单克隆抗体的主要制备步骤
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单克隆抗体的主要制备步骤
1. 购买解抗原,根据所需克隆抗体设计免疫原;
2. 免疫动物(如家兔),使免疫动物产生抗体抗原反应;
3. 收集动物血清,并从血清中抽取单克隆抗体;
4. 把抽取到的单克隆抗体配制成适合应用的格式(液体、粉末、悬浮液等);
5. 对单克隆抗体进行纯化并测定其纯度;
6. 用ELISA等多种方法进行交叉反应性测定;
7. 进行稳定性、非特异性结合和抗原竞争的测定;
8. 制备单克隆抗体的回收量检测及吸附实验;
9. 最后进行细胞实验,确保单克隆抗体与细胞结合稳定和特异。