TLC快速分析多糖的单糖组成
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展开系统 １ ：分别把乙酸乙脂、吡啶、无水乙醇、 水按８：１：１：２（体积比）的比例混合摇匀。
展开系统 ２：分别把正丁醇、丙酮、水按 ４：３：１（体 积比） 的比例混合摇匀。
展开系统 ３ ：分别把正丁醇、乙酸乙脂、异丙醇、 醋酸、水、吡啶按３５：１００：６０：３５：３０：３０（体积比）的比例混 合摇匀。 １．５ 显色剂的配置
分别称取果糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、鼠李 糖，分别溶于蒸馏水中制得五种单糖标准液。浓度均 为 １．００ｍｇ／ｍｌ。
分别称取葡萄糖、半乳糖、果糖、木糖、鼠李 糖，共溶于 ２ｍｌ 蒸馏水制得混合单糖标准液。各单糖在 混合单糖标准液中的浓度为 ０．５０ｍｇ／ｍｌ。 １．３ 水解多糖样品的制备
称取 ２０ｍｇ 多糖，溶解在 ５ｍｌ 重蒸水中，加入 １２ｍｏｌ／Ｌ 的 ＨＣｌ ０．２５ｍｌ，置于高压釜中在 １２０～１２６℃条件下水解 ４ ｈ 。中和、透析后稀释至 １ ０ ｍ ｌ 。 １．４ 展开系统配置
量进行正确的测量，我们自制了几种样品。自制样品 组成为：１．０ × １０ －４ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ、ＫＣｌ、Ｃａ（ＮＯ３） ２、葡 萄糖、麦芽糖、果糖、蔗糖、酒石酸及柠檬酸及 ０ ． ５ × １０－５～１ × １０－５ｍｏｌ／Ｌ 抗坏血酸。其测定结果如表 ２ 所 示。由表 ２ 可知，测定的抗坏血酸含量与已知含量基本 一致。
No.2 extending system
编号
２ 半乳糖 Ｒｆ ＝０．３４３
１ 混合单糖 ＋
７ 多糖
３ 葡萄糖 Ｒｆ ＝０．４２４
＋ ＋
４ 果糖 Ｒｆ ＝０．４８４
＋ ＋
５ 木糖 Ｒｆ ＝０．５８
＋
６ 鼠李糖 Ｒｆ ＝０．６６４
＋
Fig.1
１２ ３ ４５６ ７
图 １ 展开系统１的展层效果图 The result presented by using No.1 extending system
单糖组分的分离测定方法目前主要有高效液相色谱 法（ＨＰＬＣ） 、气相色谱法（ＧＣ）、薄层色谱法（ＴＬＣ）等［６］。 采用 Ｇ Ｃ 测定糖类，遇到的主要困难是糖本身没有足够 的挥发性，所以必须在气相色谱分析之前预先转化成易 挥发、对热较稳定的衍生物。另外，由于糖的异构化， 在某些衍生物的制备过程中，会产生衍生物的异构体， 使色谱分析时每种糖产生几个峰，这往往影响组分的分 离和定量。Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 有分离速度快、分辨率高、分离效 果好、重现性好、不破坏样品的优点。但糖类本身没 有紫外吸收，只能采用示差折光检测器（ＲＩ）或蒸发光散 射检测器（ＥＬＳＤ）检测。ＲＩ 分辨率低而 ＥＬＳＤ 虽然效果好 但目前价格昂贵。另外，采用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 分析时，色谱柱 的选择也比较困难。一般采用氨基柱但分离效果欠佳， 而专用的糖柱又十分昂贵。为了找到一种常规实验室即 可快速分析单糖组成的方法，我们摸索了薄层色谱法 （ Ｔ Ｌ Ｃ ）。该方法是一种微量而快速的分析方法。它兼备 了柱层析和纸层析两者的优点并且操作方便，设备简 单，容易掌握、便宜、灵活的特点。本文采用 Ｔ Ｌ Ｃ 对水解多糖的单糖组成进行分析，确定了适用于单糖分 析的展开系统、显色系统及 Ｒ ｆ 值。
１ 材料与方法
１．１ 药品与材料 银耳多糖 本实验室自制；Ｄ－ 葡萄糖、Ｄ－ 半乳糖、
Ｄ－ 木糖、Ｌ － 鼠李糖、Ｄ－ 果糖 上海试剂二厂；盐酸、
乙酸乙脂、吡啶、无水乙醇、正丁醇、丙酮、正丁 醇、异丙醇、醋酸、磷酸、硫酸、苯胺、二苯胺 皆为分析纯试剂；实验用水为蒸馏水。
微量定量点样毛细管 美国科尔帕默公司；２０ｃｍ × ２０ｃｍ 硅胶层析板 德国默克公司。 １．２ 单糖和混合单糖标准溶液的配置
１２ ３ ４ ５６７
图 ２ 展开系统２的展层效果图 Fig.2 The result presented by using No.2 extending system
萄糖、半乳糖斑点。由所得的 Ｔ Ｌ Ｃ ，计算展开系统 ２ 中各单糖斑点的 Ｒ ｆ 值。结果见表 ２ 。
Table 2
表２ 展开系统２中检出单糖组分表 The monosaccharide composition analyzed by using
［２］ 胡慰望， 谢笔钧． 食品化学［Ｍ］． 北京： 科学出版社， １９９２． ２４３． ［３］ 黄伟坤， 等． 食品检验与分析［Ｍ］． 北京： 中国轻工业出版社， １９８９．９６． ［４］ Ａ Ｈ Ｅｎｓｍｉｎｇｅｒ， Ｍ Ｅ Ｅｎｓｍｉｎｇｅｒ， Ｊ Ｅ Ｋｏｎｌａｎｄｅ， 等． 食品与营养百科
显色剂 １（ 苯胺 － 二苯胺 － 磷酸显色剂） ：２％ 二苯胺 丙酮溶液：２％ 苯胺丙酮溶液：８５％磷酸按 ５：５：１的比例混合 摇匀。
显色剂 ２：把 １０ｍｌ 硫酸缓慢倒入 ９０ｍｌ 水中混合冷 却，制得 １ ０ ％ 的硫酸溶液装瓶待用。 １．６ 操作步骤
１．６．１ 点样 将水解多糖、已知单糖标准液和混合单糖标准
开剂中 ０．３～０．５ｃｍ，至展开剂距离薄层板的上端约 １ｃｍ 左右时取出自然风干。 １．６．３ 显色
在除去溶剂后的薄层板上，均匀喷上显色剂，烘 箱中加热显色。
２ 结果与分析
２．１ 展开剂的比较 ２．１．１ 展开系统 １
用展开系统 １ 按 １．６ 对样品（１．混合单糖；２．果糖； ３．半乳糖；４．葡萄糖；５．木糖；６．鼠李糖；７．水解多糖） 进行 Ｔ Ｌ Ｃ 分析，展层效果见图 １ 。
全书［Ｍ］． 王淮洲， 王惟球， 王模善， 等译． 北京：农业出版社， １９８９．
604 2006, Vol. 27, No. 12
食品科学
※分析检测
ａｃｑｕｉｒｅｄ ａｓ ｓｈｏｗｎ ｂｙ ｔｈｅ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ． Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｃａｎ ｂｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｉｎ ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｒｆ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｐｏｔｓ． Ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｆｉｇｕｒｅｓ ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＴＬＣ．Ｔｈｅ ｅｘｔｅｎｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｋ ｅ ｙ ｗ ｏ ｒ ｄ ｓ：ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ；ｔｈｉｎ－ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ ＴＬＣ） 中图分类号：ＴＳ２０７．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００６）１２－０６０３－０５
多糖作为来自高等植物、动物细胞膜和微生物细胞 壁中的天然高分子化合物，是构成生命的四大基本物质 之一。随着人们对多糖组成、性质、结构与功能研究 的不断深入。对多糖的生物活性也有了更多的认识，能 提高机体免疫力，增强机体耐缺氧能力，清除自由基， 抑制肿瘤，可用于治疗高血压、高血脂、糖尿病、乙 型肝炎等多种现代医学中的疑难病症［１ ～３］ 。多糖的研究 受到了越来越广泛的重视。并取得了丰硕的成果，已 有香菇多糖、灵芝多糖等应用于临床。国内外研究表 明，多糖的活性与许多因素有关，如分子量、溶解性 等，特别是与其空间结构密切相关［ ４ ， ５ ］ 。由于一级结构 是空间结构的基础，而多糖的单糖组成是一级结构的主 要内容，所以有必要找到一种简便、灵敏的方法以确 定多糖的单糖组成。
ＴＬＣ ｔｏ Ｆｌｅｅｔｌｙ Ａｎａｌｙｚｅ Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ＹＡＮ Ｊｕｎ，ＧＵＯ Ｘｉａｏ－ｑｉａｎｇ，ＬＩ Ｘｉａｏ－ｇｕａｎｇ，ＷＵ Ｘｉａｏ－ｙｏｎｇ，ＧＯＵ Ｘｉａｏ－ｊｕｎ＊ （Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｕｎｉｖｈｉｎａ）
由图 １ 可得，在展开系统 １ 中混合单糖中各单糖完 全分离，各单糖斑点集中无拖尾现象；水解多糖中呈现 半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖斑点。由所得的 Ｔ Ｌ Ｃ ， 计算展开系统 １ 中各单糖斑点的 Ｒ ｆ 值，结果见表 １ 。
液，７ 种样品按一定顺序分别点样在薄层板上。点样量 约 １０μｌ，分次滴加，使点样扩散后其直径不超过 ２ｍｍ 。 点样过程中用吹风机使样品干燥。
１．６．２ 展层 将点好样品的薄层板置于密闭的层析缸中，用配置
的展开剂，采用倾斜上行法，将薄层板的下端浸在展
※分析检测
食品科学
2006, Vol. 27, No. 12 605
Table 1 Effect of foreign species
ＫＣｌ
Ｃａ（ＮＯ３） ２
葡萄糖
２００
２００
１００
麦芽糖 １００
果糖
蔗糖
１００
１００
酒石酸 １００
柠檬酸 １００
误差控制在± ５ ％ 之内时） 。因此，该电极应用于蔬菜 和水果中抗坏血酸的测定将具有很好的选择性。
２．３．２ 样品测定 为了验证该修饰电极能否在实际样品中抗坏血酸含
※分析检测
食品科学
2006, Vol. 27, No. 12 603
ＴＬＣ 快速分析多糖的单糖组成
颜 军，郭晓强，李晓光，邬晓勇，苟小军 ＊ （成都大学中药化学实验室，四川 成都 ６１０１０６）
摘 要：本文采用薄层色谱法分析多糖的单糖组成。从斑点分离度、清晰度、有无拖尾现象及展层时间等方面 综合评价展层效果。通过实验确定了适合的展开剂为展开系统（乙酸乙脂：吡啶：无水乙醇：水 ＝８：１：１：２）、合适的显 色剂为苯胺 － 二苯胺磷酸显色剂。通过此体系确定了单糖的 Ｒｆ 值，可用于快速分析水解多糖的单糖组分。 关键词：多糖；单糖组成；薄层色谱
３ 结 论
该新型的修饰电极具有极高的化学稳定性，且对溶 液中的抗坏血酸具有良好的电催化作用，已成功地应用 于水果中抗坏血酸含量的测定，获得了比较满意的结
表 ２ 样品测定结果 Table 2 Results of the determination of samples
样品编号 １
加入 （×１０－５ｍｏｌ／Ｌ） ０．５５
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ： Ａｐｐｌｙｉｎｇ ＴＬＣ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｗａｓ ｓｔｕｉｄｅｄ． Ａ ｍｉｘｅｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｃｏｍｐｏｓｅｄ ｏｆ ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ， ｐｙｒｉｄｉｎｅ， ａｌｃｏｈｏｌ ａｎｄ ｗａｔｅｒ ｉｎ ａ ｒａｔｉｏ ｏｆ ＶＣ４Ｈ８Ｏ２：ＶＣ５Ｈ ５Ｎ：ＶＣ２Ｈ６Ｏ：ＶＨ２Ｏ ＝ ８：１：１：２ ｂｙ ｖｏｌｕｍｅ ｉｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｅｘｔｅｎｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ． Ａ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａｎｉｌｉｎｅ ａｎｄ ｄｉｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｅ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｅ ｉｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ． Ｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｉｓ
收稿日期：２００６－０７－２６ ＊通讯作者 基金项目：四川省中医药管理局重点及专项项目（２００３Ａ００１、２００３Ｃ００１） 作者简介：颜军（ １ ９ ７ １ － ） ，男，实验师，研究方向为生物活性成分的提取及检测。
干扰物质 倍数
ＮａＣｌ ２００
表 １ 干扰物质的影响
２
０．７６
３
０．７９
４
０．９７
注：ａ １ ０ 次检测的平均值。
检出ａ （×１０－５ｍｏｌ／Ｌ） ０．５４ ０．７３ ０．８２ ０．９８
果，可望成为能满足不同需要的抗坏血酸传感器。
参考文献：
［１］ Ｄ Ｗ Ｍａｒｔｉｎ Ｊｒ． Ｈａｒｐｅｒ＇ｓ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， １９ｔｈ ｅｄ Ｅｄｓ： Ｄ Ｗ Ｍａｒｔｉｎ Ｊｒ， Ｐ Ａ Ｍａｙｅｓ， Ｖ Ｗ Ｒｏｄｗｅｌｌ． Ｌａｎｇｅ， Ｌｏｓ Ａｌｔｏｓ， ＣＡ， １９８３． １１２．
展开系统 ２：分别把正丁醇、丙酮、水按 ４：３：１（体 积比） 的比例混合摇匀。
展开系统 ３ ：分别把正丁醇、乙酸乙脂、异丙醇、 醋酸、水、吡啶按３５：１００：６０：３５：３０：３０（体积比）的比例混 合摇匀。 １．５ 显色剂的配置
分别称取果糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、鼠李 糖，分别溶于蒸馏水中制得五种单糖标准液。浓度均 为 １．００ｍｇ／ｍｌ。
分别称取葡萄糖、半乳糖、果糖、木糖、鼠李 糖，共溶于 ２ｍｌ 蒸馏水制得混合单糖标准液。各单糖在 混合单糖标准液中的浓度为 ０．５０ｍｇ／ｍｌ。 １．３ 水解多糖样品的制备
称取 ２０ｍｇ 多糖，溶解在 ５ｍｌ 重蒸水中，加入 １２ｍｏｌ／Ｌ 的 ＨＣｌ ０．２５ｍｌ，置于高压釜中在 １２０～１２６℃条件下水解 ４ ｈ 。中和、透析后稀释至 １ ０ ｍ ｌ 。 １．４ 展开系统配置
量进行正确的测量，我们自制了几种样品。自制样品 组成为：１．０ × １０ －４ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ、ＫＣｌ、Ｃａ（ＮＯ３） ２、葡 萄糖、麦芽糖、果糖、蔗糖、酒石酸及柠檬酸及 ０ ． ５ × １０－５～１ × １０－５ｍｏｌ／Ｌ 抗坏血酸。其测定结果如表 ２ 所 示。由表 ２ 可知，测定的抗坏血酸含量与已知含量基本 一致。
No.2 extending system
编号
２ 半乳糖 Ｒｆ ＝０．３４３
１ 混合单糖 ＋
７ 多糖
３ 葡萄糖 Ｒｆ ＝０．４２４
＋ ＋
４ 果糖 Ｒｆ ＝０．４８４
＋ ＋
５ 木糖 Ｒｆ ＝０．５８
＋
６ 鼠李糖 Ｒｆ ＝０．６６４
＋
Fig.1
１２ ３ ４５６ ７
图 １ 展开系统１的展层效果图 The result presented by using No.1 extending system
单糖组分的分离测定方法目前主要有高效液相色谱 法（ＨＰＬＣ） 、气相色谱法（ＧＣ）、薄层色谱法（ＴＬＣ）等［６］。 采用 Ｇ Ｃ 测定糖类，遇到的主要困难是糖本身没有足够 的挥发性，所以必须在气相色谱分析之前预先转化成易 挥发、对热较稳定的衍生物。另外，由于糖的异构化， 在某些衍生物的制备过程中，会产生衍生物的异构体， 使色谱分析时每种糖产生几个峰，这往往影响组分的分 离和定量。Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 有分离速度快、分辨率高、分离效 果好、重现性好、不破坏样品的优点。但糖类本身没 有紫外吸收，只能采用示差折光检测器（ＲＩ）或蒸发光散 射检测器（ＥＬＳＤ）检测。ＲＩ 分辨率低而 ＥＬＳＤ 虽然效果好 但目前价格昂贵。另外，采用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ 分析时，色谱柱 的选择也比较困难。一般采用氨基柱但分离效果欠佳， 而专用的糖柱又十分昂贵。为了找到一种常规实验室即 可快速分析单糖组成的方法，我们摸索了薄层色谱法 （ Ｔ Ｌ Ｃ ）。该方法是一种微量而快速的分析方法。它兼备 了柱层析和纸层析两者的优点并且操作方便，设备简 单，容易掌握、便宜、灵活的特点。本文采用 Ｔ Ｌ Ｃ 对水解多糖的单糖组成进行分析，确定了适用于单糖分 析的展开系统、显色系统及 Ｒ ｆ 值。
１ 材料与方法
１．１ 药品与材料 银耳多糖 本实验室自制；Ｄ－ 葡萄糖、Ｄ－ 半乳糖、
Ｄ－ 木糖、Ｌ － 鼠李糖、Ｄ－ 果糖 上海试剂二厂；盐酸、
乙酸乙脂、吡啶、无水乙醇、正丁醇、丙酮、正丁 醇、异丙醇、醋酸、磷酸、硫酸、苯胺、二苯胺 皆为分析纯试剂；实验用水为蒸馏水。
微量定量点样毛细管 美国科尔帕默公司；２０ｃｍ × ２０ｃｍ 硅胶层析板 德国默克公司。 １．２ 单糖和混合单糖标准溶液的配置
１２ ３ ４ ５６７
图 ２ 展开系统２的展层效果图 Fig.2 The result presented by using No.2 extending system
萄糖、半乳糖斑点。由所得的 Ｔ Ｌ Ｃ ，计算展开系统 ２ 中各单糖斑点的 Ｒ ｆ 值。结果见表 ２ 。
Table 2
表２ 展开系统２中检出单糖组分表 The monosaccharide composition analyzed by using
［２］ 胡慰望， 谢笔钧． 食品化学［Ｍ］． 北京： 科学出版社， １９９２． ２４３． ［３］ 黄伟坤， 等． 食品检验与分析［Ｍ］． 北京： 中国轻工业出版社， １９８９．９６． ［４］ Ａ Ｈ Ｅｎｓｍｉｎｇｅｒ， Ｍ Ｅ Ｅｎｓｍｉｎｇｅｒ， Ｊ Ｅ Ｋｏｎｌａｎｄｅ， 等． 食品与营养百科
显色剂 １（ 苯胺 － 二苯胺 － 磷酸显色剂） ：２％ 二苯胺 丙酮溶液：２％ 苯胺丙酮溶液：８５％磷酸按 ５：５：１的比例混合 摇匀。
显色剂 ２：把 １０ｍｌ 硫酸缓慢倒入 ９０ｍｌ 水中混合冷 却，制得 １ ０ ％ 的硫酸溶液装瓶待用。 １．６ 操作步骤
１．６．１ 点样 将水解多糖、已知单糖标准液和混合单糖标准
开剂中 ０．３～０．５ｃｍ，至展开剂距离薄层板的上端约 １ｃｍ 左右时取出自然风干。 １．６．３ 显色
在除去溶剂后的薄层板上，均匀喷上显色剂，烘 箱中加热显色。
２ 结果与分析
２．１ 展开剂的比较 ２．１．１ 展开系统 １
用展开系统 １ 按 １．６ 对样品（１．混合单糖；２．果糖； ３．半乳糖；４．葡萄糖；５．木糖；６．鼠李糖；７．水解多糖） 进行 Ｔ Ｌ Ｃ 分析，展层效果见图 １ 。
全书［Ｍ］． 王淮洲， 王惟球， 王模善， 等译． 北京：农业出版社， １９８９．
604 2006, Vol. 27, No. 12
食品科学
※分析检测
ａｃｑｕｉｒｅｄ ａｓ ｓｈｏｗｎ ｂｙ ｔｈｅ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ． Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｃａｎ ｂｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｉｎ ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ Ｒｆ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｓｐｏｔｓ． Ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｆｉｇｕｒｅｓ ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＴＬＣ．Ｔｈｅ ｅｘｔｅｎｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｋ ｅ ｙ ｗ ｏ ｒ ｄ ｓ：ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ；ｔｈｉｎ－ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ ＴＬＣ） 中图分类号：ＴＳ２０７．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００６）１２－０６０３－０５
多糖作为来自高等植物、动物细胞膜和微生物细胞 壁中的天然高分子化合物，是构成生命的四大基本物质 之一。随着人们对多糖组成、性质、结构与功能研究 的不断深入。对多糖的生物活性也有了更多的认识，能 提高机体免疫力，增强机体耐缺氧能力，清除自由基， 抑制肿瘤，可用于治疗高血压、高血脂、糖尿病、乙 型肝炎等多种现代医学中的疑难病症［１ ～３］ 。多糖的研究 受到了越来越广泛的重视。并取得了丰硕的成果，已 有香菇多糖、灵芝多糖等应用于临床。国内外研究表 明，多糖的活性与许多因素有关，如分子量、溶解性 等，特别是与其空间结构密切相关［ ４ ， ５ ］ 。由于一级结构 是空间结构的基础，而多糖的单糖组成是一级结构的主 要内容，所以有必要找到一种简便、灵敏的方法以确 定多糖的单糖组成。
ＴＬＣ ｔｏ Ｆｌｅｅｔｌｙ Ａｎａｌｙｚｅ Ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ＹＡＮ Ｊｕｎ，ＧＵＯ Ｘｉａｏ－ｑｉａｎｇ，ＬＩ Ｘｉａｏ－ｇｕａｎｇ，ＷＵ Ｘｉａｏ－ｙｏｎｇ，ＧＯＵ Ｘｉａｏ－ｊｕｎ＊ （Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｕｎｉｖｈｉｎａ）
由图 １ 可得，在展开系统 １ 中混合单糖中各单糖完 全分离，各单糖斑点集中无拖尾现象；水解多糖中呈现 半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖斑点。由所得的 Ｔ Ｌ Ｃ ， 计算展开系统 １ 中各单糖斑点的 Ｒ ｆ 值，结果见表 １ 。
液，７ 种样品按一定顺序分别点样在薄层板上。点样量 约 １０μｌ，分次滴加，使点样扩散后其直径不超过 ２ｍｍ 。 点样过程中用吹风机使样品干燥。
１．６．２ 展层 将点好样品的薄层板置于密闭的层析缸中，用配置
的展开剂，采用倾斜上行法，将薄层板的下端浸在展
※分析检测
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2006, Vol. 27, No. 12 605
Table 1 Effect of foreign species
ＫＣｌ
Ｃａ（ＮＯ３） ２
葡萄糖
２００
２００
１００
麦芽糖 １００
果糖
蔗糖
１００
１００
酒石酸 １００
柠檬酸 １００
误差控制在± ５ ％ 之内时） 。因此，该电极应用于蔬菜 和水果中抗坏血酸的测定将具有很好的选择性。
２．３．２ 样品测定 为了验证该修饰电极能否在实际样品中抗坏血酸含
※分析检测
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ＴＬＣ 快速分析多糖的单糖组成
颜 军，郭晓强，李晓光，邬晓勇，苟小军 ＊ （成都大学中药化学实验室，四川 成都 ６１０１０６）
摘 要：本文采用薄层色谱法分析多糖的单糖组成。从斑点分离度、清晰度、有无拖尾现象及展层时间等方面 综合评价展层效果。通过实验确定了适合的展开剂为展开系统（乙酸乙脂：吡啶：无水乙醇：水 ＝８：１：１：２）、合适的显 色剂为苯胺 － 二苯胺磷酸显色剂。通过此体系确定了单糖的 Ｒｆ 值，可用于快速分析水解多糖的单糖组分。 关键词：多糖；单糖组成；薄层色谱
３ 结 论
该新型的修饰电极具有极高的化学稳定性，且对溶 液中的抗坏血酸具有良好的电催化作用，已成功地应用 于水果中抗坏血酸含量的测定，获得了比较满意的结
表 ２ 样品测定结果 Table 2 Results of the determination of samples
样品编号 １
加入 （×１０－５ｍｏｌ／Ｌ） ０．５５
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ： Ａｐｐｌｙｉｎｇ ＴＬＣ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｗａｓ ｓｔｕｉｄｅｄ． Ａ ｍｉｘｅｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｃｏｍｐｏｓｅｄ ｏｆ ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ， ｐｙｒｉｄｉｎｅ， ａｌｃｏｈｏｌ ａｎｄ ｗａｔｅｒ ｉｎ ａ ｒａｔｉｏ ｏｆ ＶＣ４Ｈ８Ｏ２：ＶＣ５Ｈ ５Ｎ：ＶＣ２Ｈ６Ｏ：ＶＨ２Ｏ ＝ ８：１：１：２ ｂｙ ｖｏｌｕｍｅ ｉｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｅｘｔｅｎｄｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ． Ａ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａｎｉｌｉｎｅ ａｎｄ ｄｉｐｈｅｎｙｌａｍｉｎｅ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｅ ｉｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｃｏｌｏｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ． Ｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｉｓ
收稿日期：２００６－０７－２６ ＊通讯作者 基金项目：四川省中医药管理局重点及专项项目（２００３Ａ００１、２００３Ｃ００１） 作者简介：颜军（ １ ９ ７ １ － ） ，男，实验师，研究方向为生物活性成分的提取及检测。
干扰物质 倍数
ＮａＣｌ ２００
表 １ 干扰物质的影响
２
０．７６
３
０．７９
４
０．９７
注：ａ １ ０ 次检测的平均值。
检出ａ （×１０－５ｍｏｌ／Ｌ） ０．５４ ０．７３ ０．８２ ０．９８
果，可望成为能满足不同需要的抗坏血酸传感器。
参考文献：
［１］ Ｄ Ｗ Ｍａｒｔｉｎ Ｊｒ． Ｈａｒｐｅｒ＇ｓ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， １９ｔｈ ｅｄ Ｅｄｓ： Ｄ Ｗ Ｍａｒｔｉｎ Ｊｒ， Ｐ Ａ Ｍａｙｅｓ， Ｖ Ｗ Ｒｏｄｗｅｌｌ． Ｌａｎｇｅ， Ｌｏｓ Ａｌｔｏｓ， ＣＡ， １９８３． １１２．