食用菌组织分离法实验报告

食用菌母种的制作

——组织分离法实验报告

实验目的：

学习和掌握食用菌的组织分离法；

一、实验原理：

食用菌的母种一般是采用孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物。利用食用菌子实体内部组织进行分离，是获得母种最简便的方法。

二、实验器材：

1. 食用菌：香菇、平菇。

2. 培养基：PDA培养基斜面。

3. 仪器或其他用具：75%酒精棉球、接种针记号笔等。

三、实验方法：

1. 选择种菇：选择肥壮菇体作种菇；

2. 种菇消毒：取1张菇片，用70%的酒精轻擦表面进行消毒；

3. 菇肉接种：将菇片纵向撕开，在每个裂面靠近菇柄与菌盖的交界处取一米粒大小的菇肉组织接于PDA试管斜面上；

4. 培养：将试管斜面置于15～30℃下培养；

五、注意事项

1. 在整个操作过程中都要注意无菌操作，一切用具都要消毒。

2. 要等刀片冷却后再切取组织块。

六、实验结果与记录

第一次实验：10月16日上午进行接种，两试管都以肥壮的双孢菇为种菇，10月13日观察培养基

杂菌

没有菌落产生结果分析：本次实验全班只有一人成功，大部分都被杂菌污染，最有可能的原因就是制作的PDA培养基本身受到污染，但是又有培养基根本没有菌落产生，那么一方面可以看做是空白对照，得到培养基本身没有问题而是我们操作都有问题，没有做到避免污染，规范的无菌操作，另一方面也有可能是在接种过程，接种针，试验刀酒精灯上灼烧后未冷却直接接触种菇，使待接种的菌块高温致死。

第二次实验：10月30日上午进行接种，记号笔标记的两支试管为双

孢菇，标签纸标记的两只试管为香菇进行实验，10月9日观察

实验基本成功，试管下端有少部分红棕色杂菌实验成功，无杂菌，斜面上均为雪白的菌丝

无杂菌，也无目的菌落结果分析：培养基本身无污染，接种香菇菌块的过程中可能由于接种针和实验刀未完全冷却导致目的菌块高温致死，培养基上无菌落产生。接种双孢菇菌块过程中基本做到了无菌操作，实验较为成功。

实验感想：本实验原理目的简单，操作过程方法在微生物学中也有接触，但是容易杂菌污染，第一次实验结果几乎全军覆没，几乎所有培养基都受到了污染，第二次实验在总结前一次的基础上，大部分做到了无菌操作，看到了培养基中雪白的菌落。实验不能因为全部失败就把原因都归咎于准备过程，第一次实验还是有一位同学成功的，所以说要多从自身来分析原因，尽量完成无菌操作为实验成功做好保证。