酸性染料比色法测定硫酸阿托品片的含量

实验十酸性染料比色法测定硫酸阿托品片的含量

一、实验目的：

1.掌握酸性染料比色法的基本原理。

2.掌握酸性染料比色法的操作。

二、仪器与试药

1.仪器

Mettler AL204电子天平 752型紫外－可见分光光度仪

分液漏斗规格：125mL 容量瓶规格：25mL、50mL 、100mL

刻度移液管规格：5mL、10mL 滤纸规格：直径10cm

研钵

2.试药

硫酸阿托品片规格：0.3mg/片

硫酸阿托品对照品溴甲酚绿邻苯二甲酸氢钾氢氧化钠二氯甲烷蒸馏水

三、实验原理：

硫酸阿托品属托烷生物碱类药物，含有碱性N原子，在适宜pH条件下，硫酸阿托品可生成阳离子，而酸性染料则解离成阴离子，生物碱阳离子与酸性染料阴离子生成有色离子对，用二氯甲烷将离子对提取出来进行比色测定。

在适宜pH条件下

四、实验内容

硫酸阿托品片

Liusuan Atuopin Pian

Atropine Sulfate Tablets

本品含硫酸阿托品[（C17H23NO3）2•H2SO4•H2O]应为标示量的90.0%～110.0%。

[含量测定] 对照品溶液的制备精密称取120℃干燥至恒重的硫酸阿托品对照品25mg，置25mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置100mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL中含无水硫酸阿托品50μg）。

供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸阿托品2.5mg），置50mL容量瓶中，加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释至刻度，用干燥的滤纸过滤，收集续滤液，即得。

测定方法精密量取对照品溶液和供试品溶液各2mL，分别置预先精密加入二氯甲烷10mL的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液（取溴甲酚绿50mg与邻苯二甲酸氢钾1.021g，加0.2mol/L氢氧化钠液6mL使溶解，再加水稀释至100mL，摇匀，必要时过滤）2mL，振摇提取2分钟后，静置使其分层，分取澄清的二氯甲烷液，照分光光度法（见附），在420nm的波长处分别测定吸光度，计算，并将结果与1.027相乘，即得供试品量中含有[（C17H23NO3）2•H2SO4•H2O]的重量。

计算：硫酸阿托品标示量%=C 1.027

100% X

r

A

W D

Ar

W

⨯⨯⨯

⨯

⨯标示量

C r: 硫酸阿托品对照品溶液浓度（μg/ mL）；D:稀释倍数

A x: 供试品溶液吸收度； A r: 对照品溶液吸收度；

W:平均片重（g）； W:供试品片粉取样量（g）。

五、注意事项

1.实验中，应严格控制水相pH并保证离子对化合物能定量提取进入二氯甲烷层，因此，加入二氯甲烷的体积和溴甲酚绿溶液的体积都应该准确。

2.分液漏斗活塞处宜涂甘油淀粉糊作润滑剂，其配制方法是：可溶性淀粉9g，加甘油22g混匀加热至140℃保持30分钟，并不断搅拌至透明，放冷，即得。

3.振摇提取时既要能定量地将离子对化合物提入二氯甲烷层，又要防止乳化和少量水混入二氯甲烷层，因此，需小心充分振摇，并使静置分层后再分取二氯甲烷，同时可在分液漏斗颈部放置少许脱脂棉以吸附二氯甲烷中少量水分。

六、思考题

1.试述酸性染料比色法的原理。

2.酸性染料比色法的主要条件有哪些？

3.校正因子1.027是怎样获得的？

4.哪些试剂加入时必须精密称取或量取？

七、参考文献

1.《中国药典》2010年版二部，735，化学工业出版社。

附：紫外分光光度法

1.仪器的校正和检定

由于温度变化对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。

吸收度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000mL，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，如下表，相对偏差可在±1％以内。

波长/nm 235(最小) 257(最大) 313(最小) 350(最大)

吸收系数124.5 144.0 48.62 106.6 杂散光的检查可按下页表的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中,在规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定。

试剂浓度％(g/mL) 测定用波长(nm) 透光率％

碘化钠 1.00 220 ＜0.8

亚硝酸钠 5.00 340 ＜0.8

2.对溶剂的要求

测定供试品前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即用1cm石英吸收池盛溶剂,以空气为空白(即空白光路中不置任何物质)测定其吸收度。溶剂和吸收池的吸收度，在220～240nm范围内不得超过0.40，在241～250nm范围内不得超过0.20，在251～300nm 范围内不得超过0.10，在300nm以上时不得超过 0.05。

3.测定法

用于含量测定的方法一般有以下几种。

(1) 对照品比较法按各品种项下的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的100％±10％,所用溶剂也应完全一致，在规定的波长测定供试品溶液和对照品溶液的吸收度后，按下式计算供试品中被测溶液的浓度：

C x＝C r(A x/A r)

式中 C x为供试品溶液的浓度； A x为供试品溶液的吸收度；

C r为对照品溶液的浓度； A r为对照品溶液的吸收度。

(2) 吸收系数法按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。

(3) 计算分光光度法采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项下规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，波长的微小变化可能对测定结果造成显著影响，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。