测定食品中糖类

时 ， 能保证 色谱 峰的峰形尖锐 ， 才 否则色谱峰会展宽 ； 其次 ， 品提取 液与乙腈 １１ Ｖ Ｖ 混合 ， 以有效去 样 ：（ ／ ） 可 除提取 液的蛋 白质 。综合 以上考虑 ， 实验采用 ２３节 的样 品处 理方法 ， ． 既能减小样 品基质对 测定结果 的干
扰， 又能保证测 定溶液 中单糖和双糖色谱峰 的完好 ， 同时 除去样 品提取 液 中蛋 白质 。实验结果 表 明 ， 本处
实验 选择 Ｎ Ｈ 色
谱柱 以正相模 式分离糖 类 物质 ， 选用 水 和 乙腈 图 ｌ 饮 料 加 标 样 品 总 离 子 流 图
的混合液 为 流 动 相 。适 当增 加 流 动相 中 乙腈
含量有 助于 果糖 、 葡萄 糖 、 糖 、 芽糖 、 糖 蔗 麦 乳
的 分 离 。实 验 发 现 ， 用 水 一 腈 （ ５： ５ 采 乙 １ ８，
源 中 ， 负离子检 测方式 下进行母 离子 全扫描 ， 在 得到 果糖 、 萄糖 、 葡 蔗糖 、 芽糖 和乳 糖 的分 子离 子 分别 麦
为 ｍ ｚ１９ ７ ， ４ ． ， ４ ． ／ ７ ，１９ ３ １ １ ３ １ １和 ３ １ １ ４ ． 。以每种糖 的准分 子 离 子峰 为母 离 子 ， 进行 二级 质谱 扫 描 ， 采 集全 扫描 的二 级质 谱 图 ， 到 碎 片 离 子 信息 ， 得 然后再 对得 到 每种 糖 的二 级质 谱 参 数 如 破 碎 电压 、 碰撞 能 量 等进 行 优 化 ， 每 种糖 的定 性 使
第３ ８卷 ２１ ０ ０年 ６月
ＤＯＩ ０ ３ ２ ／Ｓ Ｊ １ ９ ２ １ ． ０ ７ ：１ ． ７ ４ Ｐ． ． ０ ６． ０ ０ ０ ８ ３
分 析 化 学 （ Ｅ Ｘ Ｕ Ｘ Ｅ） 研 究 简 报 ＦＮ Ｉ Ａ Ｕ Ｈ
Ｃ ｉｅ ｅＪ ｕ ｎ ｌ ｆＡｎ ｌｔ ａ ｈ ｍｉ ｒ ｈ ｎ ｓ ｏ ｒ ａ ａｙ ｉ ｌＣ ｅ ｓ ｙ ｏ ｃ ｔ
第 ６期
王 浩等 ： 液相 色谱 一 谱联 用技术测定无糖食 品中果糖 、 质 葡萄糖 、 蔗糖 、 麦芽糖和乳糖
８５ ７
Ｖ Ｖ 时 ， 以较 好地 分离 样 品 中果 糖 、 萄糖 、 ／） 可 葡 蔗糖 、 芽糖 和乳糖 （ 图 １所示 ） 麦 如 。 ３ ３ ２ 流 速及 进样 量 的选 择 ．． 本 实 验在 ０ ２～２ ０ｍＬ ｍ ｎ范 围 内考 察 了流 动 相 流 速 的影 响 ， 现 流 ． ． ／ ｉ 发
标 回收率为 ８ ． ％ ～ ７７ ； ６２ ９ ． ％ 相对标准偏差 为 ３ １ ～８ ７ 。 ．％ ．％
关键词 液 质 联 用 仪 ； 糖 食 品 ； 萄糖 ； 糖 ；蔗 糖 ；麦芽 糖 ； 糖 无 葡 果 乳
１ 引 言
２ ０世纪 ７ ０年代 ， 糖食 品问世 。最 初 的无糖 食 品只是 除去 食 品 中 的蔗糖 或 是添 加 盐分 ， 无 随着新 型 甜 味剂 的不 断出 现 ， 糖 食 品得 到 迅 速 发 展 ， 种 由最 初 的 十 几 种 发 展 到 上 万 种 。 我 国强 制 性 标 准 无 品
Ｇ ３ ３．０４ 预包 装特 殊膳食 用 食 品标签 通则 》 Ｂ１４ ２２０ ￣ 中规定 ： 只有 符 合 糖 （ 所 有 的单 糖 和双 糖 ） 固体 指 在
或液体 食 品 中的总 含量 低 于 ０ ５ｇ １０ｇ １０ ｍ ） 才可 以在 产 品标签 上标 注 “ 糖 ” 低 糖 食 品 的标 准 ． ／ ０ （ ０ Ｌ ， 无 ；
２ ３ 样 品 处 理 ．
２ ３ １饮料等 液态食 品 ．．
来自百度文库
准 确吸取样 品溶 液 ２ ５ｍ ． Ｌ至 ５ ０ｍＬ容 量 瓶 中 ， 水 定容 ， 旋 混匀 。准 确 吸 用 涡
取此溶液 ５ Ｏ ．０ｍＬ于 １ ０ｍＬ容量 瓶 中 ， 乙腈定 容至 刻度 ， 用 涡旋混 匀 。用 快 速定性 滤 纸 自然过 滤 （ 不易 过 滤 的浑浊 溶液转 移至离 心管 中 ， ５ ０ ／ ｉ 以 ０ ０ｒｒ ｎ离心 １ ｉ， ａ ０ ｍｎ 吸取 上清液 以 ０ ２ ｍ 滤膜过滤 ） ．０ 。滤液 过 ０ ２ ｍ滤 膜 ， 液相 色谱 一 ．０ 供 串联质谱 仪分 析 。 ２ ３２ 糕点 等 固态食 品 称取 ２５ｇ样 品 （ 确至 ００ ） 置 于 ５ Ｌ容 量瓶 中 ， 水定 容 ， ．． ． 精 ． １ｇ ， ０ｍ 用 涡旋 混 匀， 超声提取 ３ ｉ。准确移 取提取 溶液 ５ ０ Ｌ于 １ Ｌ容量 瓶 中 ， 乙腈 定容 ， 旋混 匀后 用快 速 ０ｍ ｎ ． ０ｍ ０ｍ 用 涡 定性 滤纸 自然 过滤 。滤液过 ０ ２ ｍ滤膜 ， ．０ 供液 相色谱 一 质谱仪 分析 。 串联
公 司） 。
乙腈 （ 色谱 纯 ）葡萄糖 、 ； 果糖 、 蔗糖 、 麦芽糖 、 乳糖均 购 自德 国 Ｄ ．Ｅ ｒｎｔｒｒ ｒ ｈｅｓ ｆ 公司 ， ｏｅ 纯度 ９ ％ ～ ９ ８ ９ ％。
２ ２ 分 析条件 ．
２ ２ １ 色谱条件 ．．
Ｗａｅｓ ａｂｈ ｄａｅＡ ａ ｓ 色谱柱 （ ０ ｎ× ． ｄ ，１ ｍ； ｔ ｒｏｙ ｒｔ ｎｌ ｉ ｒＣ ｙｓ ３ｏ Ｉ ３ ９ｍｍ ｉ ． ０ ｔ 预柱 ：１． ｍ× ｎ ． ． ｚ ２ ５ｍ
３ 结果 与讨 论
３ １ 样 品前处理 方法 的优 化 ．
Ｎ 色谱柱是 以正相 模式 分离糖类 物质 的色谱 柱 ， 将氨 丙基 单 体键 合 到高 比表 面积 的球 形硅 胶 Ｈ 是
载体 上而制得 。在 正相操 作条 件下 ， 比 乙腈 的极 性更 强 。 因此 ， 有 当测 定溶 液 中 乙腈含 量 ≥５ ％ 水 只 ０
摘
要
建立 了无糖食 品中葡 萄糖 、 果糖 、 蔗糖 、 芽糖 、 麦 乳糖 的高 效液相 色谱 一 串联 四极杆质 谱联 用测定 方
法 。本 方 法 以水 提 取 样 品 ， Ｗａ ｒ Ｃ ｒｏｙｒｔ Ａ ａ ｓ 柱 （ ０ ｍ × ． ｍ，１ ｍ） 离 ， 动 相 为 水 一 以 ｔ ｓ ａｂｈｄａｅ ｎ ｌ ｉ ｅ ｙ ｓ ３０ｍ ３ ９ｍ ０ 分 流 乙 腈 （５ ８ ， ／ ） 电 喷雾 负 离 子 ＭＲ 模 式 检 测 。 方 法 的 检 出 限 为 ０ １ ｋ ； 性 范 围为 ２ ５～ ２ ． ｒＬ 加 １ ：５ Ｖ Ｖ ， Ｍ ， ｇ 线 ． １５ ０ｍ， ； ／
蔗糖 、 麦芽 糖 、 糖 的检 出 限均为 ０ ４ ， 乳 ． ％ 而且 ， 能消 除无糖 食 品 中广 泛添 加 的糖 醇 等甜 味 剂对 单糖 和 不
双糖测 定 时产 生干 扰 。因此 ， 寻求 简便 、 速 、 快 准确 、 敏感 性 高 、 择性 好 的无 糖食 品 中单 糖 和双糖 的检 选 测方法 ， 才能 为我 国无糖 食 品 中单 糖 、 双糖 的 日常监 管 工作 提 供技 术 支 持 ， 而保 障无糖 食 品 的食 用 安 从
各种单 糖 、 双糖 的质谱 分析 条件参数 见表 １ 。
表 １ 果糖 、 葡萄糖 、 蔗糖 、 麦芽糖和乳糖的质谱参 数
Ｔ ｂ ｅ １ Ｐ ｒ ｍｅ ｅｓ ｏ ｓ ｐ ｃｒ ｆ ｒ ｃｏ ｅ，ｇｕ ｏ ｅ，ｓ ｃｏ ｅ，ｍａｔｓ ｎ ａ ｔ ｓ ａ ｌ ａａ ｔｒ ｆＭａ ｓ ｓ ｅ ｔ ｏ ｕ ｔｓ ａ ｆ ｌｃｓ ｕ ｒｓ ｌ ｅ ａ ｄ ｌ ｃｏ ｅ ｏ
Ｆ ｇ １ Ｔ ｔｌｉｎ ｓ ｅ ｔ ｍ ｏ ｕ ａ ｆｓ ｉｅ ｅ ｅａ ｅ ａ ｌ ｉ． ｏ ａ ｏ ｐ ｃｒ ｆ ｇ ｒｏ ｐ ｋ ｄ ｂ ｖ ｒｇ ｓｓ ｍｐ ｅ ｕ ｓ
１ ．果 糖 （ ｒｃ ｓ） ２ Ｆｕｔ ｅ ； ．葡 萄 糖 （ ｌ ｏｅ ；３ 蔗 糖 （ ｕｒｓ） ４ ｏ Ｇｕ ｓ ） ． ｃ Ｓ ｃ ｅ ； ．麦 芽 ｏ 糖 《 ｈｓ） ５ Ｍａ ｏｅ ； ．乳 糖 （ ａｔ ｅ 。 Ｌｃｏ ） ｓ
为糖 （ 指所 有 的单糖 和 双糖 ） 固体或 液体 食 品 中的总含 量低 于 ５ｇ１０ｇ １０ｍ ） 在 ／０ （０ Ｌ 。
目前 ， 检测 食 品 单糖 和双 糖 的方 法 有 化 学 法 ¨ 、 效 液相 色 谱 法 等 高 和质 谱 法 。液 相 色谱 法 与现在 使 用 的测 定糖 含量 的菲林滴 定 法相 比具 有灵 敏 度好 、 检测 速 度快 、 用 范 围广 的特 点 ， 是也 存 适 但 在方法 检 出 限低 ， 除 干扰 能力差 等 缺 点 。 目前 ， 国检测 食 品单 糖 和 双 糖 的 最新 标 准 检 测 方法 Ｇ ／ 排 我 Ｂ Ｔ ２ ２ １２ ０ （ 品 中葡萄糖 、 糖 、 ２ ２ ． ．０ Ｓ 食 果 蔗糖 、 芽糖 、 麦 乳糖 的测 定 高效 液相 色谱 法 》 中规定 ： 萄糖 、 糖 、 葡 果
２０ —２０ 稿 ；０ ００ ＿７接 受 ０ ９１ －１收 ２ １ －１２
｝ Ｅ— ｉ：ｈ ｐ ｙ ８ ０ ＠ １ ３． ｏ ｍａ ｌ ａ ｐ ６ ０ ６ ｃ ｎ
＿
８４ ７
分 析 化 学
第３ ８卷
检测 ； 干燥气 ： ２雾化气 压力 ：４ ． Ｐ ； Ｎ； ３ ４ ８ｋ ａ 干燥 气温度 ：２ Ｃ； ３ ５ｑ 干燥 气 流速 ： Ｌ ｍｉ； 化温 度 ：５ ９ ／ ｎ汽 ３ ０℃ 。
离子与定 量 离子 产 生 的 离子 对 强 度 比例达 到
最大时为最 佳 ， 而得到 每种 糖 的最 佳质谱 参 从
数（ 如表 １ 示 ） 所 。 ３ ３ 色谱条 件的优化 ．
５ ６ ７ ８ ９ ｌ ０ ¨ ｄ ｉ ｍ ｎ ｉ ２ ｌ ３ ｌ ４ ｌ ５
３ ３ １ 色谱 分离条 件选 择 ．．
第 ６期
８ ３～８ ６ ７ ７
液 相 色 谱 － 谱 联 用 技 术 测 定 质
无 糖 食 品 中果 糖 、 萄 糖 、 葡 蔗糖 、 芽 糖和 乳 糖 麦
王 浩 刘 艳 琴 杨 红 梅 郭 启 雷 史 海 良 阎龙 宝
（ 国家 食 品质 量 安 全监 督 检 验 中 心 ， 京 １０ ９ ） 北 ０ ０４
） 。
４ ６ｍ ． ． １ ｐ ； ． ｍ ｉｄ ， ０ ￣ ｍ） 流速 ：． Ｌ ｍ ｎ 柱 温 ： １０ｍ ／ ｉ ； ３ ０℃ ； 样量 ： Ｌ 流动相 ： 一 进 ｌ ０ ； 水 乙腈 （ ５ ８ １ ：５，
２２ ２ 质 谱条 件 ．．
离子 源 ： 大气压 化 学 电离 离 子 源 （ Ｐ Ｉ ； Ａ Ｃ ） 扫描 方 式 ： 离 子 扫描 ； 测 方 式 ： 负 检 多反 应
全 。本 方 法采 用高 效液 相 色谱 串联 质谱 技术 同时测 定和 确证 无糖食 品 中葡 萄糖 、 糖 、 果 蔗糖 、 芽糖 和 麦
乳糖 ， 具有 操作 简单 、 敏度 高 、 择性 好 、 灵 选 测定 周期 短 等优点 。
２ 实 验 部 分
２ １ 仪器 与试 剂 ．
６１ ４ ０型 串联三 重 四极杆质谱 （ 国 Ａ ｉ ｎ 公 司 ） 配 Ａ ｉ ｎ １０ 美 ｇｅｔ ｌ ， ｇ ｅ ｔ ２ ０型液相 色谱仪 ； Ｌ８ ｂ型涡旋混合 ｌ Ｇ 一８
理方法使 样 品中的葡萄糖 、 果糖 、 蔗糖 、 麦芽 糖和乳 糖有较 高 的稳 定性 ， 并可获 得满 意的提 取效率 。
３ ２ 质谱条 件的优 化 ．
采用直 接进样 方式分 别将 每种 １ｇ Ｌ的果 糖 、 萄糖 、 ／ 葡 蔗糖 、 芽 糖 和乳糖 标 准 溶液 分别 注 入 离子 麦
器 （ 门 市 其 林 贝 尔 仪 器 制 造 有 限 公 司 ） Ｑ ５０ 海 ；Ｋ 一２０型 超 声 波 清 洗 仪 （ 山市 超 声 仪 器 有 限 公 司 ） 昆 ； Ｔ Ｌ １ Ｍ 型 高速 台式冷 冻离 心 机 （ 仪离 心机 仪 器有 限公 司 ） Ｇ 一６ 湘 。Ｍｉｉ 去 离 子 水 发 生 器 （ 国 Ｍｉｉ ｌ— ｌＱ 美 ｌ— ｌＱ