感染性疾病实验诊断ppt课件

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道菌群和口咽部菌群是最重要的内源性感染源。
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三、感染类型
1、按病原体分类:可分为细菌、病毒和真菌; 2、按病原体来源分类:可分为内源性感染和外源
性感染; 3、按疾病特征分类:A.隐性感染(亚临床感染)、
B.潜伏感染、C.显性感染(包括急性感染、慢性 感染、局部感染、全身感染)、带菌状态、不感 染。
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第三节 系统感染的实验诊断
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一、血流感染
血流感染的定义: 病原生物通过各种途径进入血流,并通过
血流 造成全身播散,引起各种临床症状。 血流感染常见的病原菌包括:
G+C如葡萄球菌、链球菌和肠球菌属,G+b如 肠 杆菌科细菌、铜绿假单胞菌和流感嗜血杆菌,白念 珠菌和脆弱杆菌也较常见。 检测项目的选择:
2、所有分离自无菌部位的菌株、重要的耐药株和 流行病学重要的菌株都要保存3—5年;
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四、医院感染
院感的特点: 3、当院感发生率增加而超过该时期的预计值
时就称为爆发,爆发时应当及时进行环境 卫生学检测。
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五、一般实验检测
感染病的实验诊断包括一般实验室检 查和 病原学实验诊断,前者是感染病的首要 检测 项 目,具有初筛的作用 ,常见项目如下:
血培养应注意假阳性和一过性菌血症,对比 前后 分离的菌株有助于判别;
另外,动态监测BG的水平有助于判断疾病的 发 展和预后。
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二、中枢神经系统感染
中枢神经系统感染的定义: 指病原微生物侵犯中枢神经系统实质、被膜
及血 管等引起的急性或慢性炎症性(或非炎症)疾病,如 脑膜炎、病毒性脑炎和脑脓肿。 中枢感染的常见病原体:
感染性疾病实验诊断
珠江医院微生物室
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主要学习内容及要求
掌握: 感染性疾病的常用实验检测项目及其临床
意义和评价;各系统病原体检查的处理步骤; 熟悉:
各系统感染的常见病原体、常见疾病及病 原学检测; 了解:
当今感染病特点与感染类型,常见医院感 染病原体及特点。
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第一节 概述
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一、感染性疾病的定义
毒的检测;
寄生虫检验:痰液镜检对溶组织内阿米巴滋养体、
卫氏并殖吸虫、粪类圆线虫幼虫、蛔蚴、钩蚴等检
出有一定的意义。
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呼吸系统感染检查的临床应用
痰涂片抗酸染色:对结核分枝杆菌有诊断意义; 痰中有颗粒状、菌块和干酪样物质:对放线菌病和 曲霉菌有诊断意义; 检测出肺炎支原体、军团菌、双相型真菌、结核分 枝杆菌:可认为是肺部感染的病原体; 检出与正常菌相同的菌:涂片有大量中性粒细胞, 培养后涂片镜检也为优势菌则由诊断意义; 有感染症状、脓臭痰但普通细菌培养为阴性:提示 厌氧菌感染。
血常规+CRP+血精培品课养件 鉴定
血流感染的标本采集和运送
血液标本:尽量在抗菌药物使用前采集,发热寒战 者在寒战或体温高峰前0.5—1h采集,也可以在寒 战发热1h后采集;一般24h内周期性地收集2—3次血 标本培养。 中心静脉导管标本:剪下5cm导管尖端或近心端,及 时送到细菌室进行半定量平板滚动培养或定量培养
病原体
方法
评价
细菌
真菌 病毒
选择合适的培养基培养,然后根据菌 病原体的分
落性状和细菌的形态染色性作出初诊,离和鉴定是
最后可用自动化鉴定系统鉴定
细菌、真菌
接种于沙氏或脑心琼脂,根据真菌的
和病毒感染 性疾病诊断
菌落性状及菌丝孢子形态鉴定到种 的金标准
将标本接种于体外培养细胞、易感动
物或鸡胚,然后根据动物的发病情况
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第二节 感染性疾病的病原检 测
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一、标本采集和运输
正确选择、采集与运输标本是病原学实 验 诊断的第一步,留取标本的质量关系到实验诊 断的结果正确与否。
错误的检验结果主要是发生在检验前,所 以对不合格的标本要拒收并及时和临床沟通!
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二、病原检测的方法
根据对与病原体相关的不同成分的检 测, 可以分为以下几种检测方法:
菌)、疟疾、病毒感染; C.嗜酸性粒细胞:寄生虫病; D.单核细胞增多:亚急性心内膜炎、疟疾; E.淋巴细胞增多:病毒感染、某些杆(如
百日咳鲍特菌、结核杆菌、布氏杆菌)。 精品课件
五、一般实验检测
4.器官功能改变的检测:不同系统感染导致 检测其器官功能改变的项目不一,如诊断中 枢神经系统感染的还需做脑脊液常规检测。
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中枢感染检查临床应用
1、脑脊液分离培养阳性:可确诊中枢神经系统感染。 抗酸染色查见抗酸杆菌,革兰染色查见阴性双球菌 ,墨汁染色查见透亮菌体和宽厚荚膜均可报告。 2、血清学有助于诊断,但要区分假阳性和假阴性; 3、PCR对肠道病毒引起的病毒性脑膜炎很有意义;
4、病毒性脑炎确诊有赖于脑活检病理发现细胞内包 涵体、病毒核酸或脑脊液检测病毒抗原或抗体。
脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌 、新 生隐球菌、乙型脑炎病毒、单词疱疹病毒等; 检测项目选择:
血常规+CRP+脑脊精品课液件 生化项目+病原学检测(
中枢感染的细菌和真菌检验程序
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中枢系统病毒和寄生虫检测程序
病毒检测程序:以血清学试验、核酸分子杂交 及核酸扩增技术为主;
寄生虫检测程序:取脑脊液沉渣涂片镜检,对阿米巴 滋养体、弓形虫、疟原虫、广州管圆线虫幼虫有诊断 意义。
呼吸系统细菌、真菌检验程序
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呼吸系统病毒和寄生虫检验
病毒检验:主要采用病毒培养、免疫学和分子生物
学检测方法。在流感季节,应对免疫力正常成人进
行流感病毒的检测;免疫力有缺陷的成人,应采用
细胞培养和分子生物学方法检测;小于2岁的婴幼儿
应进行呼吸道合胞病毒的检测;小于10的儿童应进
行流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病
胃肠道标本采集和运送
应取脓血或粘液粪便置于清洁容器中尽快送 检 (不能超过2h),然后接种于选择培养基上;
对于传染性腹泻患者需3次送检粪便进行培 养;
疑为寄生虫感染者,要尽快运送水样便以保 持 原虫滋养体活力,若不能及时送检,应用含10%甲 醛和聚乙烯醇的小螺口塑料容器保存。
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胃肠道细菌检验程序
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三、呼吸系统感染
呼吸系统感染:包括急性上呼吸道感染、急性气管 —支气管炎、慢性支气管炎和肺炎。 常见病原体: 急性上呼吸道感染90%由病毒引起, 细菌则以溶血性链球菌多见;肺炎80%由细菌引起 ,以肺炎链球菌、金葡、肺炎克雷伯菌、流感嗜血 杆菌、肺炎支原体和肺炎衣原体多见。 检测项目选择:血常规+CRP+痰培养鉴定+免疫学 及核酸检测
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呼吸道标本采集和运送
呼吸道的标本包括鼻咽拭子、痰、通过气管 收 集的标本(气管内吸出物、气管镜采集法),后者是 理想标本。
对于合格的痰标本才接收,当白细胞≤25个 /LP, 鳞状上皮细胞≥10个/LP,应当拒收;
下呼吸道标本中一旦怀疑肺炎支原体、军团 菌、 双相型真菌、结核分支杆菌等即可认为是合格标本而 直接进行病原鉴定。 精品课件
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四、医院感染
医院感染的定义: 指来自医院或医疗机构的感染,包括在医院获
得出院后才发生的感染,但不包括入院前已存在的 感染 ,入院时已处于潜伏期的感染。
入院48小时后发生的感染通常认为是医院感染。
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四、医院感染
院感的特点:
1、院感的感染链由感染源、传播途径和易感宿主 构成,细菌是主要病原体,且多为异位菌和耐药 菌;为此,采集时要防止人体定值菌及环境污染 菌对标本的污染;鉴定时要鉴定到种并提供药物 敏感性试验结果;
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血流感染的细菌检验程序
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血流感染的真菌检验程序
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血流感染的寄生虫检验
采血制作血涂片、固定与姬氏或瑞氏 染色 可镜检找红内期阶段的疟原虫;对丝虫病、弓 形虫病和锥虫病的诊断也有价值。
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血流感染检查的临床应用
血培养阳性:可确诊血流感染,要及时涂片、革兰 染色和镜检,报告到临床并分离培养鉴定到种; 血培养阴性:血培养5d后仍未报阳,可报告“培养5 天,未见细菌生长”
又称感染病,是由微生物(细菌、病 毒、 真菌)和寄生虫感染人体后机体组织细胞受到 不同程度的损害并出现一系列的临床症状和体 征。其中,有传染性的感染性疾病称为传染病。
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二、感染病特点
1、微生物变异所出现的新亚型、亚性、不典型株 及耐药株已成为当今主要的病原体;
2、感染患者多因免疫防御能力的下降感染; 3、内源性感染与条件致病菌的感染增加,其中肠
可观察病原体的生长、运 动方式、螺旋体形态和运 动
可以根据包涵体的特点, 初步怀疑病毒或衣原体感 染
可以用来观察病毒颗粒
简便快速、能提供初步诊 断,对无菌体液尤其有诊 断价值,应用很广泛 对螺旋体、梅毒、真菌的 诊断比较有意义
多数病毒在组织细胞呈非 特异性,难以判断种属
临床上不常用
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2、病原体分离培养和鉴定
隐球菌抗原检测可作 为确诊依据,其它的 不可以
肝炎病毒抗原、AIDS的p24抗原、 有助于病毒的早期诊
轮状病毒抗原、CMVpp65抗原、呼 断,但需注意交叉反
吸道病毒抗原

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4、病原体抗体检测
用已知抗原,借助ELISA、凝集试验、胶体 金
标记EIቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ等技术检测病原体的抗体
病原体
常用方法
评价
细菌 病毒 真菌
常用方法有凝集试验(肥达试验、 特异性免疫学实验很有
外斐试验等)、胶体金标志试验、 诊断价值,但其特异性
ELISA、间接免疫实验
不能等同病原菌检出
ELISA应用最广泛,适用于大多数 可用来检测急慢性病毒
病毒,此外还有中和试验、补体结 感染,同时检测双份血
合试验、免疫印迹法等;
清或lgM抗体较有意义
可用ID、CF、LA、EIA等检测曲霉、有初筛意义,但敏感性 新型隐球菌、念珠菌等,但免疫低 和特异性均不高 下患者检测往往无价值;
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胃肠道病毒和寄生虫检验
病毒检验:主要采用ELISA或乳交凝集试验检测病 毒抗原、用核酸杂交、PCR和RT—PRC法检测病毒 核酸;血清学多用于流行病学调查。 寄生虫检验:通过检测粪便中寄生虫的虫卵、幼虫 、滋养体等对寄生虫感染进行诊断。
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胃肠道感染检查的临床应用
粪便的直接镜检意义不大,胃肠道感染的诊 断 有赖于细菌分离与培养;
或鸡胚中形成的特殊病灶作出初诊,
最后用血清学鉴定
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3、病原体抗原检测
用已知抗体,借助金标免疫、荧光免疫、酶 免
疫等技术检测未知的病原体抗原;
病原体
主要用途
评价
细菌 真菌 病毒
脑脊液脑膜炎奈瑟菌、痰液中结核 杆菌、衣原体、幽门螺旋杆菌等抗 原
在无菌或很少其他微 生物的标本中较有意 义
G实验、隐球菌和曲霉抗原的检测
1、C—反应蛋白:鉴别诊断细菌或病毒感 染的首选指标,还可判断抗生素疗效和预后;
2、前降钙素原:PCT的升高程度与感染严 重度及预后相关,在全身性细菌感染和脓血症
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五、一般实验检测
3、白细胞常规检查: A.白细胞上升:急性细菌感染(如G+C)、
某些病毒感染(如传单); B.白细胞下降:G+b(如伤寒、副伤寒沙门
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四、胃肠系统感染
胃肠道感染:是以呕吐、腹痛、腹泻为临床特征的 常见感染病,有食物中毒、霍乱、伤寒、细菌性痢 疾、结肠炎、胃炎与抗生素相关性腹泻等。 常见病原菌:A.侵袭性细菌:沙门菌、志贺菌(A 群)、空场弯曲菌、大肠埃希菌(EPEC、EIEC) 、幽门螺杆菌等;B.细菌毒素性细菌:霍乱弧菌、 志贺菌(B、C、D群),大肠埃希菌(ETEC、 EHEC、EAggEC)等;C.病毒:轮状病毒、杯状 病毒等;D.真菌:白念珠菌、曲霉等。 检测项目选择:血常规+免疫学+PCR/RT—PCR+病 原体的分离培养鉴定 精品课件
直接显微镜检测 病原体分离培养和鉴定 病原体抗原检测 病原体抗体检测 病原体核酸检测 细菌毒素的检测
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1、直接显微镜检查
包括以下四种方式:
检测方法 主要用途
方法评价
涂片染色显 微镜检查
涂片不染色 显微镜检查
组织细胞形 态学检查
复染标本电 镜观察和免 疫电镜技术
可以观察细菌、真菌的形 态、染色性、排列和特殊 结构,也可检查寄生虫
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5、病原体核酸检测
病原体核酸检测技术主要有PCR、实时 荧 光定量PCR和DNA探针杂交技术;
评价:具有很高的敏感性,可用来判 断病 毒的活动性感染,细菌的鉴定、耐药基因检测 和细菌分子流行病学调查,但容易造成假阳性 或假阴性。
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6、细菌毒素检测
内毒素检测:鲎实验是目前内毒素检测最敏 感、最常用的方法,有助于判断细菌感染的 严重程度; 外毒素检测:免疫法是检测细菌外毒素最常 用的方法,可用来检测艰难梭菌毒素A或B、 大肠埃希菌Vero细胞毒素、金葡的肠毒素, 对抗生素相关性肠炎很有意义。
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