人白细胞介素29对Hela细胞抗病毒保护作用

寡腺苷酸合成酶 ； 抗病 毒活性
中图分类号 文 献 标 识 码 Ａ 文 章 编 号 １０ ０ ０—１９ （０ ８ ０ — ０ ０— ４ ４ ２ ２０ ） １ ０ １ ０
公 司 。 Ｒ 试 剂 盒 、 ａ Ｎ 聚 合 酶 、 Ｎ Ｐ 购 自 Ｔ ＴｑＤ Ａ ｄＴ ＴＫ Ｒ ａ ａ ａ公 司 。引物 由上 海 生 工 生 物 工 程 技 术 服 务 有 限公 司合 成 。ｒｌ－９有本 室 重组 表达 并纯 化 。 ｈＬ２
一
Leabharlann Baidu
组 加 入 １ ０ Ｃ Ｄ ０ Ｖ Ｖ １ ０ ｉ ， 一 组 不 加 病 ０ Ｔ Ｉ ｓ的 Ｓ ０ １ 另 ｘ
异二 聚体 ， 受体 广泛 分 布 于 人体 很 多 组 织 。Ｉ－９ 该 Ｌ２ 与 其受 体结合 通过 类 似于 Ｉ 干扰 素 的信号 途 经激 类 活 Ｓ Ａ ２， 致 干扰 素激 活基 因 因子 ３ ＩＧ ３ 与干 ＴＴ 导 （Ｓ Ｆ ）
Ｒ ３２ １ ；Ｒ９ ７ ６ Ｒ ９ ８７ ９ ．２ ７ ． ； ７ 、
１ １１ 细 胞 和 病 毒 ． ．
赠。
Ｈ ｌ 胞 由本 教 研 室 保 存 ， ｅａ细
Ｖ Ｖ 由安徽 医科 大 学 微 生 物 教 研 室 黄 升 海 老 师 惠 Ｓ １１２ 试 剂 ．． Ｔｉ ｌ Ｒ ＭＩ６ ０培 养 基 购 自 Ｇ ｂｏ ｒ ｏ 、 Ｐ １４ ｚ ｉｃ
毒 机制 ， 为进一 步研究 Ｉ－９的功 能奠 定基 础 。 Ｌ２
１ 材 料与 方法 １ １ 材料 ．
结果 ｒｌ － ｈＬ２ ９对 Ｈ ｌ 细胞 有保 护作 用且具 有剂 量 依赖 关 系 ｅａ
（ ００ ） Ｐ＜ ． １ 。结 论 ｒＩ・９通 过 上 调 Ｍｘ ｈＬ２ Ａ蛋 白 、 ５． 腺 ２ ， 寡
用， 以期 初 步 探 讨 Ｉ－９在 女 性 生 殖 系 统 中 的抗 病 Ｌ２
态学检测分析 ｒｌ－９对 Ｈｅ ｈＬ２ ｌ ａ细胞 的抗病 毒保 护作 用 。结
果 经 ｒｌ．９处 理 的 Ｈ ｌ 细 胞 的 Ｍ Ａ蛋 白 、 ５． Ａ ｈＬ２ ｅａ ｘ ２ ， Ｏ Ｓ的
ｍ Ｎ Ｒ Ａ表达 明显 上调 ， Ｓ Ｎ Ｖ Ｖ Ｒ Ａ含量 显 著下 降 。Ｍ３ 分析 Ｔ
本室 已成功 的构 建和 表 达 了 ｒｌ－９ 并 通 过 金 ｈＬ２ ，
的抗病 毒保 护作用及其作 用机制 。方法 传代 培养 的 Ｈ ｌ ｅａ
细胞按 一定 密度接种 于 ２ ４孔培 养板 ， 分别 加人 不 同浓度 的 ｒｌ－９ 培养 ２ 换液 一次 ， 续 以含 ｒＩ．９的培养 基 ｈＬ２ ， ４ｈ后 继 ｈＬ２ 培养 １ ， ６ｈ 用水疱性 口炎病毒 （ ｓ ） ｖ ｖ 感染 后 ， 以不加 ｒｌ－９ ｈＬ２ 为空 白对照 。Ｒ —Ｃ Ｔ Ｐ Ｒ分析 Ｍｘ Ａ蛋 白 、 ５． 腺苷 酸合 成 ２ ， 寡
罗
摘要 目的
欣 ， 海 良， 胜权 黄 张
研究 重组 人 白介 素 ２ ｒＩ．９ 对 Ｈ ｌ 胞 ９（ｈＬ２ ） ｅ ａ细
发挥其抗病毒作用 ， 其抗病毒活性与 ＩＮ相似 ， Ｆ 但对
靶 细 胞 有 选 择 性 ， 外 研 究 表 明 Ｉ－９ 能 保 护 体 Ｌ２ Ｈ ｐ ２细胞 免受 损 害 ｅＧ 。
酶 （ ５ －Ａ ） Ｎ 及 Ｖ Ｖ 的 Ｒ Ａ 水 平 ； Ｔ 细 胞 形 ２ ，＇ Ｓ ｍＲ Ａ Ｏ Ｓ Ｎ Ｍ１ ｒ及
属螯合层 析法进一 步分 离纯化＿ 。我们 采用 Ｒ — ３ Ｊ Ｔ Ｐ Ｒ及 ＭＴ ＿ 等方 法体 外研 究 ｒｌ－９是 否具 有 保 Ｃ Ｆ４ ｈＬ２
护 Ｈｌ ｅ ａ细胞 免受 水 疱 性 口炎 病 毒 （ Ｓ 的损 害 作 Ｖ Ｖ）
与 Ｉ 干扰 素 不 同 是 由 Ｉ２ Ｒ 型 Ｌ ８ ａ和 Ｉ一０ Ｉ 成 的 Ｌ １ Ｒ３组
１２ １ 细胞 培 养 ．．
Ｈｌ ｅ ａ细胞 以含 １ ％血 清 的 １４ ０ ６０
培养 液 培 养 传 代 后 ， ２×１ ｍ 密 度 接 种 ２ 以 ０／ ｌ ４孔 板 ， 成 ２组 ， 分 每组设 三 个复 孔 ， ５ Ｃ ３ 置 ％ Ｏ 、７℃ 细 胞培 养箱 培养 。次 日换 液 ， 每组 加 入 不 同浓 度 ｒｌ一 ｈＬ ２ （ 浓度 分别 是 ０、０ １０ ｇＬ 培养 ２ ９终 ８ 、６ ／ ） ４ｈ后 ， 仍 以含 上述 不 同浓 度 ｒｌ－９的 １ ０培 养 液 换 液 ， ｈＬ２ ４ ６ 取
１ ２ 方法 ．
人 白 细胞 介 素－９（ｉｔ ｌ ｋｎ２ ，Ｌ２ ） 新 ２ ｎ ｒ ｕｉ－９ Ｉ．９ 是 ｅｅ 近发 现 的细胞 因 子 ＿ ２， 生 理 功 能 和 作 用 机 制 有 ｌ 其 Ｊ Ｉ 待 于进 一步 的探 讨 。双 链 Ｒ Ａ及 一 些 病 毒 刺 激 的 Ｎ 人 外周 血单 个核 细胞 （ ＭＢ 、 突 状 细胞 （ Ｃ） Ｐ Ｃ） 树 Ｄ 均 能表 达 Ｉ－９ Ｌ２ 。其基 因结构 与 Ｉ一０相 似 ， 氨 基酸 Ｌ１ 但 水 平 与干 扰 素 （Ｆ 更 接 近 ， 又 被 称 为 ＩＮ … ， ＩＮ） 故 Ｆｈ 与 Ｉ 干扰 素结 构 上 可 能 属 于 一 个 家 族 ， 其 受 体 型 但
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安徽 医科 大学学报
Ａｔ ｎｖｒｔｔ ｄｃ ａｉＡ ｈ ｉ ０ ８Ｆｂ ４ （ ） ｃ Ｕ ｉ ｓａｉ Ｍｅｉｎ ｌ ｎ ｕ ２０ ｅ ；３ １ ａ ｅｉ ｓ ｉ ｓ
人 白细胞介 素 ２ 对 Ｈ ｌ 细胞抗病毒保护 作用 ９ ｅ ａ
苷 酸合成酶 ， 抑制 Ｖ Ｖ增殖具有 一定 的保 护 Ｈ ｌ Ｓ ｅａ细胞免受
病毒损 伤的作用。 主题词 白细胞介素类／ 药理学 ； ｅ ａ细胞／ ＨＬ 药物 作用 ； 抗病 毒药 ； 白质类 ； 蛋 自由词 重组人 白细 胞介素 ２ （ｈＬ２ ） Ｍｘ ９ ｒＩ．９ ； Ａ蛋 白； ５・ ２ ，