头孢噻呋对照品的研制

头孢噻呋对照品的研制

张秀英王小慈陆连寿王在时

(中国兽医药品监察所，北京100081)

[摘要]本文按照国家对照品的研制原则，进行了头孢噻呋国家对照品的研制。通过稳定性研究，确定了选用盐酸头孢噻呋作为对照品原料，然后对所选取原料用元素分析、红外分光光度法和液相色谱法确证了头孢噻呋的结构。用液相色谱法测定纯度为96.8%，含量赋值为87.5%。

[关键词]头孢噻呋结构确证纯度含量

Reparation of Ceftiofur Reference Standards

ZHANG xiu-ying,WANG xiao-ci,LU lian-shou,WANG zai-shi

(China Institute of Veterinary Drug Control,Beijing 100081;China) Abstract:According to guide lines for the establishment of national chenmical reference standards,we study and repare ceftiofu reference standards.We select the Ceftiofur hydrochloride as material resouce of reference standards by studying of stablity.Then confirm chemical structure by element analysis, IR and HPLC. The purity and assigned content is 96.8% by HPLC.

Key words: Ceftiofur hydrochloride；confirm chemical structure；purity；content

头孢噻呋是第三代动物专用头孢类抗生素，是由Bernard Labeeuw和Moutpollier等人于1984年合成。目前在我国注册的国外生产商有美国辉瑞公司（原美国普强公司）和韩国LG 公司。2004年起，国内多家企业也纷纷仿制生产该药并已获准上市。但由于国际和国家头孢噻呋对照品，我国的生产企业由于只能用sigma公司的头孢噻呋试剂作为对照品来控制产品的质量，由于试剂的测定方法和含量的赋值在精确度上都有很大的误差，引起产品的含量与实际值相差较大，由此可见对照品在有效地控制产品的质量中起着关键的作用。

1 仪器与材料

1.1 仪器waters 2695高效液相色谱仪，2487紫外检测器；GR202电子分析天平，精度0.01mg；元素分析仪；BrukerTensor27型傅立叶变换红外分光光度计；787 KF Titrino卡项目：生物化学计量标准资源整合与共享体系建设项目资助

作者简介：张秀英（1972年～），女，副研究员，从事标准物质研究。E-mail:zhangxiuying@

氏水分测定仪；DHG-9240 A型电热恒温鼓风干燥箱；CWF11/5型高温炉；YMC 250×4.6mm 色谱柱。

1.2 试药对照品原料（盐酸头孢噻呋精制原料），由山东齐鲁药厂提供；头孢噻呋钠原料来自其他生产企业；头孢噻呋试剂(批号：80370-57-6，公司提供纯度：99.5%)，购自sigma-aldrich公司；原研发企业头孢噻呋工作对照品，由辉瑞公司提供。乙腈、三氟乙酸均为色谱纯；水为超纯水；醋酸铵，冰醋酸，四丁基氢氧化铵，四氢呋喃为分析纯。

2 方法

2.1 原料筛选稳定性研究按农业部颁布的“原料药稳定性试验技术规范”【1】要求进行加速试验，用高效液相色谱法[2]测定有关物质含量的变化。

2.1.1 色谱条件流动相A：水－乙腈－三氟醋酸（950:50:1）；流动相B：水－乙腈－三氟醋酸（200:800:1），梯度洗脱程序如下：

检测波长为254nm。

2.1.2供试液制备取供试品，用流动相稀释制成每1ml中含头孢噻呋0.3mg的溶液，进样量20µl。按峰面积归一化法计算杂质总含量。

2.2 结构确证

2.2.1元素分析委托中国科学院化学研究所进行元素分析。

2.2.2 红外光谱测定用kBr压片法进行红外光谱分析[3]。

2.2.3 高效液相色谱测定[4]

2.2.

3.1 液相色谱条件以醋酸铵溶液（取醋酸铵3.85g，加10%四丁基氢氧化铵13.5ml，加水至700ml，用冰醋酸调节pH值至6.6～6.8）－甲醇－四氢呋喃（700:200:110）为流动相；检测波长为254nm。

2.2.

3.2 供试液制备取本品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释至每1ml中约含头孢噻呋0.1mg的溶液，立即精密量取20µl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取辉瑞公司提供的原始基准物质，同法测定。

2.3 纯度测定采用3种高效液相色谱法，均按峰面积归一化法计算杂质总含量

2.3.1 方法1同稳定性试验方法。

2.3.2 方法2同2.2.3结构确证方法，制备5份供试品溶液，每份溶液进针2次。

2.3.3 方法3采用sigma-aldrich公司提供的头孢噻呋试剂的纯度测定方法(HPLC法)。

2.3.3.1 液相色谱条件流动相为乙腈-水-磷酸(80:20:0.04)，检测波长为250nm。

2.3.3.2 供试液制备取供试品，用流动相稀释制成每1ml中含头孢噻呋0.3mg的溶液，进样量为20µl。

2.4 对照品原料的质量检验和标定

2.4.1干燥失重按《中国兽药典》干燥失重方法，105℃干燥至恒重[3]。

2.4.2 炽灼残渣按《中国兽药典》炽灼残渣方法测定[3]。

2.4.3 含量测定和赋值高效液相色谱法见2.2.3

3 测定结果

3.1 稳定性试验结果见表1