UPLC法测定注射用头孢噻肟钠含量

UPLC法测定注射用头孢噻肟钠含量
摘要：目的优化含量测定方法，缩短注射用头孢噻肟钠的含量的检测时间，提高检验效率，确保样品含量的准确性。

方法采用Agilent-poroshell EC-C
18（120mm*50mm，2.7μm）色谱柱，柱温30℃;以0.05mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇（85:15）为流动相，等度洗脱；进样量2μl；检测波长为230nm。

结果头孢噻
肟的线性范围为92.2～1383.0μg/ml；平均回收率为99%，RSD%为0.42%。

结论
优化后的含量测定方法分析速度快、进样量小，节省溶剂、是快速分析的理想选择。

关键词：UPLC；注射用头孢噻肟钠；含量测定
Determination of Cefotaxime Sodium for Injection
by UPLC
GaoJialu1，LiuChao2，WangNing3，YaoQingmei*ChenXi*
（Hainan General SanYang Pharmaceutical Co.,Ltd）Abstract:Objective To optimize the method of content determination，sheorten the interleaf detection and improve the efficiency of determination.Ensure the accuracy of sample content.Methods Agilent
(120 mm *50mm,2.7μm) The column temperature was 30 ℃; poroshell EC-C
18
The mobile phase was 0.05mol/L phosphate buffer (- methanol (85:15)
with isocraticelution; Injection volume 2μl； The detection
wavelength was 230nm.Results The calibration curve was linear over the range of 92.2～1383.00μg/ml for Cefotaxime Sodium；The average
recovery was 99%. The coefficients of variation were0.42%. Conclusion The optimizde method has the advantages of fast analysis confusion，
small injection volume ,saving solvent,It is the ideal choice for
quick analysis.
Key words: UPLC;Cefotaxime Sodium for Injection;Assay.
注射用头孢噻肟钠收载于2020年版“中国药典”二部，为头孢菌素药，是
头孢噻肟钠的无菌粉末，用于敏感细菌所致的肺炎及其他下呼吸道感染、尿路感染、脑膜炎、败血症、腹腔感染、盆腔感染、皮肤软组织感染、生殖道感染、骨
和关节感染等。

我司规格有1.5g和2.0g，其含量测定检测耗时长。

因此，有必
要对其质量标准进行提升研究。

本研究建立UPLC法测定含量，研究表明，检测
时间明显缩短，为其质量控制提供简便、快速可靠的检测方法。

1、仪器与试剂
1.1仪器
高效液相色谱仪：Waters-Arc ACQUITY；电子天平：Mettler XS105
1.2试剂
超纯水、无水磷酸氢二钠、甲醇、头孢噻肟系统适用性对照品、头孢噻肟对
照品、注射用头孢噻肟钠（三洋药业）
2、检验方法
2.1色谱条件
，120mm×50mm 2.7μm；流动相为色谱柱为Agilent-poroshell EC-C
18
0.05mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇（85:15）；流速为1.0ml/min；检测波长230 nm；柱温30℃；进样量2μl
2.2溶液制备
2.2.1 对照品溶液：取头孢噻肟对照品适量，精密称定，加流动相溶解病定
量稀释制成每1ml中约含头孢噻肟1mg的溶液；
2.2.2供试品溶液：取装量差项下得内容物适量，精密称定，加流动相溶解
病定量稀释制成每1ml中约含头孢噻肟1mg的溶液；
2.2.3 系统适用性溶液;取头孢噻肟系统适用性对照品适量，加流动相溶解
并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。

3、方法验证及结果
3.1专属性-溶剂干扰、定量限、头孢噻肟峰与头孢噻肟系统适用性出峰是否
一致
3.1.1溶剂干扰
取本品溶剂，按第2项色谱条件进样2μl，空白溶剂在头孢噻肟主峰位置应
无干扰，结果符合规定。

3.1.2头孢噻肟系统适用性试验
取头孢噻肟钠系统适用性对照约5mg精密称定，至5ml量瓶中，加溶剂稀释
至刻度，按第2项色谱条件进样，头孢噻肟主峰的保留时间为2.943min。

3.1.3定量限（LOQ）
取头孢噻肟钠精密称定用溶解溶解配制成每ml含0.2μg 的溶液；S/N应在
10-30；连续进样6针样品的主峰的保留时间RSD≤1.0%；峰面积RSD≤10%；结
果S/N在17.8-23.2之间，保留时间及峰面积RSD分别未0.9%和7.3%。

3.2进样精密度。

取头孢噻肟对照品精密称定，加流动性制成每ml中含头孢噻肟1mg的溶液，按2项色谱条件进样；连续进样5次对照品溶液的峰面积及保留时间RSD≤1.0%；结果，连续进样5次峰面积及保留时间RSD分别为0.10%和0.055%。

3.3重复性
取注射用头孢噻肟钠样品，精密称取6份，加流动相稀释制成每ml中含1mg 的样品，按第2项色谱条件进样，分别按平均装量计算（平均装量1.6083g）；6份供试品溶液头孢噻肟含量结果RSD≤2.0%；结果，6份供试品溶液按平均装量计，平均含量为103.6%， RSD均为0.15%。

3.4线性关系考察
取头孢噻肟钠对照品50mg精密称定，加流动相溶解并稀释至25ml量瓶中作为储备液，分别精密量取储备液0.5ml（10%）、1ml（20%）、2ml（40%）、3ml （60%）、5ml（100%）、7.5ml（150%）分别置10ml量瓶中，在设置的浓度范围内，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性回归，相关系数R应不小于
0.998；结果，线性方程为Y=4550078.5X+100,R2=0.9992
3.5准确度
取注射用头孢噻肟钠精密称定，加流动相稀释制成含量为80%、100%、120%的溶液，每个浓度分别配制3份，按外标法计算9个样品的实测浓度，并计算回收率。

公式：
回收率=×100%
要求：各浓度下的回收率均应遵循下表（2020年版药典四部要求），在98%～101%之间，9个数据的RSD≤2.0%。

结果见表1：
浓度
理论加入
量（mg ）
实际测得
量（mg）
回收
率%
平均
回收率%
R
SD%
结果：9份样品平均回收率99%， RSD:0.42%。

4、优化方法与优化前方法含量测定结果对比。

随机取3批放置48小时的样品溶液，按第2项色谱条件测定，将测定结果与原色谱条件的测定结果进行对比；结果见表2：
结果：方法变更后与变更前含量测定结果的相对偏差＜1.0%。

5、讨论：注射用头孢噻肟含量测定现行执行方法为2020版中国药典（HPLC 法），色谱柱为C
，规格为250mm×4.6mm,5μm、进样量为10μl，在原方法基
18
础上，经过改良后的方法（UPLC法），色谱柱规格变更为120mm×50mm, 2.7μm，进样量减少至2μl、主峰保留时间缩短为约3min（原方法主峰保留时间约为
40min），比原色谱方法出峰时间大大提前，检验效率大幅提高，放置48小时样
品测定结果与原色谱条件的含量测定结果对比，结果优于HPLC法。

所以，改良
后的UPLC法能较好的用于注射用头孢噻肟钠的含量测定，对改进方法的可操作性，提高工作效率，节约资源有较好体现，建议采用。

参考文献
［1］《中国药典2020年版》四部 9101分析方法验证指导原则及0512高效
液相色谱法。

［2］Mark EB.使用超高效液相色谱ACQUITY UPLC快速分析醛酮类化合物[J].环境化学,2008,27（4）：549-550.
［3］陈佳，王钢力，姚令文，等.超高效液相色谱（UPLC）在药物分析领域
中的应用[J].药物分析杂志，2008，28（11）：1976-1981.
［4］高青，刘颖，宋彬彬，等.超高效液相色谱与高效液相色谱方法转换及
验证.药物分析杂志，0254-1793（2016）07-1279-08.
作者简介：
高嘉璐、1983年3月、女、汉族、辽宁清河、海南通用三洋药业有限公司、QC
主管、制药工程师、执业药师、本科、研究方向：质量控制与质量研究、邮箱：
****************
刘超、1981年9月、男、汉族、湖北武汉、海南通用三洋药业有限公司、研发主
任工程师、制药工程师、本科、研究方向：实验室管理与质量研究、邮箱：
****************
王宁、1979年11月、女、汉、海南、海南通用三洋药业有限公司、质量主任工
程师、制药工程师、本科、研究方向：质量控制与质量研究、邮箱：
****************
姚清梅、1981年06月、女、汉、广西、海南通用三洋药业有限公司、QC经理
、制药工程师、本科、研究方向：质量控制与质量研究、邮箱：
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陈晞、1975年07月、女、汉、内蒙古、海南通用三洋药业有限公司、副总经理
、工程师、大专、研究方向：质量控制与质量研究、邮箱：
****************
*通讯作者。