HPLC 法同时测定异烟肼片中异烟肼及杂质异烟酸的含量

China Pharmacy 2010V ol.21No.1

中国药房

2010年第21卷第1期

异烟肼（4-吡啶甲酰肼）对结核菌有抑制和杀灭作用，是目前临床治疗结核病的一线治疗药物，异烟肼原料及其制剂在历版《中国药典》中均有收载，其含量测定采用溴酸钾滴定法[1]，但该法的测定结果易受反应温度、时间及酸度等条件影响[2]。现有报道采用高效液相色谱（HPLC ）法测定多种制剂[3～5]以及体液[6]中异烟肼的含量，操作简便，快速准确，结果重现性好。而笔者在使用该法测定异烟肼含量时发现，异烟肼色谱峰前总有一杂质峰无法与之完全分离，但通过在流动相中加入表面活性剂多库酯钠，最终使异烟肼峰与杂质峰得到良好的分离，并鉴定该杂质为异烟酸。笔者将在本文中介绍此方法，并认为此方法操作简便、快速、准确，可用于该制剂的含量测定。

1仪器与试药

LC -2010A HPLC 仪，包括LCsolution 工作站、自动进样器、紫外检测器等（日本岛津公司）；AL 204电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；DHG -9245A 型电热恒温鼓风干燥箱（中国上海一恒科技有限公司）。

异烟肼对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100578-200401，纯度：99.68%）；异烟酸对照品（批号：080424，纯度：99.4%）、异烟肼片（批号：071205、080412、080309，规格：每片0.1g ）均由山西太原药业有限责任公司提供；甲醇为色谱纯，多库酯钠为分析纯，水为重蒸馏水。

2

方法与结果

2.1

色谱条件

色谱柱：SHIM -PACK VP -ODS C 18（150mm×4.6mm ，5

μm ）；流动相：甲醇-水（含0.2%多库酯钠，40∶60）；流速：0.8

mL ·min －1

；检测波长：261nm ；进样量：5μL 。精密称取异烟酸对照品和异烟肼对照品各约20mg ，置于100mL 容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀成混合对照品溶液，再取“2.2”项下3种溶液，取上述4种溶液注入HPLC 仪，色谱详见图1。

由图1可知，在该色谱条件下，异烟肼保留时间约为3.7min ，理论塔板数为7934.4；异烟酸保留时间约为2.4min ，理论塔板数为4704.3；异烟肼与异烟酸分离度为8.7，分离效果良好，空白辅料对测定无干扰。

HPLC 法同时测定异烟肼片中异烟肼及杂质异烟酸的含量

苑广信＊，张丽华，孙晶波，李洪宇（北华大学药学院，吉林市132013）

中图分类号

R 978.3；R 927.2

文献标识码

A

文章编号

1001-0408（2010）01-0076-02

摘要目的：建立以高效液相色谱法测定异烟肼片中异烟肼及杂质异烟酸含量的方法。方法：色谱柱为SHIM -PACK VP -ODS C 18，流动相为甲醇-水（含0.2%多库酯钠，40∶60），检测波长为261nm ，流速为0.8mL ·min －1，进样量为5μL 。结果：异烟酸

与异烟肼色谱峰达到有效分离，异烟肼、异烟酸检测浓度的线性范围分别为10～1000（r ＝0.9998）、2～24μg ·mL －1

（r ＝0.9994），平均加样回收率分别为99.57%、98.96%，RSD 分别为0.26%、0.96%，定量限分别为0.05、0.16μg ·mL －1。结论：本方法操作简便、快速、准确，可用于该制剂的含量测定。关键词高效液相色谱法；异烟肼片；异烟酸；含量测定

1

35

7min

A

1

35

7min

B 1

1

1357min C

1357min

D

2

1

图1高效液相色谱图

A.对照品；

B.供试品；

C.空白辅料；

D.混合对照品；1.异烟肼；2.异烟酸

Fig 1HPLC chromatography

A.control substance ；

B.sample ；

C.blank excipients ；

D.control mix-ture ；1.isoniazid ；2.isonicotinic acid

2

＊助教，硕士。研究方向：药品检验。电话：0432-*******

Simultaneous Determination of Isoniazid and Isonicotinic Acid in Isoniazid Tablets by HPLC YUAN Guang-xin ，ZHANG Li-hua ，SUN Jing-bo ，LI Hong-yu （Pharmaceutical College of Beihua University ，Jilin 132013，China ）

ABSTRACT OBJECTIVE ：To establish an HPLC method for content determination of isoniazid and isonicotinic acid in isoniazid tablets.METHODS ：The determination was performed on SHIM -PACK VP -ODS C 18column.The mobile phase consisted of meth-anol -water （0.2%docusate sodium ，40∶60）at a flow rate of 0.8mL ·min －1.The UV detection wavelength was set at 261nm and the sample size was 5μL.RESULTS ：The linear range was 10～1000μg ·mL －1for isoniazid （r ＝0.9998）with average recovery of 99.57%（RSD ＝0.26%）and 2～24μg ·mL －1for isonicotinic acid （r ＝0.9994）with average recovery of 98.96%（RSD ＝0.96%）.

The limited quantities were 0.05μg ·mL －1，0.16μg ·mL －1

，respectively.CONCLUSION ：The established method is simple ，rapid and accurate ，and suitable for content determination of isoniazid tablets.

KEY WORDS HPLC ；Isoniazid tablets ；Isonicotinic acid ；Content determination ··76