保健食品

宁波大学答题纸（20 —20 学年第学期）课号：课程名称：改卷教师：学号：姓名：得分：保健食品中熊果酸的研究进展及其应用作者：专业：学号：摘要熊果酸是存在于天然植物中的一种三萜类化合物，具有保肝、抗炎、抗菌、抗肿瘤、降低血糖等多种生物学效应，现综合国内外文献报道，对熊果酸的药理作用及提取分离方法和含量测定等方面进行综述。

熊果酸具有广阔的应用前景，对开发植物资源，研制新药具有重要意义。

关键词熊果酸；药理作用；分离方法熊果酸，又名乌苏酸、乌索酸、A-香树脂醇，是一种弱酸性五环三萜类化合物。

在自然界分布很广，是多种天然产物的功能成分，熊果酸以游离形式或与糖结合成苷的形式存在于多科植物中，所以提取精制的方法比较广泛。

本文简要介绍了熊果酸的药理作用及其应用，综述了熊果酸提取工艺的研究进展，探讨了其今后的发展方向。

1 熊果酸的药理作用及其应用1.1 保肝熊果酸对急性实验性肝损伤有明显的保护作用，临床表现为血清谷丙转氨酶含量下降、肝细胞变性、坏死等生理现象明显减轻；对于恢复肝功能具有见效快、疗程短、效果稳定等特点。

熊果酸在制备治疗病毒性肝炎药物中不论单独使用，还是与其它药物配合使用的效果都很显著。

熊筱娟等[1]研究了熊果酸抗急性肝损伤的作用，结果发现急性肝损伤模型组与正常对照组比较，各项指标差异均有显著性；熊果酸组与模型组比较，血清ALT、AST、MDA明显降低，光镜下肝细胞脂肪变性，水样变性明显减轻，表明熊果酸对D-氨基半乳糖(D-Ga1N)诱导的急性肝细胞损伤的保护作用与其阻止肝细胞坏死、抗氧化作用有关。

熊果酸的偶合物也同样具有保肝的特性，朱建勤等[2]通过改进的Koenigs-knorr法在熊果酸3位和28位进行半乳糖苷化得到6个化合物。

通过MTT法考察了上述化合物对大鼠肝干细胞样上皮细胞WB-F344的作用，发现化合物12b和12e可明显提高WB-F344细胞的成活率。

体内实验结果表明，化合物12b，12d和12f在刀豆蛋白引起的小鼠急性免疫性肝损伤模型上，只有化合物12d 对小鼠血清谷草转氨酶升高具有一定程度的降低作用。

1.2 抗炎抗菌抗病毒作用熊果酸能导致细胞生存能力下降，能抑制G+和G-菌以及抑制真菌生长。

对杀灭和抑制变形链球菌组及牙周病原菌具有明显的效果。

熊果酸能抑制HIV-1蛋白酶活性，增强免疫功能，发挥抗HIV的作用。

王翔等[3]研究了熊果酸纳米脂质体的镇痛作用和抗炎活性，其采用醋酸扭体法、小鼠热板法评价熊果酸的镇痛活性，采用甲醛致炎法评价熊果酸的抗炎活性。

结果表明熊果酸纳米脂质体具有一定的镇痛和抗炎活性。

熊果酸的抑菌作用也是不容忽视的，纪晓花[4]利用体外抑菌试验对乌梅熊果酸的抑菌活性进行了探讨，结果表明，乌梅熊果酸对细菌、霉菌和酵母均有一定的抑制作用, 而且乌梅熊果酸的抑菌活性具有较好的热稳定性，在pH 4~6范围内，乌梅熊果酸的抑菌效果较为稳定。

在研究女贞子提取物时，孙瑞娜等[5]发现熊果酸和齐墩果酸通过非竞争抑制作用抑制丙型肝炎病毒复制酶NS5B 活性，并揭示出这两个天然化合物具有潜在的丙型肝炎治疗价值。

1.3 抗肿瘤熊果酸抗肿瘤作用是多方面和全方位的。

其主要通过以下几方面进行作用：①熊果酸能抗DNA突变、抑制癌变的启动；②熊果酸能直接杀伤肿瘤细胞；③熊果酸具有肿瘤逆转作用及抗侵袭性；④诱导肿瘤细胞凋亡；⑤抑制肿瘤血管形成。

王艳杰等[6]在探讨熊果酸抑制人宫颈癌hela 细胞生长的可能作用机制中发现熊果酸不仅明显抑制人宫颈癌hela 细胞的生长，而且人宫颈癌hela 细胞传代的同时加入熊果酸的方式，对肿瘤细胞生长的影响更明显，推测熊果酸可能存在细胞毒性。

在探讨熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响时，李艳红等[7]用皮下移植建立H22荷瘤小鼠模型，腹腔注射不同剂量熊果酸，检测抑瘤率和免疫器官指数，结论得熊果酸可抑制小鼠肝癌H22肿瘤生长，体内可以提高荷瘤小鼠的免疫能力，因此认为抗肿瘤作用可能与机体的免疫调节作用相关。

2 熊果酸提取工艺研究进展2.1 回流提取法回流提取法是用乙醇等易挥发的有机溶剂提取原料成分，将浸出液加热蒸馏，其中挥发性溶剂馏出后又被冷却，重复流回浸出容器中浸提原料，这样周而复始，直至有效成分回流提取完全。

回流提取分单次和多次提取，采用单次提取得到的提取率不高，而多次提取可以很好地解决这个问题。

如蒙大平等[8]研究了苦丁茶老叶中熊果酸的提取工艺，结果表明采用85℃水浴温度，液固比为16：1，乙醇浓度为80%，水浴提取2次，每次 2.15h，熊果酸得率可达45.6μg/g。

谷芳芳[9]等以山楂为原料，得到最佳提取参数为：乙醇体积分数95%，提取温度85℃，提取时间110min，液固比5∶1，提取次数3次，在该条件下，熊果酸提取率为93.47%。

回流提取法需消耗大量的溶剂，提取液在蒸发锅中受热时间较长，而药液长时间受热，很容易使其中的有效成分发生改变。

如何有效解决好这些问题以减少提取过程溶剂的消耗及其中有效成分的损失，将是今后回流提取法发展亟待解决的问题。

2.2 超高压提取法在超高压状态下不仅能促进化学反应，还可以改变一些物质的表面状态、分布排列以及物理性能。

在生物提取过程中超高压能加快反应速度，缩短提取时间，提高产品得率。

马文娟等[10]采用L9( 34) 正交试验对超高压提取冬凌草中熊果酸的工艺进行优化，以熊果酸的得率为指标，考察固液比( g∶mL) 、乙醇质量浓度、超高压压力及加压时间对熊果酸得率的影响。

得到优化的工艺条件为固液比1∶22、乙醇质量浓度75 %、超高压压力320 MPa 及超高压时间4 min，该条件下熊果酸的得率可达0. 322 %。

纵伟等[11]以大花紫薇为原料，对2α-羟基熊果酸的提取工艺进行优选，得到的最佳工艺条件为：超高压压力300 MPa、保压时间 5 min、乙醇体积分数90%、固液比1∶15、提取3次，产品得率为0.415%。

常温超高压提取法具有提取率高、提取时间短、节约溶剂、提取物杂质少、生物活性高等优点。

但是，对设备有较高的要求，一次性投资大，对大型企业很适用。

2.3 超声波提取法超声波传递过程中存在着正负压强交变周期，在正相位时，对介质分子产生挤压，增加介质原来的密度；负相位时，介质分子稀疏、离散，介质密度减小。

也就是说，超声波并不能使样品内的分子产生极化，而是在溶剂和样品之间产生声波空化作用，导致溶液内气泡的形成、增长和爆破压缩，从而使固体样品分散，增大样品与萃取溶剂之间的接触面积，提高目标物从固相转移到液相的传质速率。

杨艳等[12]在研究优化猕猴桃根熊果酸的超声波提取最佳工艺时，利用单因素试验，选择乙醇浓度，液料比，提取时间，提取温度为自变量，熊果酸得率为响应值，利用中心组合试验法和响应面分析法，研究各自变量交互作用及其对熊果酸得率的影响，模拟得到二次多项式回归方程的预测模型，结果表明：当超声功率为225W，超声频率为40KHz时超声波提取熊果酸工艺最佳条件为：乙醇质量浓度73.8%，液料比7.80:1 （V:W），提取时间23.2 min，提取温度79.1℃。

此提取条件下，熊果酸得率达到2.014%，与模型预测值之间具有较好的拟合性，且提取液中熊果酸的纯度为49.7%。

努尔皮达·阿卜拉江等[13]使用超声波提取法提取野蔷薇根中的熊果酸，实验结果表明：野蔷薇根中熊果酸的提取最佳工艺是超声功率为600W，超声频率为工作5s间歇5s，料液比1∶25，提取时间为30min，并得出结论：超声辅助提取野蔷薇根中熊果酸是一种简单、快捷、高效的提取方法。

超声波提取可以利用超声波振动的能量强化扩散过程，使溶剂容易浸入固体，固体溶质容易从固体内部扩散到固液界面，从而加速了萃取过程，且超声波具有絮凝作用，使浸出液容易澄清过滤。

但缺点是受超声波功率限制，大规模生产的经济性不好，大功率超声波的安全性也有待验证。

2.4 超临界萃取法超临界萃取法是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。

在超临界状态下，将超临界流体与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小不同的成分依次萃取出来。

萃取过程一般分为：流体压缩→萃取→减压→分离四个阶段。

以超临界CO2为溶剂从原料中提取熊果酸，操作范围广，可有针对性提取有效成分，同时萃取同蒸馏合为一体；不需要溶剂，无污染，产品纯度高。

如刘开南[14]在在单因素实验基础上通过响应面分析建立超临界CO2流体萃取枸骨叶中熊果酸的数学模型，确定优选萃取工艺条件。

结果优选萃取工艺条件为萃取压力27.1MPa，萃取温度50℃，夹带剂流量0.09mL/min。

在此条件下熊果酸得率可达到2.11mg/g。

刘艳辉[15]采用超临界技术萃取车前草中的熊果酸，得出最佳条件：萃取压力20MPa、粒度420μm、温度40℃、CO2流量20 L/h、萃取时间3 h、95%乙醇用量为物料干质量的30 %，产品得率为4.17 %。

与传统法相比，超临界流体萃取具有操作简便快速、溶剂用量少、提取时间短、有效成分提取率高、测定时无杂质干扰等优点。

通过改变萃取压力、温度或添加适当的夹带剂，还可改变萃取剂的溶解性和选择性。

但缺点是操作压力高、能量消耗大、设备放大时制造成本高，如何解决这些问题还有待于进一步研究。

2.5索氏提取索氏提取法是将粉碎的固体物质放在滤纸套内，置于提取器中，提取器的下端与盛有溶剂的圆底烧瓶相连，上接回流冷凝管。

然后加热圆底烧瓶，使溶剂沸腾，蒸气通过提取器的支管上升，被冷凝后滴入提取器中，溶剂和固体接触萃取出部分物质，含有萃取物的溶剂经虹吸回烧瓶。

如此重复，使固体物质不断为纯的溶剂所萃取，将萃取出的物质富集在烧瓶中。

高晓旭等[16]采用索式提取法，以熊果酸提取率为指标，对提取工艺进行了研究。

结果表明，乙醇体积分数为85%、提取温度为88℃、提取时间为120 min、液固比为8∶1、提取次数为2次时，熊果酸提取率为92.5%。

索氏提取是实验室常用的一种有效的溶剂回流提取方法，具有节省溶剂、无中间反复滤过带来的损失等优点；而且提取较完全，实验重复性好，适合于提取中药亲脂性强、加热不易变化的成分。

但此法花费时间长、效率不高，因此，它的应用还有一个不断发展完善的过程，对存在的一些问题需要作进一步探讨和解决。

2.6 其他方法随着现代分离技术的发展，新的熊果酸提取工艺不断被开发出来，如渗漉法，微波预处理-回流提取联合工艺法，沉淀法等。

各种提取熊果酸的新工艺就是按照更加快捷、更加方便、更加环保、提取率更高的方向发展。

3 结束语熊果酸具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物活性，极有可能成为低毒高效的新型抗癌药物，在医药、食品和化妆品等领域有着广泛的应用。