药物分析课程第10章B甾体激素类药物分析课件

药物分析课程第10章B甾体激素类药物分析
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D. 碱的种类及加入顺序
以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序：
皮质激素溶液 四氮唑盐 碱试液
E. 温度与时间
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3. Kober反应比色法 雌激素
（1）原理
雌激素
HSO -乙醇
△
黄色
HO
△
桃红
λmax=465
λmax=515
加快黄色产物的形成、转化
加强红色产物的稳定性
* 酚的作用
加快红色产物的形成
消除反应B甾体激素类药物分析
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练习与思考
[A型题]
1. 醋酸地塞米松的鉴别方法是 A.三氯化铁反应 B. 水解反应 C. 柯柏反应 D.与碱性酒石酸铜试液反应 E. 双缩脲反应 2. 丙酸睾酮《中国药典》规定的含量测定方法为 A.非水溶液滴定法 B.溴酸钾法 C.HPLC法 D.紫外分光法 E.旋光法
μl(≈7.9mg)与丙酮100μl(≈79mg)置
100ml量瓶中，精密加内标溶液20ml，
加水至刻度，作为对照液。照气相色谱
法测定，含丙酮不得过5.0%，并不得
出现甲醇峰。
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（二）游离磷酸盐的检查 对照品比色法
地塞米松磷酸钠
供试液+钼酸铵+1-氨基-2-萘酚-4-磺酸 钼蓝：740nm
（三）有机溶剂残留量的检查
以地塞米松磷酸钠为例 GC法
甲醇 不得出峰 （灵敏度法） 检测限= 3.1ng
丙酮 ≤5.0%
内标法 + 校正因子
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地塞米松磷酸钠 检查 甲醇和丙酮
精密称取本品0.16g，置10ml量瓶
中，精密加内标溶液2ml，加水稀释至
刻度，作为供试液；另精密量取甲醇10
红四氮唑（RT）
2e
[H]
C
三苯甲瓒↓深红
NN
m a 4x 8 ~ 40n 90 m N N H 药物分析课程第10章B甾体激素类药物分析
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C NN
N
N C
+
l-
C NN
N C
+
l-
N
OCH3
OCH3
蓝四氮唑 （BT）
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（2）方法 对照品法
供试液 TTC 对照液
氢氧化四甲基铵
暗
A
℃
40～45′
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（3）讨论 A. 基团对反应速度的影响
C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯
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B. 溶剂、水分的影响
以无醛乙醇为溶剂
C. O2与光线的影响
避光 隔绝空气、快速、充N2
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[X型题]
1. 用HPLC法测定的药物有
A. 醋酸地塞米松
异烟肼浓度0.00365mol/L
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2. 四氮唑比色法
（1）原理
肾上腺皮质激素类 C17 -α－醇酮基 强还原性
四氮唑盐 C7 -a-醇酮基 有色甲瓒
OH -[还原]
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C NN
N
N C
+
l-
氯化三苯四氮唑 （TTC）
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雌二醇-3-甲醚
O H H SO C H 3
CH3O CH3O
CH3O CH3
λmax=465
HO HSO
λ =515 药物分析课程第10章B甾体激素类药物分析
max
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铁－酚试剂 Iron-phenol Reagent
[(NH4)2Fe(SO4)2 + H2SO4 + H2O2 + 苯酚] * 铁盐的作用
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（二）UV法
△４-3-酮 240nm（±）
肾上腺皮质激素
雄性激素和蛋白同化激素
苯环
孕激素、口服避孕药 280nm（±）
雌激素
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示例：醋酸地塞米松片的含量测定 （1）配制供试液 （2）测定：240nm （3）计算
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对照液：同上
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（对照液 0.0035%KH2PO4）
HPO KHPO
.. %
L
%
.
.%
返回
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四、含量测定
（一）HPLC法 USP、BP、JP均采用
RP－HPLC（大多内标法）
（甾体激素类药物常含有结构相似的其他 甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法 有干扰）
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C.水分、温度、O2与光线的影 响 含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓
不挥发溶剂、不吸收水分时→ O2与光线无影响
t℃ ↑ → ν↑
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D. 酸的种类和浓度及异烟肼的浓度 酸:异烟肼 = 2:1
盐酸浓度0.0074mol/L 最大A
异烟肼
A ℃
暗45′
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（3）讨论 A. 反应速度（反应专属性）
C3= O ＞ C17= O 、 C20= O C11= O 不反应
反应专属性 C3－酮基
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B. 溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇
无水甲醇 无水乙醇
测定对象： 甾体激素类药物的原料和制剂。
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示例：黄体酮的含量测定 色谱条件：固定相 ODS，流动相 甲醇-水
（65:35），检测波长254nm， 内标物 己烯雌酚 系统适用性试验：n > 1000，R符合规定。
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测定样品：黄体酮原料、注射液。 定量方法：内标法
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（三）比色法
1. 异烟肼比色法
C3－酮基
肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同
化激素、孕激素
（1） 原理
C - 酮基
异烟肼 异烟腙（黄）
HCl
（缩合）
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OH
CONHN
N
异烟腙（黄色）
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（2）方法 对照品法
供试液 挥去乙醇 对照液 CHCl
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[B型题]
A.亚消基铁氰化钠反应 B. Vitali反应
C. Kedde反应 D. 绿奎宁(thalleiaqllin)反应
E. 碱试酒石酸铜试液的反应
1. 黄体酮
A
2. 醋酸地塞米松 E
3. 地高辛
C
4. 硫酸奎宁
D
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