比色法测定黄蜀葵花总黄酮的含量

3　讨论
3.1　本法可有效地测定丹参中原儿茶醛的含量,方法简便、重现性好、准确度高。

3.2　流动相的选择　将甲醇-乙腈-1%冰醋酸(10:2:88)、甲醇-0.5%冰醋酸(5:95)、甲醇-枸橼酸溶液-水(18:20:62)等作为流动相,分别进样后比较,发现甲醇-枸橼酸溶液-水(18:20:62)作为流动相时,较其它流动相原儿茶醛分离效果好、保留时间、峰形适当。

3.3　为防止原儿茶醛在酸性溶液中分解,调酸性后应立即用乙醚萃取。

3.4　比较不同来源丹参中原儿茶醛的含量,有显著性差异,以神农药店的较高。

参考文献
[1]　郭洪柱,等.高效液相色谱法测定胰妇康胶囊中原儿茶
醛含量[J].中国中药杂志.2000,25(10):609.
[2]　潘英妮,等.HP LC法测定丹参类注射液中4种水溶性
成分含量[J].沈阳药科大学学报,2004,21(3):196. [3]　李岳,薛贵平.复方丹参注射液的临床应用[J].张家口
医学院学报,2002,19(3):32.
[4]　凌海燕,等.丹参水溶性成分的研究概况[J].天然产物
研究与开发,1999,11(1):75.
比色法测定黄蜀葵花总黄酮的含量
崔　燕,卢志强,景　瑞,赵春荣
(山东省生物药物研究院,山东济南250108)
摘　要:目的　采用紫外分光光度法测定黄蜀葵花中总黄酮的含量。

方法　用索氏提取法,以芦丁为对照品,以亚硝酸钠2硝酸铝2氢氧化钠为显色剂,检测波长为500nm。

结果　线性范围为0.012～0.072mgΠml,平均回收率为99.72%,相对标准偏差(RSD)为2.62%。

结论　本法为控制黄蜀葵花的内在质量提供了依据。

关键词:黄蜀葵花;比色法;索氏提取
Colorimetric determination of the total content of
the flavonoids in Abelmoschus manihot
C UI Y an,LU Zhi2qiang,J I NG Rui,ZH AO Chun2rong
(Institute o f Biopharmaceuticals o f Shandong Province,Jinan250108)
Abstract:Objective　T o analyze the total content of flav onoids in Abelm oschus manihot by colorimetric method.Meth2 od　Abelmoschus manihot was distilled with S oxhlet extraction process,rutin was used as reference substance and the de2 tecting wavelength was500nm.R esult　The linearity of flav onoids was fine in0.012～0.072mgΠml,average recovery rate 99.72%,RSD2.62%(n=5).Conclusion　The method has laid the foundation for the control of the inherent quality in Abelmoschus manihot.
K ey w ords:Abelmoschus manihot;colorimetry;s oxhlet extraction
黄蜀葵花为锦葵科植物黄蜀葵Abelmoschus manihot(L.)Medic的干燥花,主产于江苏、安徽等省。

古代为著名的一种观赏花卉,作为药用始于宋代,其味甘、辛,性凉[1]。

黄蜀葵花在民间有较多的应用。

现代药理学证明,黄蜀葵花具有良好的清热利湿解毒功效,进一步实验显示该药具有明显的抗炎,抗菌,镇痛等药理作用[2～4]。

研究中药中具有生物活性的药效物质,研制疗效好、毒副作用小、使用安全方便的新药,一直是中药现代化的重要内容。

中药制剂成分复杂,通过选择中药药效成分最佳的测定方法,可以有效的控制药材及制剂的质量,确保中药制剂质量及疗效的可控性。

本实验参考有关文献[5],采用比色法测定了不同来源黄蜀葵花药材中总黄酮的含量,为制定药
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食品与药品 F ood and Drug 2005年第7卷第2A期
材质量标准提供参考。

1　仪器与试药
紫外可见分光光度计(Agilent 8453);芦丁对照品(中国药品生物制品检定所);黄蜀葵花药材(由山东省中医药大学彭广方研究员鉴定);亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、甲醇等试剂均为分析纯。

2　实验方法2.1　测定方法依据
以芦丁为对照品测定黄蜀葵花中总黄酮的含量,加入铝离子试剂,同时控制适宜pH 值,使黄酮化合物与铝盐形成络合物在可见区能获得稳定的特征吸收峰(见图1)。

2.2　标准曲线绘制
精密称取干燥至恒重的芦丁对照品15mg ,置于5ml 量瓶中,加甲醇超声使其溶解,定容至刻度,摇
匀,精密吸取2.5ml ,置25ml 量瓶中,加水至刻度,摇
匀,精密吸取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml 置25ml 量瓶中,加水至6ml ,摇匀,加5%亚硝酸
钠溶液1ml ,摇匀,放置6min ,加10%硝酸铝溶液
1ml ,摇匀,放置6min ,加氢氧化钠试液10ml ,再加水至刻度,摇匀,放置15min 。

精密吸取水6ml ,置25ml 量瓶中,按上法操作制得空白对照溶液。

在500nm 波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

回归方程为:Y =25.78×1024
+
8.31×1022
X ,r =0.9997。

线性范围为:0.012～0.072mg Πml 。

2.3　样品的含量测定
精密称取黄蜀葵花药材粉末适量置索氏提取器中,石油醚脱脂30min ,甲醇提取4h ,定容于100ml 容量瓶中,按对照品制备方法,在500nm 处测定其吸光度,计算样品中总黄酮的含量。

结果见表1。

表1　不同来源黄蜀葵花中
总黄酮的含量测定
来源含量(%)
RSD (%)
亳州药材市场 5.00.95山东省药材公司 4.8 1.05河北安国 4.3 1.16河南禹州
3.5
1.09
2.4　精密度试验
精密称取对照品适量(5份),按上述方法制备,测定吸光度,吸光度RSD 为0.12%。

结果见表2。

样品重现性试验精密称取黄蜀葵花药材粉末适量(5份),按样品溶液制备方法,测定吸光度,其RSD 为0.042%。

结果见表2。

表2　精密度试验结果
吸光度1
23
45RSD
(%)对照品精密度0.528100.528630.528200.526970.527480.12样品重现性0.52769
0.52797
0.53004
0.52820
0.53110
0.28
2.5　稳定性试验
精密称取黄蜀葵花药材粉末适量,按样品制备方法,放置不同时间测定其吸光度,每隔20min 测定
一次,结果表明80min 内样品的吸光度稳定,RSD =0.28%。

表3　稳定性试验结果
1
2345RSD (%)
吸光度
0.50163
0.50061
0.50049
0.50858
0.50753
0.78
05食品与药品 F ood and Drug 2005年第7卷第2A 期
・质量控制・
对水发食品使用甲醛情况的调查分析
王云梅,岳群英,张成礼
(五莲县卫生防疫站,山东五莲262300)
甲醛对人体有毒、有害,人食用甲醛后可引起恶心、呕吐、腹痛、腹泻等症状,长期小量食用对人体有致癌作用。

但由于其具有防腐杀菌作用,能控制水发食品的水分散失,延长保质期,故仍有部分不法经营业户为谋取私利,使用甲醛发制食品,严重损害了广大消费者的身体健康。

为全面了解我县水发食品使用甲醛情况,为今后对水发食品的卫生监督管理提供科学依据,2004年4月至2004年6月我们对全县集贸市场和餐饮业户销售的水发食品进行了全面调查,现将结果报告如下。

1　调查对象和方法
此次共对全县6个集贸市场的102个经营业户和72个餐饮业户所销售的海参、鱿鱼、百叶等水发食品进行了现场采样,此次共采样品223份,其中经营业户113份,餐饮业户110份。

样品采集严格按理化检验要求,样品低温保存运送至实验室。

检验方法采用乙醛丙酮法。

2　结果
2.1　甲醛检出率
从抽检的223份样品结果看,检出甲醛的共有176份,检出率78.92%。

其中海参、鱿鱼、海螺、百叶、海贝的检出率分别为82.13%、72.12%、60.2%、81.13%、76.26%,均数分别为98.36、76.34、68.26、102.00、93.40mgΠkg,其中以海参和百叶的检出率为最高,分别为82.13%、81.13%,海螺最低为60. 78%。

经统计学检验有明显差别,海参和百味检出率明显高于海螺的检出率(P<0.05)。

2.2　餐饮业户与经营业户所售水发食品甲醛检出情况
在餐饮业户所采110份样品中,检出甲醛90
2.6　加样回收试验
精密称取等量的黄蜀葵花药材粉末适量4份,分别加入对照品适量,按样品的制备方法操作,在500nm处测定吸光度。

平均回收率为99.72%,RSD 为2.62%。

结果见表4。

表4　加样回收率试验结果
总黄酮含量(mg)对照品加入量(mg)测得总黄酮含量(mg)回收率(%)均值(%)RS D (%)
9.377.027.09100.43
9.147.978.19102.76
8.577.247.2299.7299.72 2.62
9.237.477.48100.13
9.677.857.595.54
3　讨论
我们曾比较了不同组成的黄酮显色剂,如醋酸钾-三氯化铝、醋酸钠缓冲液-三氯化铝等,但紫外区吸收峰较小,干扰较大,无法测定含量。

从药材中提取总黄酮方法较多,如加热回流提取,超声提取,索氏提取等,经比较索氏提取的含量较高,且经脱脂后干扰较小,故采用此方法。

本方法能够较准确的测定黄蜀葵花药材中总黄酮的含量,且操作简便,为制定药材及其制剂相应的质量标准提供了可靠的参考。

参考文献
[1]　李时珍.本草纲目[M].北京:人民卫生出版社,1982,
1046.
[2]　马传庚等.A-Ⅲ镇痛作用实验研究初报[J].安徽医
学院学报.1985,20(1):16.
[3]　范丽等.黄蜀葵花总黄酮镇痛作用研究[J].中药药理
与临床.2003,19(1):12.
[4]　郑霞等.黄蜀葵花抗炎作用的实验研究[J].徐州医学
院学报.1994,14(3):226.
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民卫生出版社,1982.212.
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