盐角草在盐胁迫条件下的POD活性变化

三、盐角草与小麦POD活性测定结果
3.1盐胁迫第7天盐角草与小麦体内POD活性变化
盐角草 小麦
POD 活性 （Δ OD470/g.min)
12 10 8 6 4 2 0 0 50 100 150 200 300 400 NaCl 浓度（mmol/L）
3.2盐胁迫第14天盐角草与小麦体内POD活性变化
盐胁迫条件下盐角草体内过氧化物 酶（POD）活性变化研究
班 姓 级：0902 名：高朋
指导老师：郭艳茹
论文主要结构
• 前言 • 材料与方法 • 结果及分析 • 结论
一、前言
1.1 材料介绍
盐角草植株常发 红色，径直立，自 基部分枝，直伸或 上升，小枝肉质， 叶肉质多汁，几不 发育，近圆球形， 长2-3毫米，灰绿色， 基部下延，抱茎或 半抱茎，呈叶鞘状， 仅在顶部成近圆球 状。
致谢
在此向所有关心和帮助过我的老师、同学 朋友们表示深深的感谢！
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1.2 课题研究的目的和意义 本实验通过比较盐胁迫条件下小麦和盐角草 体内POD活性的变化，了解盐角草体内POD活性 与其耐盐性关系。在盐渍环境中，植物吸水困难， 甚至发生植物体内水分外渗现象，表现为生理干 旱，是因为高浓度盐分降低了土壤水势，通常植 物为了不受高盐度盐害，保证其正常的生理活动， 可通过不同生理途径适应或部分适应高浓度盐分。 我国土地盐碱化严重，研究植物的抗逆性意义重 大，我们通过对盐角草体内POD活性与其耐盐性 关系的研究，而将其借鉴到其它植株中，从而克 服盐碱地植株难以生存的难题。
2.2.2实验步骤
a. 对培养的实验材料盐角草与小麦分别按照NaCl溶液浓度梯度 依次进行盐胁迫。 b. 选取样品植株上不同叶位的叶片，洗净擦干，剪碎至若干小 截，混匀。 c. 称取已剪碎的植物叶片小截1 g，放入研钵中，加入适量液氮 充分研磨至粉末，加入适量（5 mL）的磷酸缓冲液于研钵中研 磨成匀浆，以4000 r/min离心15 min，上清液转入100 mL的 容量瓶中，残渣再用5 mL的磷酸缓冲液提取一次，上清液并入 容量瓶中，定容至刻度，贮藏于冰箱备用。 d. 取光径1 cm的比色皿两只，于一只中加入反应混合液2 mL和 磷酸缓冲液1 mL，作为校对，另一只加入反应混合液2 mL，上 述酶液1 mL，立即开启秒表记录时间，于分光光度计上在波长 为470 nm下测量吸光度值，每隔0.5 min(30 s)读数一次，连 续读数三次。
以每分钟内A470处变化0.01为一个过氧化物 酶活性单位（U）。 则过氧化物酶活性可根据下式计算： Δ OD=Δ A470 ×Vs /W ×Vo ×0.01 ×t 式子中： Δ OD为过氧化物酶活性； Δ A470为470 nm处反应溶液的吸光度变化 值; W为植物鲜重（g）； t为反应时间（min）； Vs为提取酶液总体积（mL）； Vo为测定时取用酶液体积（mL）。
盐角草 小麦 12 10 8 6 4 2 0 0 50 100 150 200 300 400 NaCl 浓度（mmol/L）
POD 活性（Δ OD470/g.min）
3.3盐胁迫第7天与第14天盐角草体内POD活性
第7天 第14天 12 10 8 6 4 2 0 0 50 100 150 200 300 400 NaCl 浓度（mmol/L）
3. 对盐角草在盐胁迫第7天与第14天时其体内 POD活性进行对比，由实验结果可以推断：随 着盐浓度的增加和盐胁迫时间的延长，盐角草 体内的POD活性呈现先下降后上升再缓慢降低 的趋势，原因可能在于POD活性对盐胁迫的响 应比较敏感，盐胁迫强度过大时，蛋白质合成 可能受到严重抑制，酶失活加剧等原因而使酶 活性下降，然而盐角草却生长良好。由此推断 ，盐角草的耐盐性可能不仅受其体内POD活性 的影响，还可能受到其他生理指标的影响。
二、实验内容和方法
2.1 实验内容： 实验以不同浓度盐胁迫下的盐角草与小麦为 实验材料，采用愈创木酚比色法对各材料进行 POD活性测定，分别比较盐胁迫第7天与第14 天盐角草与小麦体内POD活性变化。
2.2 实验方法：
2.2.1愈创木酚比色法 在有过氧化氢存在的条件下，过氧化物酶 能使愈创木酚氧化，并生成茶褐色物质，这 种茶褐色物质在470 nm处有最大吸光值， 故可通过测470 nm下的吸光度变化测定过 氧化物酶的活性，以每分钟内470nm处吸光 度变化0.01为一个酶活性单位，即可求出该 酶的活性。
POD 活性（Δ 470/g.min）
四、结论 1. 在盐胁迫第7天时，通过实验，运用愈创木酚比
色法原理，得出在盐胁迫过程中，盐角草生长情 况较好，随着盐浓度的增加，其POD活性缓慢 降低，不过盐角草生长情况良好，且优于小麦。
2. 在盐胁迫第14天时，通过实验，运用愈创木酚比
色法原理，得出在盐胁迫过程中，随着时间的增 加，盐角草和小麦体内 POD 活性一直缓慢降低， 但盐角草体内的 POD活性均高于同组的小麦体内 的POD活性，盐角草生长情况较为良好，小麦则 出现一定程度的萎蔫，表明POD活性高，使得盐 角草耐盐性强于小麦。