绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体构建及重组乳酸菌制备

绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体构建及重组乳酸菌制备
陈晓雷;杨桂连;王春凤
【期刊名称】《吉林农业大学学报》
【年(卷),期】2009(031)003
【摘要】以红霉素耐药性基因/thy A基因双筛选压力大肠杆菌-乳酸杆菌穿梭表达载体pW425et为基本骨架,将绿色荧光蛋白(GFP)基因插入该载体,构建GFP标记的穿梭表达载体pW425et-GFP.通过连续的荧光强度检测,验证gfp基因能否在重组菌中得到稳定表达.重组表达质粒pW425et-GFP酶切和PCR鉴定结果与预期片段大小相符,SDS-PAGE显示27 kD的绿色荧光蛋白获得表达,在蓝光的激发下,可见明显的绿色荧光,且荧光稳定性强,连续传代30次仍可见荧光.结果表明已成功构建了GFP标记穿梭表达载体pW425et-GFP,为乳酸菌作为益生生理菌载体进行体内定植规律研究和食品级、疫苗级乳酸菌产品的开发奠定了基础.
【总页数】5页(P325-329)
【作者】陈晓雷;杨桂连;王春凤
【作者单位】吉林农业大学动物科技学院,长春,130118;吉林农业大学动物科技学院,长春,130118;吉林农业大学动物科技学院,长春,130118
【正文语种】中文
【中图分类】S852.6
【相关文献】
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