富血小板血浆(PRP)常温保存前后PDGF
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富血小板血浆(PRP)常温保存前后PDGF 【摘要】目的:测定富血小板血浆(prp)常温保存前后pdgf-ab、tgf-β1含量变化,评价其促进组织修复能力。
方法:白膜回浆法制备prp,双抗体夹心abc-elisa法检测静脉血、prp保存前后(激活状态下)pdgf-ab和tgf-β1含量,数据结果应用spss 12.5软件处理分析。
结果:静脉血、prp保存前后pdgf-ab浓度(pg/ml)分别为:1.69±0.36、56.12±11.72、58.17±12.1。
tgf-β1 浓度(pg/ml)分别为:56.19±14.55、331.12±64.94、365.55±73.13。
静脉血制备prp后,pdgf-ab、tgf-β1含量明显升高。
sprp组与fprp组比较,pdgf-ab浓度无显著性差异(p>0.05)、tgf-β1浓度有显著性差异(p0.05)。
2.2 静脉血血清、fprp血清、sprp血清pdgf-ab、tgf-β1含量检测结果
如表2所示,静脉血制备prp后,pdgf-ab、tgf-β1含量明显升高。
sprp组与fprp组比较,pdgf-ab浓度无显著性差异(p>0.05)、tgf-β1浓度有显著性差异(p作为高浓度具有积极促进组织修复与再生能力的生长因子来源,prp技术在口腔医学中极具应用发展前景。
随着基础研究和临床应用的不断深入,prp的需求量会越来越多,只靠临时分离血小板不能满足临床需要,探寻有效的贮存方式是解决问题的根本途径之一。
目前,国内外学者对prp保存的研究主要集中在保存后血小板形态学、体外聚集功能指标及输注后临床止、凝血功能的改变等方
面。
从口腔临床医学角度,prp技术主要是利用其富含高浓度蛋白生长因子,促进组织修复与重建。
prp含有的可释放于局部的生长因子量是评价其促进组织修复能力的重要指标。
然而,保存对prp 中促进组织再生有效成份的各种生长因子含量影响的研究尚未见
报道,是否还具有高度的促进组织修复再生能力尚待进一步研究。
本项实验参照临床上应用prp的方法,激活血小板释放生长因子进入血清进行定量分析,能更准确地反映prp应用于局部时周围组织初期可获得的生长因子量。
实验采用双抗体夹心abc-elisa法测定静脉血血清、fprp血清、sprp血清pdgf-ab、tgf-β1浓度。
fprp与静脉血相比pdgf-ab的含量增加了36.94±12.44倍,tgf-β1的含量增加了6.59±2.03倍。
sprp组与fprp组比较,pdgf-ab含量无显著性差异(p>0.05),tgf-β1含量有显著性差异(p<0.05),保存后比保存前增加了大约10.68%。
结果与wadhwa[4]等研究浓缩血小板血浆保存5天至7天tgf-β1水平升高10~30%相近。
fprp中pdgf-ab、tgf-β1的含量随着prp中血小板浓度的增加而增加。
实验结果显示20~24℃持续温和振荡保存三天没有造成pdgf-ab、tgf-β1含量降低。
原因可能为制备及保存过程造成血小板激活或损伤释放的生长因子仍具
有生物活性,且血小板存在多种的激活方式,20~24℃持续温和振荡激活了部分凝血酶无法激活的血小板,其具体原因尚待进一步研究证实。
prp保存后其它生长因子浓度的变化及促进局部创伤修复再生能力的相关机制尚有待进一步深入研究。
参考文献:
[1] 张长青,袁霆,曾炳芳,等.富血小板血浆促进骨缺损修复的实验研究.中国修复重建外科杂志,2003,17(5):355-358.
[2] marx re,carlson er,eichstaedt rm,et al. platelet-rich plasma growth factor enhancement for bone grafts. oral surg oral med oral pathol oral radiol,1998,85(6):638-646.
[3] weibrich g,kleis wk,hafner g. growth factor levels in the platelet-rich plasma produced by differet methods:curasan-type prp kit versus pccs prp system[j]. int oral maxillofac implants,2002,17:184-190.
[4] wadhwa m,seghatchian mj,dilger p. cytokines in wbc-reduced apheresis pcs during storage: a comparison of two wbc-reduction methods. transfusion,2000,40(9):1118-1126.。