孕产妇及其所生儿童艾滋病检测PPT

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• (4)产前未接受过HIV抗体检测的急产、临产 的产妇进行快速检测,可及时得到结果,便于 采取措施,有效阻断母婴传播。
• (5)在发生职业暴露后,为了做好暴露后预 防,如果不明确暴露源是否是HIV感染者,应 立即进行抗体快速检测,阳性者再进行病毒载 量测定。
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2 化学发光试验
• 试剂和原理
• 化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)是 将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合, 用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等 的检测分析技术。化学发光免疫分析法以标记方法的不同而分为两种 :
排 除 儿 童 HIV感 染 常规儿童保健随访
诊 断 儿 童 HIV感 染 进行传染病信息报告
提供转介服务 随访并监测病情
提供咨询, 进行核酸
检测等其他 补充试验
图6.艾滋病感染孕产妇所生儿童艾滋病感染早期诊 断检测及服务流程
艾滋病感染产妇所生儿童
出 生 后 6周 采 集 第 一 份 血 样 本 制 备 成 滤 纸 片 干 血 斑 ( DBS) 进行婴儿艾滋病感染早期诊断检测
• (1) 化学发光标记免疫分析法: 其化学反应简单、快速、无须催化 剂; 检测小分子抗原采用竞争法, 大分子抗原则采用夹心法, 非特 异性结合少, 本底低; 与大分子的结合不会减小所产生的光量, 从 而增加灵敏度。
• .(2)化学发光酶免疫分析法:从标记免疫分析角度,化学发光酶免 疫分析(Chemiluminescent Enzyme Immunoassay,CLEIA)应属 酶免疫分析,只是反应的底物是发光剂,操作步骤与ELISA分析完全 相同。以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体)进行免疫反 应,免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物, 在信号试剂作用下发 光,用发光信号测定仪进行发光测定。
孕产妇及其所生儿童艾滋病检测 技术要点介绍
.
规范化检测及管理
管理:检测工作管理办法
检测:检测技术规范 质控:质控指南 信息 实验室网络通讯
HIV(-) HIV急性感染 HIV长期感染 艾滋病期
抗体检测 核酸检测 抗原检测 病毒分离
核酸检测 抗原检测 病毒分离 耐药监测 CD4细胞 新感染检测
两种均有反应 或 一有反应一无反应
提供疑似阳性咨询 进一步做补充试验
补充试验 (首选抗体补充试验)
不确定
有反应
提供咨询 进行核酸检测等
其他补充试验
报告 “HIV抗 体 阳 性 ”
两种均无反应
报告 “HIV抗 体 阴 性 ” 无反应
流行病学史 无 有
进行核酸检测或 2-4周 后 随 访
检测后咨询、指导 进行传染病信息报告
所生新生儿特别 护理、应用抗病毒 药物;喂养指导、
营养咨询等
感染妇女纳入当地艾滋病 防治系统
所生儿童继续随访、进行 艾滋病相关检测
补充试验(核酸)
感染HIV后各种标志物消长变化
检测方法
• 孕产妇艾滋病检测方法包括抗体筛查试验和补充 试验。
• 抗体筛查试验包括快速检测(RT)、酶联免疫吸 附试验(ELISA)、化学发光免疫试验(CLIA) 、明胶颗粒凝集试验(PA)等。
尽早进行补充试验,及时获得检测结果 (首选抗体补充试验)
有反应
无反应
不确定
报告
报告
“HIV抗 体 阳 性 ” “HIV抗 体 阴 性 ”
提供咨询,进行 传染病信息报告 继续提供干预服务
提供咨询 终止干预
提供咨询, 进行核酸
检测等其他 补充试验
提供咨询 终止干预
提供咨询 继续提供干预服务 尽早获得检测结果
一、孕产妇艾滋病检测
• 参照《全国艾滋病检测技术规范(2014年 修订版)》中临床诊断相关的检测策略进 行孕产妇艾滋病检测。
《全国艾滋病检测技术规范(2014 年修订版)》中的变化
2009年版
2014年版
检测流程
• 孕产妇初次接受孕产期保健时,首先进行艾滋病 抗体筛查试验。筛查试验结果有反应者,使用原 有试剂和另外一种筛查试剂进行复检,也可使用 原有试剂双份进行复检。根据复检结果,确定是 否进行补充试验。依据补充试验结果,判定感染 状况(详见图2)。
艾滋病感染孕产妇所生儿童艾滋病抗体检测及服务流程(图7)
艾滋病感染产妇所生儿童 早期诊断检测结果阴性;或未接受早期诊断检测、
感染状态不明确者
12个 月 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
无反应
用另一种筛查试剂再次检测
无反应
有反应
有反应
18个 月 时 再 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
无反应
有反应
两 种 均 无 反 应 原 有 试 剂 +另 一 种 筛 查 试 剂 进 行 复检 或 原有试剂双份进行复检
两种均有反应 或 一有反应一无反应
无反应 用另一种筛查试剂 有反应 再次检测
补充试验
不确定
(首选抗体补充试验)
无反应 有反应
报 告 “HIV抗 体 阴 性 ”
报 告 “HIV抗 体 阳 性 ”
第四代
HIV-1+2基因重组 抗原、合成肽抗 原,P24单克隆抗 体
10-18
双抗原夹 心法、抗 体捕获
IgG
1985年批准,特异性、敏
感性均较低;仅针对HIV-
1,但对防治输血传播HIV
起重要作用
IgG
1990年批准,敏感性、特
异性均较第一代有所提高
IgG+IgM、 1994年批准,敏感性、特
IgA
CD4细胞 病毒载量 耐药检测
抗原检测 病毒分离
耐药检测
CD4细胞
3
孕产妇 孕早期或初次产检时,及时、主动提供艾滋病、梅毒、乙肝检测和咨询服务
艾滋病感染

孕产妇
梅毒感染 孕产妇
乙肝感染 孕产妇

常规孕产期保健服务,定期随访
未感染 孕产妇
定期检测 应用抗病毒药物 预防机会性感染
定期检测 规范治疗
监测肝功能 必要时治疗疾病
C 对照颗粒 S 致敏颗粒
PA 定性试验
快速检测试验的特点
• HIV抗体快速检测方法有以下一些主要特 点:
• (1)HIV抗体快速检测试剂大部分均为 一步法,一般在15~30分钟可获得结果。
• (2)HIV抗体快速检测判定结果一般采 用目测,而且操作方便,不需要特殊仪 器设备。
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• (3)HIV抗体快速检测技术本身对检测技术人 员要求不高,适用于各级实验室。
雅培HIV-1婴儿核酸诊断试剂盒
– 同时扩增检测 HIV-1 RNA 和 DNA
• WHO 推荐同时检测HIV-1 RNA 和 DNA
– 样本类型: 干血斑和血浆 (0.2mL) – 靶区域: INT/pol – 荧光探针设计:
独特的部分双链探针设计保证对各种不同 亚型HIV-1的准确检测 – 仪器平台:全自动 m2000 系统 (m2000sp 和 m2000rt)
并监测病情
按照未感染儿童处理, 继续提供儿童保健及 随 访 服 务 ; 满 12月 龄 开始进行抗体检测
检测方法(定性)
• 1) COBAS Amplicor/COBAS TaqMan HIV-1 QualTest
• 2)雅培HIV-1婴儿核酸诊断试剂盒
• 3)IN-HOUSE(国内开展,2014年检测技 术规范)
• 补充试验包括抗体补充试验和核酸补充试验等。 建议首选抗体补充试验,如蛋白免疫印迹试验( WB,原确证试验)、条带/线性免疫试验( RIBA/LIA)。
1. 快速检测试验(RT) —— 原理*
免疫层析(IF)/ 免疫渗滤(FT) 颗粒凝集(PA)
* 最新快速 HIV 试剂检测 HIV 抗体比第三 代EIA 晚 2-8 天
提供后续干预服务
检测后咨询、指导 常规孕产期保健
图3. 产时艾滋病抗体检测及服务流程 (适用于孕期未接受HIV检测的产妇)
孕 期 未 接 受 HIV抗 体 检 测 的 临 产 产 妇
主动提供相关检测信息,采集血样本
同时用两种不同的快速检测试剂 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
两种均无反应
两种均有反应 或 一有反应一无反应
雅培RealTime HIV-1检测试剂盒
3. HIV EIA / ELISA(酶联免疫试验)
代次 包被抗原类型或 窗口期
抗体
(天)
方法
检测对象
特点
第一代 纯化的HIV-1病毒 30-60 V-1+2基因重组 抗原、合成肽抗 原
28-35
HIV-1+2基因重组 14-25 抗原、合成肽抗 原
间接法
双抗原夹 心法
快速检测(层析法)原理
阳性 阴性
TC TC
金标记
固相
待测
针对金标
抗原
抗原
抗体
记抗原的
抗体
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(2)明胶颗粒凝集试验(PA)
• 样品稀释,分别加入经抗原致敏的和未致 敏的明胶颗粒,混匀后保温(室温)。
• 血清中有 HIV 抗体时,经抗原致敏的明胶 颗粒与抗体发生抗原-抗体反应;
• 根据凝集情况判读结果。
报 告 “HIV抗 体 阴 性 ”
检测后咨询,知情选择干预措施
检测后咨询、指导 常规助产及服务
及时应用抗艾滋病病毒药物; 适宜、安全的助产服务
产后暂时未得到补充试验结果或 补 充 试 验 结 果 为 “不 确 定 ”
分娩前快速检测结果为一 有反应一无反应者, 用另一种筛查试剂 再次检测
无反应
有反应
分娩前快速 检测结果两 种均阳性者
有反应
无反应
尽快采集第二份 血样本,送检
有反应
无反应
婴 儿 满 3个 月 再次采集血样本,送检
有反应
无反应
报 告 “婴 儿 HIV感 染 早期诊断检测结果
阳性”
有反应 尽快再次采集 无反应 血样本,送检
报 告 “婴 儿 HIV感 染 早期诊断检测结果
阴性”
诊 断 儿 童 HIV感 染 , 进行传染病信息报告 提供转介服务,随访
《婴儿艾滋病感染早期诊断工作方案》
• 对HIV阳性产妇所生儿童于出生后6周和3个 月时,分别采集血标本,进行婴儿感染早 期诊断。详见图6婴儿艾滋病感染早期诊断 检测及服务流程。
• 未进行婴儿早期诊断检测或婴儿早期诊断 检测结果为阴性的儿童,应于12、18月龄 进行艾滋病抗体筛查及必要的补充试验, 以明确艾滋病感染状态。儿童抗体检测及 服务流程见图7。


产妇应用抗病毒 药物
母亲
应用抗病毒药物
提供转介服务
儿童

应用抗病毒药物
喂养指导与支持
定期随访与检测

预防机会性感染
提供转介服务
住院分娩、安全助产服务
儿童 预防性治疗 定期随访检测 先天梅毒治疗
儿童 注射乙肝免疫
球蛋白 接种乙肝疫苗
常规产后保健及儿童保健服务、关怀支持服务
内容
• 孕产妇艾滋病检测技术要点 • HIV暴露婴儿早期诊断技术要点
• 2、对于阴性结果:
7.4 7.1 7.4 7.1
感染儿童的高死亡率
第一年 35%
第二年 53% 感染者
累积死亡机率
总体 未知 未感染者
18个月以下婴幼儿的HIV诊断
• 母亲 HIV 抗体经胎盘进入胎儿,出生时 新生儿和婴儿早期抗体阳性,不一定是感 染
• 出生时母亲的抗体,80~90% 在生后 9~12 个月消失,出生后 18 个月基本上 全部消失
异性进一步提高(1996年
出现HIV 1/2/O试剂)
IgG+IgM、 IgA和P24
抗原
1998年批准,检测HIV 1/2/O抗体和P24抗原,进 一步降低血源筛查的残余 危险度
抗体检测中的问题
初筛实验中的假阳性 • 血液恶性病变 • 自身免疫性疾病 • 多发性胆汁型肝硬化 • 酒精性肝炎 • 疫苗接种(流感,乙肝) • 多发性骨髓瘤 • 肾移植或慢性肾衰竭 • 疟疾或丝虫病 • 其他
抗体检测中的问题
初筛实验中的假阴性 • 窗口期 • 免疫移植 • 换血输血 • 恶性肿瘤 • 免疫功能丧失(B细胞功能缺损) • 其他(试剂或操作原因)
内容
• 孕产妇艾滋病检测技术要点 • HIV暴露婴儿早期诊断技术要点
及早诊断对个体的必要性
• 1、对于感染儿童: • 及早干预与治疗,功能性治愈
• 临产时才寻求助产服务的孕产妇,需同时应用两 种不同的快速检测试剂进行筛查,根据筛查检测 结果,及时提供后续服务(详见图3)。
图2:孕期艾滋病检测及服务流程
孕期初次接受产前保健的孕妇
主动提供有关的检测信息 采 集 血 样 本 , 进 行 HIV抗 体 筛 查 试 验
有反应
无反应
原 有 试 剂 +另 一 种 筛 查 试 剂 进 行 复 检 或 原有试剂双份进行复检
• 18 个月后儿童 HIV 仍然阳性,视为自身 感染产生的抗体
18个月以下婴幼儿的HIV诊断
• 检测HIV DNA或RNA • 但推荐检测HIV DNA, 因为HIV前病毒
DNA 以细胞内前病毒感染状态存在,所 以它不受母亲围产期抗病毒治疗的影响和 婴幼儿预防性抗病毒治疗的影响. • 不得使用脐带血.
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