不同品种百合中多糖和皂苷含量的测定

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测 液备 用 。
有药用价值 的活性成分 ; 另外还含有一些磷脂 、 蛋白质和无机 元素等 。本 研究 采 用分 光光 度法 , 多糖 采 用苯 酚 一硫 酸
法, 皂苷 以浓硫酸为显色剂 , 测定不 同品种百合中多糖和皂苷
的含量。 1 材 料 与 方 法
1 1 仪 器 .
源自文库
134 百合多糖样品溶液的配制 ..
1 33 百合皂苷样 品溶液 的配制 ..
精 确称取 6 0℃烘 干 2h
的百合粉末 2g 过 2 ( 0目筛 ) 置具塞锥形瓶 中, , 加入 8 % 乙 0 醇 3 L超声提取 2次, 0m 每次 3 i, 0mn 过滤 。滤液 回收乙醇后
干燥 肉质 鳞茎 , 肉质鳞 茎的鳞片营养丰 富, 其 性味甘寒 , 具有
止咳化痰 、 阴 清肺 、 养 清心 安神 、 抗疲 劳 的功 效 。研 究 表 明, 百合主要含有酚酸甘油酯 、 皂苷 、 生物碱及多糖 , 它们都是
得浸 膏 , 适 量 水 溶 解 , 水 饱 和 正 丁 醇萃 取 3次 , 加 用 每次 1 L, 0m 回收正丁醇得浸膏 , 甲醇溶解 , 用 定容成 1 0mL作为待
对照 品溶液 ( .0m / L 1 , 0 1 g m )4mL 加水定容 至 5 L, 0m 精确量
取 2m , 于 1 试 管中 , L置 0mL 另取 2 0m . L蒸馏水 置于 1 0mL 试管 中作为空 白, 4 8n 在 8 m处测定其吸光度 , 结果表 明, 葡萄 糖的平均 回收率为 10 5 % ,S 0 . 2 R D为 24 %。 .7
2 6 重现 性 试 验 .
测定, 再通过计算, 以得到多糖 的量 可 。 。由于苯酚易氧
化, 产生酚类杂质 , 随放置 时间延 长溶液颜色不断加深 , 吸光 度不稳定 , 因此苯酚溶液 宜现配现用 。对 皂苷 的测定采用
浓硫酸显色法 , 甾体皂苷分子与浓硫 酸等强酸反应后 , 因分子
13 方 法 .
2m 蒸馏水同上操作 , 为空 白液。于沸水浴 中恒温 3 i, L 作 0mn
取 出, 冰水浴冷却 1 i , 4 8a 波长处测 其吸光 度。 5m n后 在 8 m
以葡萄糖浓度 ( / L 为横 坐标 , g m ) 吸光 度为纵 坐标 , 绘制标 准曲线 , 回归方程为 : 0 057 0 2 19 r 0 9 92 得 Y= . x+ .2 ,= .9 。 4
2 .9 x一 .2 , = .9 ; 0 8 3 0 136 r 0 99 1葡萄糖 的线 性方程 为 Y= .4 x+ . 2 , =0 9 92 0 0 57 0 2 19 r .9 。该 方法 准确 、 快速 , 重复性 关键词 : 百合 ; 多糖 ; 皂苷 ; 含量测定 ; 光光度法 分
摘要 :采用分光光度法 , 多糖采用苯酚 一硫酸法 , 皂苷 以浓硫 酸为显色剂 , 测定 不同 品种 百合 中多糖和皂苷 的含
量 。结果表 明, 蓣皂苷元浓度 ( 在 1.5~ 3 7 薯 ) O 7 5 .5 好, 适于百合 中多糖和皂苷含量的测定。
m L范 围内与 吸光度 ( ) 良好 的线 性关系 , Y呈 线性方程为 Y=
本试验 中对样品百合的处理 为 , 先提取 皂苷成分后再 提 取多糖成分 , 一份样 品经处理能获得皂苷 和多糖的样品溶液 , 再经显色处理后用分光光度 法检测含量 。此检 测方法简便 , 准确性高 , 能进行大批量百合的皂苷 和多糖含量测定 。
多糖 含量 中, 松叶百合最高 ; 皂苷含量 中, 卷丹含量最高。 药用 百合 ( 百合 、 卷丹 、 山丹 ) 与其他 百合 的多糖 与皂苷 含量 相比没有很大 的差别 。本研 究结果可为百合的质量分析评价
和质量标准制定提供一定参 考。
3 3 样 品 测 定 方 法 .
精确称取多糖样 品 5份 , 每份 2 5mg 分别 加入 葡萄糖 . ,
0 5 9 0 5 80 5 2 R D 为 0 6 % 。 .2 、.3 、 .3 ,S .9
2 5 稳 定 性 试 验 .
精 确量 取 0 0 g m . 2m / L多糖样 品 2 0 m , . L 显色后 0 3 、 、0
6 、2 、8 n 在 4 8n 波长 处测定 吸光 度 , 0 10 10mi, 8 m 结果 分别 为 0 0 20 0 4 0 0 5 0 0 3 0 04, S 为 2 6 % 。结 果 表 .4 、. 、 . 、. 、 . 4 R D 4 4 4 .2 明, 测定的样品溶液在 3h内稳定 。
精确移取葡萄糖和皂苷元 对照 品溶 液 , 照各 自显 色条 按 件操作 , 吸 光 度 。葡 萄 糖 结 果 为 0 3 9 0 3 1 0 3 2 测 .6 、 . 7 、 .7 、 0 3 5 0 3 8 R D 为 0 9 % , 苷 结 果 为 0 5 1 0 5 6 .7 、. 7 , S .5 皂 . 3 、 .3 、
内发生脱水 、 脱羧 、 氧化、 双键 移位及形成多烯碳正离子等原
精确称取同批 百合 样品 4m g各 5份 , 配制供试品溶液在 4 8n 8 m处测定其吸光 度 , 果表 明 , 结 多糖 的平均质 量分 数为 2 9 % ,S .2 R D为 17 %。 .9
因, 使皂苷分子在 20— 0 m范围 内出现一定程度的吸收 , 0 60a
2 2 百 合 皂 苷标 准工 作 曲线 .
13 1 葡 萄糖对照品溶液 的配制 精确称 取 15 o .. 0 C干燥至
恒 重的葡萄糖 2 . g 置 5 5 0 m , 0mL量 瓶 中 , 加适 量蒸 馏水 溶
分别移取对照品溶液 0 2 0 4 0 6 0 8 10 m . 、. 、. ,. 、. L置 于带 塞试 管内 , 挥发干甲醇 , 加入浓 硫酸 4 m ,0 o L 7 C水浴 3 i, 0r n a
苯酚溶液 10m , 匀 , . L 摇 然后加入浓 硫酸 9 0mL摇匀 ; 以 . 另
薯蓣皂苷元对照 品( 中国药 品生物 制品检 定所 , 批号 为
13 2 00 ) 葡萄糖对照品 ; 5 9— 0 0 1 , 甲醇 、 乙醇 、 浓硫酸 、 苯酚均为 分析纯 。百合样品及来 源见表 1 样 品 由宜春学 院周秀 玲副 , 教授鉴定 。
精确称取 薯蓣皂苷
元标准品 2 1 g 置 1 L容量瓶 中, .5m , 0m 甲醇定 容至刻 度 , 密
09 91 薯蓣皂 苷元在 1. 5~ 3 7 . 9 , O 7 5.5
度呈 良好的线性关 系。 2 3 多糖换 算因素的测定 .
m L范 围内与吸光
精确称取真空干燥 的百合多糖 4m , g 用蒸馏水溶解后定
周秀玲等 : 同品种百合 中多糖和皂苷含量 的测定 不 ( ) C为多糖液 中葡萄糖 的质 量浓度 ( / L , 为多糖 mg , g m ) D 的稀释 因素 , 得.=194 1 测 厂 .7 。
2 4 精 密度 试 验 .
一 4 3一 3
表 1 不同品种 百合样 品中多糖和皂苷含量
在强 酸作用下水解生成单糖 , 并迅速脱水 生成糠醛 , 糠醛与酸 性物质缩合成有色化合物 , 这样用分光 光度法在适 当波长处
精确移取 百合皂 苷溶液 0 3m , . L 按照显 色条件操作 , 显
色后 0 3 、0 10 10 mn 测 吸 光度 , 果分 别 为 0 7 7 、0 6 、2 、 8 i, 结 .5 、 07 7 0 7 9 07 4 0 7 3 R D为 1 2 %。结果 表 明, .6 、.6 、.7 、. 8 , S .4 测定 的样品溶液在 3h内稳定 。
渣用无水 乙醇反复洗涤 , 真空干燥 , 即得百合 多糖 。精确称取 百合多糖 4 0m 置 5 L容量瓶中 , . g 0m 加水溶解 , 稀释至刻度 ,
即得多糖样品溶 液。
2 结果 与 分 析
T U一1 1 80紫外可见分光光度计 ( 北京普析通用仪器有限 责任公司) G X一9 7 E数显鼓 风干燥 箱 ( ,Z 0 0MB 上海博 讯实 业有限公司医疗设 备厂 ) C 2 5 , P2 D型分 析天平 ( 北京 赛多利 斯仪器系统有限公 司) S 50 L C型超声波清洗器 ( 海科 ,K 2 0 H 上
冰水浴 1 i , 0m n 终止反应 ; 以浓硫酸为空 白, 4 8nl 在 0 l处测其 l
吸光度 , 绘制标准 曲线 。以薯蓣皂苷 元 的浓 度 ( 对吸光 度 ) () Y 进行线 性 回归 , 性方 程 为 Y=2 . 9 x一 . 2 , = 线 0 8 3 0 136 r
将按照上述条件 8 % 乙 0
醇提取后 的百合 滤渣 , 挥发 干 乙醇 , 加水 3 0mL超声 提取 2 次 , 次 3 i, 滤 , 并 2 次 滤 液 , 缩 至 含 量 为 每 0 mn 过 合 浓
0 5gmL 加无水 乙醇至含 醇量为 8 % , . / 。 0 静置 2 , 滤 , 4h 过 残
常运用这一反应来定量皂苷 的含量 。
3 2 样 品 测 定 结 果 .
精确 称取 同批 百合样 品 6份各 2g按照百合皂苷样 品溶 , 液的配制 方法制备 , 测定吸光度 , 计算 的百合皂苷平均含量为
2 8 23m / ,S .6 g gR D为 12 % 。 .9
2 7 回 收 率 试 验 .
中图分类号 : 2 4 1 R 8 . 文献标志码 : A 文章编号 :0 2—10 (0 1 0 0 3 10 32 2 1 )5— 2—0 4 2
中药百合来源 于百合 ( iu r ni a.v iu m B k Ll m b w ivr id l a— i o r u
e) 卷 丹 ( .acoim T u b ) 山丹 ( . u i m D . 的 r、 L 1nil h n . 和 f u Lpml C ) u
解, 稀释至刻度 。精 密移取 葡 萄糖 溶液 2 0 4 0 6 0 8 0 . 、. 、. 、. 、 1 . L于 5 L容量瓶 中, 0 0m 0m 加蒸馏水至刻度 , 备用 。 13 2 薯 蓣皂苷元对照 品溶 液 的配制 ..
闭备用。
收稿 日期 :0 0—1 21 0—1 3 基金项 目: 江西省宜春市科技计划 ( 编号 :X C 0 9 A 0 ) J Y 20 KN 07 。
容 到 5 L容量瓶 中, 0m 摇匀 , 作为多糖储备液。精确量取多糖
作者简介 : 周秀玲( 9 0 ) 女 , 16 一 , 江西南 昌人 , 副教授 , 主要从事药 用
植物研究 。E—m i z10 8 0 6 .o 。 al x 0 2 @13 cr : 6 n
储备液 2 0mL 按测定标准曲线 同样 的方法测其 吸光 度。按 . , 下 式计 算 换 算 因素 : f=m/( ) 式 中 , 粗 多糖 质 量 ∞ 。 m为

4 2一 3
江苏农业科学
2 1 年第 3 01 9卷第 5期
周秀玲 , 李家敏.不 同品种百合 中多糖和皂苷含量的测定 [ ] J .江苏农业科 学, 1 , ( ) 42— 3 2 13 5 : 0 9 3 43
不 同品种百合 中多糖 和皂苷含量 的测定
周 秀玲 , 李家敏
( 宜春学 院化学与生物工程学院 , 江西宜春 3 60 3 00)
导超声仪器有限公司) H 4数显恒温水浴锅( , H一 常州 国华电
器 公 司 ) 。
1 2 材料 .
2 1 百合 多糖 标 准 工 作 曲 线 .
精确移取含量为 0 0 、 . 、.6、.8 0 1 gmL葡 . 2 0 0 0 0 0 0 、.0 m / 4
萄糖对照品溶液各 2m L置于干燥刻 度试 管 中, 分别加 入 5 %
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