量测定

取每个处理浓度的一部分小麦叶称量鲜重0.3g。接着分别浸泡在自来水中4h后，称量饱和鲜重后，分别用报纸包扎好后放于烘箱内，适当温度，24h后称量干重。记录鲜重。饱和鲜重、干重。按下述公式计算：

（1）

（2）

1.4.2小麦根系电导率含量测定

以每盆为单位，每盆称取小麦根系0.2g，放入已洗净并标记好的小烧杯中，加入20mL 蒸馏水，室温下静置了1h40min，测量电导率R1。然后沸水浴下处理各组根系溶液15min 冷至室温，测量电导率R2。按下述公式计算小麦根系的相对电导率

（3）相对电导率（%）＝R1/R2×100%

1.4.2小麦叶片脯氨酸含量测定

1.脯氨酸标准曲线制作

吸取脯氨酸标准母液0.0mL、0.5mL、1.25mL、2.5mL、5.0mL、7.5mL、10.0mL、15.0mL 分别加入8个50mL容量瓶中，分别加入蒸馏水定容至50mL，配成0.0μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、15.0μg/mL、20.0μg/mL、30.0μg/mL的系列溶液。分别吸取上述各标准溶液2mL、冰醋酸2mL、茚三酮试剂2mL，加入到10mL带塞刻度试管中，塞上塞子，于沸水浴中加热15mL，用分光光度计测定520nm的光密度值，以零浓度为空白对照。将测定结果以脯氨酸浓度为横坐标, 以光密度值为纵坐标制作标准曲线。

2. 样品中脯氨酸的提取及测定

(1) 提取脯氨酸。分别称取各处理组余下的两份小麦幼苗叶，每份材料分别称重0.3g，剪碎，加入适量80%乙醇、少量石英砂，于研钵中研磨成匀浆。匀浆液全部转移至10mL 刻度试管中，用80%乙醇洗研钵，将洗液移入相应的刻度试管中，最后用80%乙醇定容至刻度，混匀，80℃水浴中提取20min。

(2) 除去干扰的氨基酸。向提取液中加入少许活性炭，强烈振荡5min，过滤滤液备用。

(3) 脯氨酸含量的测定。分别吸取上述提取液2mL于刻度试管中，再取一支刻度试管，加入2mL 80%乙醇作为参比，分别向上述各试管中加入2mL 冰醋酸和2mL 茚三酮试剂，沸水浴中加热15min，冷却后在分光光度计测520nm处测量各样品的光密度，从标准曲线上查出每毫升被测样品液中脯氨酸的含量。样品中脯氨酸含量用μg/g，FW表示。

2.结果

1. 不同盐浓度的盐分胁迫对小麦叶水含量的影响

由试验结果（见表1、图1）可知，在100 mmol/L、200 mmol/L、300 mmol/L NaCl下小麦的相对含水量要稍稍高于对照组的相对含水量或是与对照组相差不大，而400 mmol/L NaCl、500mmol/L NaCl相对含水量较对照组要少很多。