《生物化学试验基础》PPT课件

•紫外光：远紫外光〔10-200 nm〕和近紫外 光〔200-400 nm〕的电磁辐射。 •可见光：400-800 nm的电磁辐射。溶液中物 质选择性的吸收可见光中某种颜色的光，溶液 就会呈现出一定的颜色。 • 比色分析法：比较有色物质溶液颜色深浅来 确定物质含量的方法。 • 分光光度法：使用分光光度计进展吸收光谱 分析的方法。
5 实验须知
实验前应作好预习，认真阅读实验指导。明 确实验目标，能简述实验内容及主要的操作 步骤。
实验过程中，应根据实验指导及教师的要求， 认真操作，细心观察，如实记录。严禁捏造 实验数据，提倡实事求是的科学态度，实验 做错应要求重做，反对弄虚作假。
实验完毕后，要认真书写实验报告，及时交 教师批阅。
1)生物化学实验不同于化学和生物学实验，而有其独特的实验技能和根本操作。课 前必须认真预习，明确实验目的、原理、操作关键步骤及本卷须知。 2)要十分注意实验平安，未经实验指导教师允许不得开、关任何电源和仪器设备开 关〔按钮〕。 3)实验时应本着认真、积极的态度，在教师的指导下完成每次实验。注意观察实验 过程中出现的现象和结果，并对实验结果展开讨论。结果不良时，必须重做。 4)实验中，听从教师指导，严格遵守操作规程，取用试剂时，应仔细辨明标签，以免 取错。取完试剂后，应及时将瓶盖盖好，放回原处，切忌乱拿乱放，“张冠李戴〞。 并应及时将实验结果和原始数据如实记录在实验报告上，按时写出实验报告。 5)实验后，必须把仪器洗净放入仪器柜内；清扫实验台面、地面；试剂瓶要摆放整齐。 要经常保持实验室内清洁，不乱丢纸屑及所有固体废弃物。 6)自觉遵守课堂纪律，不迟到早退；保持室内安静；不高声谈笑。同学间应互助友爱。
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第一节 生 物 化 学 实 验 绪 论
1 教学目的
被测溶液在同一条件下显色:
将被测溶液管与标准系列进展比较，假设与其 中某一管颜色一样可认为被测溶液浓度与此管浓 度相等，假设被测溶液颜色介于两标准颜色之间， 可认为被测溶液浓度等于两管浓度的平均值。
常用的目视比色法
ห้องสมุดไป่ตู้
特点 利用自然光 比较吸收光的互补色光 准确度低〔半定量〕 不可分辨多组分 方法简便，灵敏度高
掌握生物化学的根本知识、根本理论及根本实 验技能；
掌握分光光度计的使用、离心技术、电泳、层 析等的原理和操作技能；
掌握蛋白质、酶、核酸、糖等重要物质的别离、 纯化和测定技术的原理及方法；
培养分析和解决问题能力以及严谨细致的科学 作风、创新能力等综合素质。
2 通过生物化学实验主要做到
学习设计或验证一个试(实)验的根本思路，掌 握各个实验的根本原理，学会严密地组织自己 的实验，合理地安排实验步骤和时间。
4 实验室规那么
7)保护实验器材，非本次实验使用的仪器设备未经教师允许不得乱动。本次实验必 须使用的仪器设备，在了解仪器性能和操作规程之前，不得冒然使用，更不可擅自 拆卸或将部件带出室外。实验过程中，如发现设备损坏或运转异常，应立即报告教 师。 8)实验室内严禁饮、食及吸烟!．对腐蚀性或易燃性试剂，操作时要格外小心。如酒 精、乙醚等低沸点有机溶剂，使用时应禁明火，远离火源，假设需加热要用水浴加 热，不可直接在火上加热。用吸量管吸取试剂时应使用吸球，严禁用嘴吸取。对于 有毒、腐蚀的试剂更应注意，应防止其直接接触人体及衣物。乙醚、丙酮等易燃试 剂应远离火源，以免发生意外。 9)注意实验室卫生、整洁。废弃液体应倒入水槽，放水冲走，有毒废弃物应放入废 物缸并及时作无害化处理,实验用过的棉花、废纸、沉淀废渣及其他废弃物品等均应 放入指定容器，不得随意乱扔或丢进水槽。 10)每次实验课由学生轮流值日。值日生要负责清扫实验室的卫生，整理实验室。检 查水、电，关好门窗，经教师检查后，方可离开实验室。
➢实验记录要注意有效数字，如吸光度值应为 “0.050〞，而不能记成“0.05〞。每个结果都 要尽可能重复观测二次以上，即使观测的数据一 样或偏差很大，也都应如实记录，不得涂改。
➢实验中要详细记录实验条件，如使用的仪器型号、 编号、生产厂家等；生物材料的来源、试剂的规 格、试剂的浓度等。
4 实验室规那么
训练实验的动手能力，学会熟练地使用各种生 物化学实验仪器。
学会准确翔实地记录实验现象和数据的技能， 提高实验报告的写作能力，能够科学、标准、 清洁、整齐地进展所有的实验。
掌握生物化学的各种根本实验方法和实验技能， 为今后参加科研及技术工作打下坚实的根底。
3 实验记录
➢实验中应及时准确地记录所观察到的现象和测量 的数据。
•目视比色法回忆
比较溶液颜色深浅，从而确定被测定组 分含量的方法，称为目视比色法。
目视比色法的准确度和精细度受视力条 件影响很大，一般相对误差约在5％～20 ％的范围。
•常用的目视比色法
最常用的目视比色法是标准系列法:
取一套比色管，于各管中分别参加一系列不同 体积的标准溶液，在测定条件下进展显色定容。 此时一系列标准溶液的管中显出由浅到深的色阶。
标准系列 未知样品
2.1紫外-可见吸收光谱
1)紫外-可见分光光度法(UV-VIS)
它是利用物质的分子或离子对某一 波长范围的光的吸收作用，对物质进展定 性分析、定量分析及构造分析, 所依据的 光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长 的光而产生的吸收光谱。
按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光 光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光 光度法。
6 实验报告
实验报告包括如下内容： 实验工程(实验题目〕; 实验目的; 实验原理; 实验器材; 主要操作步骤; 实验结果; 问题分析与讨论等。
第二节 紫外-可见 分光光度计的使用原理和方法
•紫外-可见吸收光谱 •朗伯-比耳定律 •紫外-可见分光光度计 •分析条件的选择 •测定方法