化学发光免疫分析技术及其应用研究进展
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检 测 诊 断 和 科 学 研 究 提 供 了 一 种 痕 量 或 超 痕 量 的 非
磷 酸酶 、 根过 氧化 物酶 ， 辣 镧系稀 土元 素等 。
１ ２ 化 学 发 光 原 理 ．
化 学发 光是 化学物 质 在特定 化 学反 应 中产 生 的 光 辐射 。通过 高 能 中间体 的分解 在 化学 反应 中激发 单态 分 子 的形 成 ， 分子被 激 发后是 不 稳定 的 ， 它要 释 放 出多余 的能量 而 回到 基态 ， 中部分 的能 量 以发 其
出现 肉眼 可见 的沉 淀 、 集等 现象 ， 用这 些 现象 来 凝 利 检测 待检 物 。标 记 免疫 分 析 是 在 不 影 响抗 原 、 体 抗 生物 活性 的基 础 上 将 标 记 物 质 标 记 在 抗 原 或 抗 体 上 ， 后进 行 免 疫 反 应 形 成 抗 原一 体 复 合 物 ， 对 然 抗 再 标 记 物质进 行检 测 ， 而 间接 检测 待 检 物 的方 法口 。 从 ］
化 学 发 光 免 疫 分 析 技 术 及 其 应 用 研 究 进 展
魏 光 伟 余 永 鹏 魏 文 康 。 罗胜 军 ， ， ，
（ ． 东 省前 沿 动 物保 健有 限 公 司 ， 东 广 州 ５ ０ ５ ； ． 东 省 农 业 科 学 院兽 医研 究所 ， 东 广 州 ５ ０ ４ ） １广 广 １５ ０ ２ 广 广 １ ６０
展 前 案进行 了全面 的总 结和分 技 术 ； 本原 理 ； 类 ； 用 化 基 分 应
中 图分 类 号 ： ８ ４ ４ ￥５．３ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ７５ ３ （ ０ ０ ０ —０ ７０ １ ０ —０ ８ ２ １ ） ３０ ９ — ６
目前 常 用 的 标 记 物 有 放 射 性 的 Ｉ非 放 射 性 的 碱 性 ，
ｓｙ Ｅ Ｉ 相 比 ， Ｌ Ａ 具 有 无 辐 射 、 记 物 有 效 期 ａ ， Ｌ Ａ） Ｃ Ｉ 标 长及 可实 现 全 自动 化 等 优 点 ， 已得 到 广 泛 的应 用 。
Ｃ Ａ 具 有 灵 敏 度 高 、 异 性 强 、 性 范 围 宽 、 作 Ｕ 特 线 操
摘 要 ： 过 对 免 疫 分 析 原 理 和 化 学 发 光 原 理 的 详 细 介 绍 ， 面 的 归 纳 了 由免 疫 分 析 体 系和 化 学发 光 体 通 全
系两大部 分组 成的化 学发 光 免疫 分析技 术 的基 本原 理 。根 据 化 学发 光体 系 中标记 物质 的 不 同以及 检测 体 系
免疫 分 析是利 用抗 原与 抗体 特异 性 结合 形 成抗 原一 体复 合物 而 建 立 起 来 的一 种 高选 择 性 的分 析 抗 方 法 ， 据其 检测 方 法 可 分 为 非 标 记 免疫 分 析 和标 根 记免 疫分 析 。非标 记免疫 分 析是 利用 抗 原与 抗体 结
合形 成抗 原一 体 复 合 物 后 ， 理 化 性 质 发 生 改 变 ， 抗 其
发光 免疫 分析 的方法 。 Ｃ Ａ 与 放 射 免 疫 分 析 （ ａ ｉｉ Ｉ Ｉ ｒｄｏｍｍｕ ｏ ｓａ ， ｎ ａｓｙ Ｒ Ａ） 荧 光 免 疫 分 析 （ ｌｏ ｅｃｎ ｅ ｉ Ｉ 、 ｆ ｒｓｅ ｃ ｍｍｕ ｏ ｓａ ， ｕ ｎ ａｓｙ Ｉ Ａ） 酶 联 免 疫 分 析 （ ｎ ｙ — ｎ ｅ ｍｍｕ ｏ ｓ Ｆ 及 ｅ ｚ ｍｅｌ ｋ ｄ ｉ ｉ ｎ ａ—
学 发光 物质 经催 化 剂 的催 化 和 氧 化 剂 的 氧 化 ， 成 形
一
光过 程包 括三 个 基 本 过程 ： 化 学反 应 释 放 足 够 的 ① 能量 ， 过 程 存 在 产 能 效 率 （ ； 发 光 物 质 接 收 能 此 ｐ ② ｃ 量 ， 生化 学结 构 的改 变 ， 成 激 发 态 中间 体 ， 求 发 形 要 发光 物质 接 收 能 量 的效 率 比较 高 （ 量 传 递 效 率 ： 能
的 差 别 ， 化 学 发 光 免 疫 分 析 技 术 进 行 了 系 统 的 分 类 ， 且 对 各 种 方 法 进 行 了 详 细 的 介 绍 ， 其 优 点 和 不 足 对 并 对
做 了透彻 的分析 。就 目前 化 学发 光免 疫分析技 术在兽 医诊 断 、 医学诊 断及 食 品安 全检 测 上 的 应 用现状 与发
系统 和化学 发光 分析 系统 。免 疫反 应 系 统是 将标 记
物质标 记在 抗原 或抗 体上 ， 过特 异性 免 疫 反应 后 ， 经
形成抗 原一 体 复 合 物 。然 后 进 行 对 标 记 物 进 行 检 抗 测 ， 测定 待 检 物 。化 学 发 光 分 析 系 统 是 利 用 化 来 ］
化 学 发 光 免 疫 分 析 （ ｈ ｍｉ ｍｉｅｃｎ ｅｉ ｃ ｅ ｌ ｎ ｓｅ ｃ ｍｍｕ ｕ — ｎ ａｓｙ ＣＩ Ａ） 生 于 １ ７ ｏ ｓａ ， 诞 Ｉ ９ ７年 ， ｌ ｎ Ｍ 等 ］ Ｈａｍａ 根
器光量 子产 率 。
１ １ 免 疫 分 析 原 理 ．
据放 射免 疫分 析 的 基本 原理 ， 高灵 敏 的 化 学 发 光 将 技术 与高 特异 性 的 免疫 反应 结 合 起 来 ， 展 出 化学 发
简 便 、 需要 十分 昂贵 的仪 器设 备 等特 点 ， 不 应用 范 围
较 广 ， 可 检 测 不 同 分 子 大 小 的 抗 原 、 抗 原 和 抗 既 半 体 ， 可 用 于 核 酸 探 针 的 检 测 ］ Ｃ Ｉ 正 被 越 来 又 。。 ＬＡ
越 多地用 于 蛋 白质 、 素 、 瘤 、 激 肿 病原 微 生 物 、 物 等 毒 成 分 的检 测 ， Ｉ 技术 为兽 医学 、 ＣＬ Ａ 医学 及 食 品 分 析
光 形 式 释 放 出 来 。 因 此 ， 何 一 个 化 学 发 光 反 应 包 任 括 两 个 过 程 ： 发 和 发 光 过 程 。 一 个 典 型 的 化 学 发 激
同位 素免 疫检 测手 段 。
１ 化 学 发 光 免 疫 分 析 基 本 原 理
化 学 发 光 免 疫 分 析 包 含 两 个 部 分 ， 免 疫 反 应 即
磷 酸酶 、 根过 氧化 物酶 ， 辣 镧系稀 土元 素等 。
１ ２ 化 学 发 光 原 理 ．
化 学发 光是 化学物 质 在特定 化 学反 应 中产 生 的 光 辐射 。通过 高 能 中间体 的分解 在 化学 反应 中激发 单态 分 子 的形 成 ， 分子被 激 发后是 不 稳定 的 ， 它要 释 放 出多余 的能量 而 回到 基态 ， 中部分 的能 量 以发 其
出现 肉眼 可见 的沉 淀 、 集等 现象 ， 用这 些 现象 来 凝 利 检测 待检 物 。标 记 免疫 分 析 是 在 不 影 响抗 原 、 体 抗 生物 活性 的基 础 上 将 标 记 物 质 标 记 在 抗 原 或 抗 体 上 ， 后进 行 免 疫 反 应 形 成 抗 原一 体 复 合 物 ， 对 然 抗 再 标 记 物质进 行检 测 ， 而 间接 检测 待 检 物 的方 法口 。 从 ］
化 学 发 光 免 疫 分 析 技 术 及 其 应 用 研 究 进 展
魏 光 伟 余 永 鹏 魏 文 康 。 罗胜 军 ， ， ，
（ ． 东 省前 沿 动 物保 健有 限 公 司 ， 东 广 州 ５ ０ ５ ； ． 东 省 农 业 科 学 院兽 医研 究所 ， 东 广 州 ５ ０ ４ ） １广 广 １５ ０ ２ 广 广 １ ６０
展 前 案进行 了全面 的总 结和分 技 术 ； 本原 理 ； 类 ； 用 化 基 分 应
中 图分 类 号 ： ８ ４ ４ ￥５．３ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ７５ ３ （ ０ ０ ０ —０ ７０ １ ０ —０ ８ ２ １ ） ３０ ９ — ６
目前 常 用 的 标 记 物 有 放 射 性 的 Ｉ非 放 射 性 的 碱 性 ，
ｓｙ Ｅ Ｉ 相 比 ， Ｌ Ａ 具 有 无 辐 射 、 记 物 有 效 期 ａ ， Ｌ Ａ） Ｃ Ｉ 标 长及 可实 现 全 自动 化 等 优 点 ， 已得 到 广 泛 的应 用 。
Ｃ Ａ 具 有 灵 敏 度 高 、 异 性 强 、 性 范 围 宽 、 作 Ｕ 特 线 操
摘 要 ： 过 对 免 疫 分 析 原 理 和 化 学 发 光 原 理 的 详 细 介 绍 ， 面 的 归 纳 了 由免 疫 分 析 体 系和 化 学发 光 体 通 全
系两大部 分组 成的化 学发 光 免疫 分析技 术 的基 本原 理 。根 据 化 学发 光体 系 中标记 物质 的 不 同以及 检测 体 系
免疫 分 析是利 用抗 原与 抗体 特异 性 结合 形 成抗 原一 体复 合物 而 建 立 起 来 的一 种 高选 择 性 的分 析 抗 方 法 ， 据其 检测 方 法 可 分 为 非 标 记 免疫 分 析 和标 根 记免 疫分 析 。非标 记免疫 分 析是 利用 抗 原与 抗体 结
合形 成抗 原一 体 复 合 物 后 ， 理 化 性 质 发 生 改 变 ， 抗 其
发光 免疫 分析 的方法 。 Ｃ Ａ 与 放 射 免 疫 分 析 （ ａ ｉｉ Ｉ Ｉ ｒｄｏｍｍｕ ｏ ｓａ ， ｎ ａｓｙ Ｒ Ａ） 荧 光 免 疫 分 析 （ ｌｏ ｅｃｎ ｅ ｉ Ｉ 、 ｆ ｒｓｅ ｃ ｍｍｕ ｏ ｓａ ， ｕ ｎ ａｓｙ Ｉ Ａ） 酶 联 免 疫 分 析 （ ｎ ｙ — ｎ ｅ ｍｍｕ ｏ ｓ Ｆ 及 ｅ ｚ ｍｅｌ ｋ ｄ ｉ ｉ ｎ ａ—
学 发光 物质 经催 化 剂 的催 化 和 氧 化 剂 的 氧 化 ， 成 形
一
光过 程包 括三 个 基 本 过程 ： 化 学反 应 释 放 足 够 的 ① 能量 ， 过 程 存 在 产 能 效 率 （ ； 发 光 物 质 接 收 能 此 ｐ ② ｃ 量 ， 生化 学结 构 的改 变 ， 成 激 发 态 中间 体 ， 求 发 形 要 发光 物质 接 收 能 量 的效 率 比较 高 （ 量 传 递 效 率 ： 能
的 差 别 ， 化 学 发 光 免 疫 分 析 技 术 进 行 了 系 统 的 分 类 ， 且 对 各 种 方 法 进 行 了 详 细 的 介 绍 ， 其 优 点 和 不 足 对 并 对
做 了透彻 的分析 。就 目前 化 学发 光免 疫分析技 术在兽 医诊 断 、 医学诊 断及 食 品安 全检 测 上 的 应 用现状 与发
系统 和化学 发光 分析 系统 。免 疫反 应 系 统是 将标 记
物质标 记在 抗原 或抗 体上 ， 过特 异性 免 疫 反应 后 ， 经
形成抗 原一 体 复 合 物 。然 后 进 行 对 标 记 物 进 行 检 抗 测 ， 测定 待 检 物 。化 学 发 光 分 析 系 统 是 利 用 化 来 ］
化 学 发 光 免 疫 分 析 （ ｈ ｍｉ ｍｉｅｃｎ ｅｉ ｃ ｅ ｌ ｎ ｓｅ ｃ ｍｍｕ ｕ — ｎ ａｓｙ ＣＩ Ａ） 生 于 １ ７ ｏ ｓａ ， 诞 Ｉ ９ ７年 ， ｌ ｎ Ｍ 等 ］ Ｈａｍａ 根
器光量 子产 率 。
１ １ 免 疫 分 析 原 理 ．
据放 射免 疫分 析 的 基本 原理 ， 高灵 敏 的 化 学 发 光 将 技术 与高 特异 性 的 免疫 反应 结 合 起 来 ， 展 出 化学 发
简 便 、 需要 十分 昂贵 的仪 器设 备 等特 点 ， 不 应用 范 围
较 广 ， 可 检 测 不 同 分 子 大 小 的 抗 原 、 抗 原 和 抗 既 半 体 ， 可 用 于 核 酸 探 针 的 检 测 ］ Ｃ Ｉ 正 被 越 来 又 。。 ＬＡ
越 多地用 于 蛋 白质 、 素 、 瘤 、 激 肿 病原 微 生 物 、 物 等 毒 成 分 的检 测 ， Ｉ 技术 为兽 医学 、 ＣＬ Ａ 医学 及 食 品 分 析
光 形 式 释 放 出 来 。 因 此 ， 何 一 个 化 学 发 光 反 应 包 任 括 两 个 过 程 ： 发 和 发 光 过 程 。 一 个 典 型 的 化 学 发 激
同位 素免 疫检 测手 段 。
１ 化 学 发 光 免 疫 分 析 基 本 原 理
化 学 发 光 免 疫 分 析 包 含 两 个 部 分 ， 免 疫 反 应 即