植物膜蛋白提取方法

植物膜蛋白提取方法
说实话植物膜蛋白提取这事，我一开始也是瞎摸索。

我试过超声破碎法来提取。

就像敲鸡蛋，想把里头的东西弄出来那种感觉。

把植物组织放在缓冲液里，然后用超声仪来破碎细胞。

可是我发现这种法子很容易把膜也给弄破喽，得到的膜蛋白纯度不咋高，好多其他乱七八糟的东西都混进去了。

这就好比炒菜的时候把不该放的调料都倒进去了，最后味道全乱套了。

后来呢，我又尝试了差速离心法。

这就像挑豆子，把大的小的分开那样。

先把植物组织破碎后，通过不同的离心速度把细胞器啊什么的和膜蛋白分离开。

开始的时候我老是掌握不好离心速度和时间，要么离心速度不够，那些东西分不开，要么就是离心太久了，把想要的膜蛋白都给弄丢了一部分。

经过好多次的尝试，我才慢慢摸准了一点规律。

比如说，先低速度短时间离心去掉那些大的残渣，然后再逐步提高离心速度和延长时间来纯化膜蛋白。

我有段时间还听别人说密度梯度离心法好使。

这方法有点像从水里分层捞东西。

就是用不同浓度的溶液形成一个密度梯度，然后离心，让膜蛋白在适合它密度的那个层面停下来，这样和其他物质分离开。

但是这个方法操作起来比较麻烦，各种溶液的配制就要很精确，我就老在这上面出错，溶液配不对后续根本得不到像样的结果。

还有就是用化学试剂来提取。

比如说表面活性剂。

这就跟用清洁剂去油污有点像，表面活性剂能把膜蛋白从细胞膜上给“扒拉”下来。

不过这化学试剂的种类和浓度可得选好了，选错了就像洗衣粉放太多把衣服都洗坏了似的，膜蛋白的活性啥的就全没了。

我就在选择表面活性剂的种类和浓度上栽过跟头，试了好多种，结果都不理想，不是蛋白没有提取出来就是提取出来的蛋白变性了失去活性了。

如果是新手上路的话，我觉得差速离心法可以先试试，毕竟相对来说比较直白一点，虽然可能会碰到不少问题，但是在调整离心速度和时间的过程中可以慢慢学习。

可千万别像我刚开始的时候，只知道按照书上的数值来，实际情况和书上可能有差别，要多做尝试才行。

在操作的全过程里，实验设备的清洁也很重要。

就像做饭之前锅得洗干净一样，离心管等设备不干净的话，也会有杂质混到提取出的膜蛋白里面去。

我就有一次忘记彻底清洗离心管了，结果提取出来的膜蛋白杂质好多呀，又得重新来一遍。

我觉得不管用哪种方法呢，过程中都得细心一点，多做记录，像每次离心的时间速度啊，试剂的用量和种类啊，要是不记下来，出了问题都不知道是在哪一步犯的错。

而且最好每做一次对比一下结果，看看哪里有改进。

这些都是我一路慢慢摸索过来的经验，希望能有点用。