基于SPR技术的miRNA生物传感器及其在肿瘤检测中的应用
SPR生物传感器在临床医学检验中的应用
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度、 非破坏性及高选择性等优点 ， 现已发展成为一 门十分有用的传感检测
技术， 广泛应用到生物 、 、 化学 医学及食品安全与环境监测等领域日 Ｓ Ｒ 。Ｐ
合角度调制 ， 并在其
轴面镀上 １ 化学性 层 质 比较稳定 、 厚度均 匀的金属膜。当Ｓ Ｒ Ｐ
作为一种强有力的动态检测手段 ． 具有诱人的发展前景。
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｓ Ｒ ｂ ｏ ｅ ｓ ｒ ｃ ｎ ｉ ｓ ｅ ｔ ａ ｌｔｏ ｉｃ ｅ ｃ ｌｉ ｄ ｘ ｓ ｅ ａ ｔ ．ｓ ｎ ｉ ｖ ｌ ． ａ ｔａ ｄ ｓｍｐ ｙ ｔａ Ｓ ａ ｎ ｐ ｃ ｓ ｒ ｃ Ｐ ｉｓ ｎ ｏ ａ ｎ ｐ ｃ ｏ ｆｂ ｏ ｈ ｍｉａ ｎ ｅ ｅ ｘ ｃ ｌ ｅ ｓ ｉｅ ｙ ｆ ｓ ｎ ｉ ｌ ．Ｉ ｌＯ ｃ ｎ ｉ ｓ ｅ ｔ ｙ ｔ ｒ ｃ ｐ ｏ ｉ ｏ ｉｔ ｒ ｍｏ ｅ ｕ ｅ ｎ ｅ ｌ ｉ ．Ｉ ２ ｅ ｒ ，ｉ ｈ ｓ ｅ ｏ ａ ｏ ｕａ ｐ ｏ ｏ ｌ ｃｒｃ ｅ ｈ ｉ ｕ ｉ ｃ ｉ ｉａ ｅ ｉ ｒ ｃｔ ｆ ｎ ｅ — ｌ ｃ ｌ ｉ ｒ ａ ｔ ｙ ｍｅ ｎ ０ ｙ ａ ｓ ｔ ａ ｂ ｃ ｍｅ ｐ ｐ ｌ ｒ ｈ ｔ ｅｅ ｔ ｔｃ ｎ ｑ ｅ ｎ ｌ ｃ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｔ ｎ Ｔ ｉ ｒ ｃｅ ｉ ｔ ｄ ｃ ｓｔ ｅ ｂ ｓｃ ｐ ｎ ｉ ｌ ． ｔ ｃｕ ｅ ａ ｄ ａ ｐｉ ａｉｎ ｏ ＰＲ ｂ ｏ ｅ ｓ ｒｉ ｌ ｉａ ｘ ｍｉ ａｉｎ ｘ ｍｉ ａｉ ． ｈ ｓａ ｔ ｌ ｎ ｒ ｕ ｅ ｈ ａ ｉ ｒ ｃ ｐｅ ｓ ｕ ｔ ｒ ｎ ｐ ｌ ｔ ｆＳ ｉ ｓ ｎ ｏ ｃｉ ｃ ｌｅ ａ ｎ ｔ ． ｏ ｉ ｏ ｉ ｒ ｃ ｏ ｎ ｎ ｏ Ｋｅ ｗｏ ｄ Ｓ Ｒ； ｉｓ ｎ ｏ ； ｌ ｉａ ｘ ｍｉ ａ ｉｎ ｙ ｒｓ Ｐ ｂｏｅ ｓｒ ｃｉ ｃ ｌ ａ ｎ ｔ ｎ ｅ ｏ
纳米生物传感器在癌症早期检测中的应用
纳米生物传感器在癌症早期检测中的应用随着现代医学的发展，癌症早期诊断已成为一项重要的研究方向。
癌症是一种细胞异常增殖导致的疾病，而癌症早期检测是指对人体内可能存在的癌症细胞进行检测和诊断，以便及早发现和治疗，从而提高治愈率和生存率。
而传统的癌症早期检测方法如放射性造影和组织切片病理检查等具有较大的侵入性和副作用，不适合进行大规模的筛查和监测。
近年来，随着生物传感技术的不断发展和纳米材料的应用，纳米生物传感器被广泛应用于癌症早期检测中，成为了一种快速、简便、高灵敏度和高选择性的检测方法。
纳米生物传感器是一种基于纳米材料和生物分子相互作用原理的检测技术。
其核心部分是一个测试基质和一个检测分子。
当检测分子与靶分子结合时，改变了测试基质的光学、电学、化学、机械性质等物理性质，从而引起一个信号响应，这种响应就可以通过不同的检测方法进行分析，实现靶分子检测的目的。
纳米生物传感器具有灵敏度高、特异性好、响应速度快、探测精度高、探针易于制备等优点，具有很大的应用前景。
在癌症早期检测中，纳米生物传感器主要应用于肿瘤标志物的检测。
肿瘤标志物是一种只在癌症病人体内特异性地产生的蛋白质或其他化学物质。
而肿瘤标志物的线性剂量响应对于早期诊断非常重要，而纳米生物传感器的高灵敏度和高特异性可以很好地实现此任务。
例如，纳米生物传感器可以用来检测癌细胞中的特定蛋白质，如癌胚抗原、胰岛素样生长因子等，这些蛋白质被认为是肿瘤标志物的一种，其测定值与癌症病人的临床情况具有一定的相关性。
与此同时，纳米生物传感器还可以用于癌症药物研发中的药效评估。
如对于一种新型抗癌药物，利用纳米生物传感器可以评估药物的治疗效果和剂量，从而提高治疗效率和减少毒副作用。
此外，纳米生物传感器还可以应用于癌症分子机理的研究，如分子标记技术和荧光共振能量转移技术等可用于探究癌症的发病机制。
尽管纳米生物传感技术在癌症早期检测中的应用前景广阔，但也仍有一定的技术难点需要解决。
miRNA实验技术及与肿瘤关系研究进展
miRNA实验技术及与肿瘤关系研究进展The Research Progress of miRNA experimentaltechnique and carcinoma摘要miRNA是一类新近发现的内源性非蛋白编码的单链小分子RNA，长度约为20-25 nt，广泛存在于真核生物中。
在人类已发现的300多个miRNA中有许多与肿瘤的发生有着密切的关系，研究人员通过实验手段和生物信息学方法研究了一些miRNA与肿瘤的关系，以期望寻找到治疗肿瘤的新方法。
关键词：miRNA；肿瘤； miRNA抑制；miRNA过表达；生物信息学1.miRNA概述miRNA是一类新近发现的内源性非蛋白编码的单链小分子RNA，长度约为20-25 nt，广泛存在于真核生物中，进化上相对保守，具有时序性和组织特异性。
1993年 Lee等[1]在对秀丽新小杆线虫（C-elegans）进行突变体的遗传分析中首次发现非编码蛋白质能时序调控其胚胎后期发育基因表达的RNA：Lin-4。
2000年Reinhart [2]在线虫中发现了另一种重要的具有转录后调节作用的miRNA：let-7,从而拉开了miRNA的研究序幕。
成熟的miRNA在5’端有-HP04基团，3’端具有-OH 基团，二者可以和上游或下游的序列不完全配对形成茎环结构，其转录独立于其他基因，本身不具有开放阅读框架，不编码任何蛋白质。
miRNA通常是由RNA聚合酶Ⅱ转录，最初产物为前miRNA(pri-miRNA)的大前体分子，在胞核内被处理成约70个核苷酸的前miRNA(pre-miRNA)，输送到胞质后被剪切产生22—25个核苷酸的双链miRNA，双链miRNA很快被整合到miRNA诱导的沉默复合体中，其中一条miRNA 链被解旋酶所降解，另一条成熟miRNA以单链形式存在，保留下来的miRNA具有调节基因表达的功能。
但现在有研究发现两条miRNA均有可能保留下来，但作用点有区别[3]。
miRNA及其发展和应用
出核：pre-miRN被Exportin-5转运至细胞质
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剪接：由Drosh和DGCR8组成的核酶复合体在核内将pri-miRN剪切成约70个核苷酸的前体miRN（pre-miRN）
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转录：由RN聚合酶II在基因组DN上转录生成初级miRN（pri-miRN）
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作用：RISC复合体通过碱基配对识别并结合靶基因的mRN导致靶基因mRN的降解或翻译抑制从而实现基因表达的调控。
miRN与非编码RN在基因表达调控中的作用
miRN与非编码RN在细胞信号通路中的作用
提高miRN研究和应用的转化率解决实际应用中的挑战
提高miRN的稳定性和表达效率
开发新型miRN递送系统
研究miRN在疾病治疗中的作用机制
解决miRN在临床应用中的伦理和法律问题
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早期miRN研究的主要成果
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发现miRN：1993年科学家首次发现miRN的存在
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发现miRN在发育中的作用：2004年科学家发现miRN在发育中的作用包括胚胎发育、器官形成等
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发现miRN在疾病中的作用：2003年科学家发现miRN在疾病中的作用包括癌症、心血管疾病等
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发现miRN的调控机制：2002年科学家发现miRN的调控机制包括miRN的生成、加工和作用机制
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发现miRN的生物合成途径：2000年科学家发现miRN的生物合成途径
添加标题
确定miRN的功能：1998年科学家确定miRN在基因表达调控中的作用
miRN的初步认识
发现：1993年科学家在秀丽隐杆线虫中发现了miRN
功能：miRN是一种非编码RN可以调控基因表达
人类肿瘤细胞中miRNA的表达及其在疾病诊断与治疗中的意义
人类肿瘤细胞中miRNA的表达及其在疾病诊断与治疗中的意义miRNA是一种小分子RNA，其长度约为20-25个核苷酸，且多为线性双链结构。
在生物体中，miRNA的作用是通过与mRNA结合，抑制特定基因的转录和翻译。
miRNA通过诱导靶基因的降解或抑制其翻译，从而发挥调控细胞转录和译后水平的重要作用。
近年来，越来越多的研究表明，miRNA在许多疾病的发生和发展中起着重要的非常规调节作用。
一、miRNA在人类肿瘤细胞中的表达miRNA具有组织特异性和调节表达模式，它们可以参与多个生理和病理过程，如细胞增殖、分化、凋亡和细胞周期。
人类肿瘤细胞中的miRNA表达模式的改变与不同类型的癌症存在密切的关联。
实际上，许多肿瘤细胞中的miRNA表达是与癌症瘤进展和预后强相关的，这使得miRNA成为一种极具变化的生物标志物。
例如，miR-21是一种高度表达的miRNA，它在大量癌症中高表达并与病情严重程度有关。
miR-21在肺癌、胃癌和乳腺癌中被发现有显著升高的表达水平。
另外，miR-155的表达也在许多癌症中得到扩大，包括乳腺癌、胃癌、结肠癌和肝癌等。
因此，miRNA在癌症研究和癌症诊断的应用潜力也崭露头角。
二、miRNA在疾病诊断中的应用miRNA在癌症的早期诊断中的表现表明，其在其他疾病的诊断中也具有广泛的应用潜力。
比如，在心血管疾病中，许多miRNA与各种疾病相关的表达模式被发现了。
例如，心肌梗死后，miR-1的表达显著升高。
此外，miR-21与心肌缺血和高血压有关。
因此，miRNA对心血管疾病、肾脏疾病等疾病的早期诊断和治疗也具有重要意义。
三、miRNA在疾病治疗中的应用miRNA参与的渠道相对简单，因此它们作为治疗靶点及治疗疾病的潜在药物靶标也受到极大的关注。
调节特定miRNA已成为一种可靠的治疗癌症的方式之一。
目前在研究中的miRNA治疗药物有miR-16-mimic和miR-34a等，用于临床试验阶段的miRNA药物有MRX34、SAR, etc.miRNA-mRNA网络的研究也可以为药物发现和临床治疗提供更多的思路和安排，例如，针对某些细胞上调miR-21表达的癌症疗法应该考虑抑制miR-21的表达。
miRNA在肿瘤早期诊断中的价值及其检测技术进展
于血浆和血清样本的 ｍ ｉ Ｒ Ｎ Ａ是否会有本质的不 同， 该实验组的检测样本来自同一患者的同一次 抽血。实验结果表明无论对血浆还是血清样本进 ｍ ｉ Ｒ Ｎ Ａ都可以作为基于血液检测的稳定 行检测，
１ １ ］ 的标志物。Ｋ ｅ ｌ ｌ ｅ ｒ 等［ 对临床 ４ ５ ４例不同疾病患
ｍ ｉ Ｒ Ｎ Ａ通过与目标 ｍ Ｒ Ｎ Ａ的 ３ ′ 端非编码 区 （ ３ ′ ， ３ ′ Ｕ Ｔ Ｒ ） 特异性互补， 导致 ｍ Ｒ ｕ ｎ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｌ ａ ｔ ｅ ｄｒ ｅ ｇ ｉ ｏ ｎ Ｎ Ａ翻译受到抑制 能
MicroRNA在肿瘤分子诊断中的应用
MicroRNA 在肿瘤分子诊断中的应用欧志英 夏慧敏[摘 要] MicroRNA （miRNA ）在大多真核生物中表达，通过抑制翻译或诱导靶mRNA 降解。
miRNA 是一种新的转录后基因表达调控模式，在复杂疾病形成过程中发挥着重要作用，调节了多种生物学过程，包括生长发育、信号转导、免疫调节、细胞凋亡、增殖及肿瘤发生等。
越来越多的证据表明异常表达的miRNA 是人类疾病的标志，包括肿瘤。
差异表达的miRNA 可能作为疾病早期诊断、分子分型及预后判断的指标，同时也可能成为多种肿瘤耐药新的治疗靶标。
因此，miRNA 在肿瘤中可能作为诊断、预测和治疗的生物标志。
[关键词] 肿瘤；MicroRNA （miRNA ）；分子诊断；治疗；预测；生物标志物Application of microRNA in cancer molecular diagnosisOU Zhiying ，XIA Huimin(Molecular Biology Lab, Guangzhou Women and Children's Medical Center, Guangdong, Guangzhou 510623, China)[ABSTRACT] MicroRNA (miRNA) is a new mode of post-transcriptional regulation of gene expression. It is expressed in most of the eukaryotes, which can inhibit translation or induce target mRNA degradation. miRNA plays an important role in the formation of complex diseases and regulates a variety of biological processes, including growth and development, signal transduction, immune regulation, apoptosis, proliferation and tumor genesis and so on. More and more evidences show that the abnormal expression of miRNA is a sign of human diseases, including cancer. Differentially expressed miRNA may be used as the indicators of early diagnosis, molecular typing and prognosis. It may also be a variety of tumor-resistant new therapeutic targets. Therefore, miRNA may be used as cancer biomarkers for diagnosis, prediction and treatment.[KEY WORDS] Tumor ；MicroRNA(miRNA)；Molecular diagnosis ；Therapy ；Prediction ；Biomarker基金项目：广东省自然科学基金(20121054)；广州市重大民生科技专项(2010U1-E00741)作者单位：广州市妇女儿童医疗中心分子生物学实验室，广东，广州 510623通讯作者：欧志英，E-mail: ouzhiying@miRNA 作为一类重要的参与基因表达调控的分子，代表了一种新的基因表达调控模式，它在细胞中调节约30%的蛋白编码基因，在致病过程中起着重要作用。
【综述】纳米等离子体传感器检测循环肿瘤标记物——miRNA,ctDNA,外泌体，CTC
【综述】纳米等离子体传感器检测循环肿瘤标记物——miRNA,ctDNA,外泌体，CTC癌症生物标志物的检测是癌症诊断和预后的一个重要方面。
液体活组织检查的概念是一种新方式，通过分析患者来源的生物体液，检测和定量循环癌症生物标志物，以进行诊断和预后监测。
与分析原发肿瘤细胞的常规组织活检不同，液体活检能够检测各种循环癌症生物标志物，包括microRNA（miRNA）、循环肿瘤DNA（ctDNA）、蛋白质、外泌体和循环肿瘤细胞（CTCs）。
在已经开发初用于检测循环癌症生物标志物的各种技术中，纳米等离子体传感器（nanoplasmonic sensors）由于灵敏度和特异性高以及仪器和操作的简易性，有希望成为一种有前途的测量方法。
近日，来自南洋理工大学的研究人员在Advanced drug delivery reviews杂志发表长篇综述，讨论了三种不同类型的纳米等离子体激元感应技术（即表面等离子体激元共振（SPR），局部表面等离子体共振（LSPR）和表面增强拉曼散射（SERS））监测循环癌症生物标志物的相关性和适用性。
图1：（a）传输模式下的局部表面等离子体共振（LSPR）传感器设置的简化示意图。
（b）LSPR微阵列芯片的一个示例图。
图2：SPRi联合抗体芯片分离和检测细胞上清外泌体的示意图。
外泌体膜蛋白特异性抗体附着在金芯片上。
细胞上清进入后，外泌体会被抗体捕捉，并通过CCD相机记录。
参考文献：Ferhan AR, Jackman JA, Park JH, Cho NJ, Kim DH. (2017) Nanoplasmonic sensors for detecting circulating cancer biomarkers. Adv Drug Deliv Rev [Epub ahead of print].。
用于肿瘤检测的高分子生物传感器及制备方法及应用[发明专利]
![用于肿瘤检测的高分子生物传感器及制备方法及应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/3b1734e67cd184254b3535ed.png)
专利名称：用于肿瘤检测的高分子生物传感器及制备方法及应用
专利类型：发明专利
发明人：马军岩,徐耀瑜,司伟杰,张振兴
申请号：CN201911189010.3
申请日：20191128
公开号：CN110835405A
公开日：
20200225
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：用于肿瘤检测的高分子生物传感器，所述的高分子生物传感器为聚（9‑甲基‑9‑烷基‑1,4‑芴烯乙烯）。
用于肿瘤检测的高分子生物传感器制备方法，所述的制备方法包括单体制备和单体聚合反应。
用于肿瘤检测的高分子生物传感器的应用，所述的高分子生物传感器采用上述的聚合物，所述的高分子生物传感器用于检测肿瘤细胞过氧化物。
本材料同时降低生产成本，降低了环境污染；对样本的前期处理要求简单，易操作；检测反应迅速。
申请人：安阳师范学院
地址：455000 河南省安阳市高新技术开发区弦歌大道436号
国籍：CN
代理机构：安阳金泰专利代理事务所(普通合伙)
代理人：王晖
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《DNA功能化纳米探针的设计及在miRNA检测中的应用》范文
《DNA功能化纳米探针的设计及在miRNA检测中的应用》篇一摘要：本文研究了DNA功能化纳米探针的设计方法，以及其在miRNA（微小核糖核酸）检测中的应用。
通过设计具有特定序列的DNA纳米探针，结合纳米材料的高比表面积和生物相容性，实现了对miRNA的高效、特异性检测。
本文首先介绍了DNA功能化纳米探针的设计原理及制备方法，然后详细阐述了其在miRNA检测中的应用，并对其前景进行了展望。
一、引言随着生物技术的不断发展，miRNA作为一种重要的生物标志物，在疾病诊断、药物研发等领域具有广泛的应用前景。
然而，由于miRNA的含量低、序列相似度高，其检测成为了一个技术难题。
近年来，DNA功能化纳米探针因其高灵敏度、高特异性及良好的生物相容性，在miRNA检测中得到了广泛应用。
本文旨在探讨DNA功能化纳米探针的设计方法及其在miRNA检测中的应用。
二、DNA功能化纳米探针的设计原理及制备方法1. 设计原理DNA功能化纳米探针的设计基于分子识别原理和纳米材料的高比表面积。
通过将特定的DNA序列固定在纳米材料表面，形成具有特定空间结构的纳米探针。
这些纳米探针可以与miRNA 形成互补配对的杂交双链，实现对miRNA的识别和检测。
2. 制备方法制备DNA功能化纳米探针的方法主要包括两个步骤：首先，通过化学或物理方法将DNA序列固定在纳米材料表面；然后，通过退火或杂交等方式形成具有特定空间结构的纳米探针。
常用的纳米材料包括金纳米颗粒、量子点等。
三、DNA功能化纳米探针在miRNA检测中的应用1. 原理利用DNA功能化纳米探针检测miRNA的原理是杂交捕获法。
当miRNA与纳米探针上的DNA序列互补配对时，形成稳定的杂交双链。
通过检测杂交双链的信号变化，可以实现对miRNA的定量检测。
2. 实验方法及步骤（1）制备DNA功能化纳米探针；（2）将样品中的miRNA与纳米探针进行杂交反应；（3）通过荧光、电化学等方法检测杂交信号；（4）根据信号变化判断miRNA的含量及表达情况。
肽核酸功能化的纳米通道生物传感器高灵敏检测肿瘤外泌体MicroRNA
肽核酸功能化的纳米通道生物传感器高灵敏检测肿瘤外泌体MicroRNA肽核酸功能化的纳米通道生物传感器高灵敏检测肿瘤外泌体MicroRNA引言：肿瘤外泌体（tumor-derived exosomes，TEXs）作为肿瘤细胞释放的一类重要的细胞外囊泡，具有广泛的生物功能以及作为生物标志物的潜在应用价值。
目前，研究表明miRNA编码的信息可以使TEXs在肿瘤的发生和发展中发挥关键作用。
因此，对TEXs包含的miRNA进行高灵敏、高选择性的检测对于早期肿瘤诊断和治疗至关重要。
为了实现这一目标，科学家们开发了一种肽核酸功能化的纳米通道生物传感器，能够高效地检测肿瘤外泌体中的MicroRNA，从而提高肿瘤的早期诊断效果。
一、纳米通道生物传感器的构建肽核酸功能化的纳米通道生物传感器是一种基于纳米通道技术的传感器，其构建过程主要分为以下几个步骤：首先，通过合成特定的肽核酸（peptide nucleic acid，PNA）探针，可以将其序列与目标miRNA互补配对。
然后，将PNA探针修饰在纳米通道表面，形成PNA功能化的纳米通道。
最后，将待测TEXs样品置于纳米通道中，通过电化学或离子流动等方法，实现对TEXs中miRNA的高灵敏检测。
二、纳米通道生物传感器的工作原理在构建的纳米通道生物传感器中，TEXs样品中的miRNA与PNA 探针发生互补配对反应，导致纳米通道中的电流变化。
根据miRNA的浓度，电流变化的大小也会有所不同。
通过测量得到的电流变化，可以定量检测出TEXs中miRNA的浓度。
这种基于纳米通道的生物传感器具有灵敏度高、检测精准、响应时间短等优点。
三、肿瘤外泌体MicroRNA的高灵敏检测通过使用肽核酸功能化的纳米通道生物传感器，可以实现对肿瘤外泌体中MicroRNA的高灵敏检测。
TEXs作为肿瘤细胞释放的一类细胞外囊泡，其内部含有大量miRNA。
这些miRNA在肿瘤的发生和发展中起到重要作用，并且表现出不同于正常细胞的miRNA表达谱。
miRNA在肿瘤的基因诊断及基因治疗中的应用
综述与讲座 miRNA在肿瘤的基因诊断及基因治疗中的应用李倩(南华大学药物药理研究所,湖南 衡阳 421001)[关键词] 微RN A s; 基因疗法; 肿瘤/诊断; 肿瘤/治疗[中图分类号] R730.4 [文献标识码] C [文章编号] 1671-7171(2008)04-0690-03miRNA是继转录因子之后发现的又一调节基因表达的小分子RNA家族。
它在生物的发育时序调控和疾病的发生中起着非常重要的作用。
由于其存在的普遍性以及所参与的调控过程的复杂性, miRNA成为近年来生命科学界研究的热点。
1 m iRNA与肿瘤的发生miRNA基因以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中,其转录独立于其他基因,并不翻译成蛋白质。
miRNA的生物学调节作用取决于miRNA和m RNA之间互相配对的程度:与靶mR-NA不完全互补的miRNA在蛋白质翻译水平上抑制m RNA表达,mRNA不会被完全降解;如果miR-NA与靶位点完全互补(或者几乎完全互补),那么这些m iRNA的结合往往引起靶mRNA的降解。
目前只有一小部分miRN A生物学功能得到阐明。
这些m iRNA调节了细胞生长,组织分化,因而与生命过程中的发育、疾病有关。
通过对基因组上miR-NA的位点分析,显示其在发育和疾病中起了非常重要的作用。
3.2 E-ADM浓度与K562细胞病死率、损伤程度的相关性分析 用不同浓度E-A DM对对数生长期K562细胞作用24h和72h后,检测死亡细胞百分率和细胞的损伤程度;分析E-ADM浓度、死亡细胞百分率(PI+细胞百分率)和细胞的损伤程度(MFI)之间的关系。
结果显示: 随着药物浓度以数量级增加时,死亡细胞百分比并不是相应地以数量级增加,甚至连正相关关系都不存在。
这表明E-ADM 对K562细胞的杀伤效应是十分复杂的,给药浓度呈数量级增加,死亡细胞百分比曲线有固有的独特规律 即成 S 型曲线。
在这条 S 型曲线上,可发现死亡细胞对不同浓度药物的作用除有一个 敏感剂量 外,还有一个 饱和剂量 。
如何研究miRNA在疾病中的功能作用
如何研究miRNA在疾病中的功能作用在miRNA盛行的时代里，自身的科研领域中少了miRNA的参与怎么能行，百替生物将带领大家走进miRNA的世界，解开miRNA的面纱，探讨如何研究miRNA在疾病中的功能作用。
本篇文章就以《Cell Death and Differentiation》杂志上一篇文章《MiR-148a promotes apoptosis by targeting Bcl-2 in colorectal cancer》为例，为大家讲解研究miRNA的方法思路。
该文章从细胞生物学，动物模型及临床检测三个层面来研究miR-148a在结直肠癌中的功能作用。
首先，经研究发现miR-148a具有抑制肿瘤细胞增殖的作用。
该文章就将研究方向确定为miR-148a对结直肠癌细胞的凋亡作用。
首先，选择了三种结直肠癌细胞系（SW480、RKO、Lovo），检测了miR-148a在细胞中的表达，并利用流式细胞仪进行检测过表达或抑制表达miR-148a对细胞凋亡的影响。
结果：当过表达miR-148a时，细胞凋亡率增加，反之，细胞凋亡率下降。
初步确定了，miR-148a能促进细胞凋亡。
并进一步对其作用机制进行了深入的研究。
从两个方面，其一，是miR-148a是如何被调控的，其二，是miR-148a通过靶向哪些下游基因进行调控细胞凋亡的。
1、miR-148a上游机制探讨：该文章从TRANSFAC public release 7.0数据库中搜寻了能够与miR-148a结合转录因子。
并选择能够促进肿瘤增殖的转录因子MYB，作为目的转录因子进行研究。
利用pwmatch 软件对miR-148a的基因组上游4.5kb及下游0.5kb进行扫描，发现了两个MYB能识别的转录结合位点，分别位于3706 bp (TFBS-1) and 2998 bp (TFBS-2)。
利用染色质免疫共沉淀（CHIP）证明出TFBS-2可以与MYB结合，并且通过凝胶迁移率实验（EMSA）及荧光素酶活性检测实验，进一步验证了TFBS-2可以与MYB结合。