苦楝内生真菌生物多样性及其代谢产物生物活性的研究

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6.期刊论文王雅琴.傅育红.高锦明.王琪.张鞍灵.李晓明.WANG Ya-qin.FU Yu-hong.GAO Jin-ming.WANG Qi.
ZHANG An-ling.LI Xiao-ming苦楝内生真菌抗菌活性的研究-西北林学院学报2007,22(1)
对苦楝植株中的内生真菌进行了研究.从苦楝中共分得70株内生真菌,对其进行分类鉴定,除3种因不产孢未鉴定外,其它的分属于5目、7科、11属
7.期刊论文单淑芳.朱薇薇.吴海亮.陈珊珊.朱振.樊美珍.黄勃苦楝内生真菌抗植物病原真菌活性菌株的筛选-生
物学杂志2009,26(6)
实验对苦楝植株中内生真菌的抗植物病原真菌活性进行了研究.从苦楝(Melia azedarach)的根、茎、叶、花、果实中分离得到290株内生真菌,分别
测定各菌株的抗茵活性效果,并对筛选出的9株菌株发酵液进行抗茵活性测定.发现L071027Z3、SX071116Z1-2和XY070430J3菌株发酵液对玉米小斑病,小麦赤霉病,棉花枯萎病,苹果炭疽病的抑制率较高.再对这3株供试茵在发酵液粗提物质量浓度为50 mg/mL时,进行进一步抑茵实验,3个菌株的发酵液粗提物对玉米小斑病,小麦赤霉病,棉花枯萎病,苹果炭疽病具有不同程度的抑制茵丝生长活性作用且有机相提取物的抑制作用较高,其中L071027Z3的抑茵圈与其它菌株差异极显著.
对各菌株次生代谢物进行检测,可知O-L-5、O-SCII-4和O-RC-3能产生较多的苦楝素,最终确定O-L-5和O-RC-3为目的菌株。
对O-L-5大量发酵,从其发酵产物中分离得到四个化合物M1-M4,经GC-MS、<'1>HNMR、<'13>CNMR)等波谱鉴定,并与标准品、文献值以及图谱库对照,鉴定分别为麦角甾醇过氧化物、4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮麦角甾烷、M3未知,7-methyl-8-hydroxy-2- acetvl-furanonaphthoquinone。其发酵产物中有大量的油状物,对其进行GC-MS分析可知,为16和18碳的高级脂肪酸。
2,didodecy13-3”-disulfanediyldipropanoateW-3,醋酸孕双烯醇酮W-4,a-软脂酸甘油酯W-5。这5个化合物均为首次从痂圆孢属内生真菌分离得到。化合物 W-3,W-4是首次从苦楝内生真菌中分离得到。W-6是结构相似的几个化合物的混合物,具体结构还有待进一步确定。
(6)菌丝乙酸乙酯萃取物经过柱层析分离纯化,分离出化合物A,B,C,D。运用EI(FAB)-MS,<'1>ItNMR,<'13>CNMR及DEPT等波谱鉴定,并与标准品对照,鉴定A为双氧麦角甾醇,B,C纯度达不到鉴定的标准,D的波谱图无法解释出。
3.学位论文何丽颖苦楝内生真菌LN-15代谢产物的初步研究2008
本文链接:/Thesis_Y1597465.aspx
授权使用:吕先竟(wfxhdx),授权号:19560df2-f5e1-4496-8ea5-9e13013cdda6
下载时间:2010年10月18日
从苦楝(Melia azedarach L.)的根、茎、叶、果实中分离得到99株14个属的内生真菌(33株因不产孢子未鉴定)。其中7月分离得到7个属,10月得到14个属的内生真菌。由分离结果可知,根、茎中内生真菌的属多于叶和果实,且曲霉属的灰绿曲霉组、链格孢属和未见孢子Ⅰ在全株均有分布。
以小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、苹果炭疽病菌、棉花枯萎病菌为供试菌种,在50mg/mL的浓度下,采用抑制菌丝生长速率法和抑制孢子萌发法对99株内生真菌发酵产物进行了杀菌活性筛选,发现O-L-1、O-L-2、O-L-5、O-RC-3这四个菌株的发酵液和菌丝体粗提物对这些病原菌具有不同程度的抑制菌丝生长活性作用,其菌丝体粗提物对番茄灰霉菌、棉花枯萎菌有明显的抑制孢子萌发作用。
2.学位论文王雅琴苦楝内生真菌及其生物活性物质研究2007
植物内生真菌中含有丰富的活性物质,在天然产物药物和农药研究迅速发展的今天,其已成为一种重要的药用资源,是寻找天然活性物质的重要来源。从植物中分离纯化内生真菌,并从中找到活性先导化合物具有很高的开发利用价值。鉴于此,本论文从植物苦楝中分离纯化内生真菌,并从中筛选一株内生真菌来寻找活性化合物。本文主要得出以下结论:
安徽农业大学
硕士学位论文
苦楝内生真菌生物多样性及其代谢产物生物活性的研究
姓名:单淑芳
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:樊美珍;黄勃
20090601
3.1.5主要仪器
表3.2主要仪器
Table3-2Main 的21种菌株进行液体培养,并对其发酵产物进行抗菌活性测定.发现在供试质量浓度为50 mg/mL时,MA1,MA4,MA8和MA9 4个菌株的发酵液和菌丝体粗提物对小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、苹果炭疽病菌、棉花枯萎病菌具有不同程度的抑制菌丝生长活性作用,其菌丝体粗提物对番茄灰霉菌、棉花枯萎菌有明显的抑制孢子萌发作用.
4.期刊论文陈远友.单淑芳.Chen的生物多样性研究-安徽农学通报
2009,15(14)
本文首次对生长于安农大校园、安徽灵璧、江苏无锡、陕西成阳的苦楝植物内生真菌进行了生物多样性研究.初步分离培养获得290株内生真菌,经分离纯化、形态观察、显微鉴定,它们分属于1亚门、5目、6科、11属.研究发现:不同地理来源的相同部位内生真菌的分离频率不同,不同地理来源不同季节相同部位内生真菌的分离频率也不同;不同部位的内生真菌密度存在显著的差异;各个部位内生真菌的密度在春、夏季和秋季的变化不尽相同,体现了其明显的生物多样性规律.
Xiao-ming.ZHANG An-ling苦楝内生真菌的初步分离和筛选-西北农业学报2007,16(2)
从苦楝(Melia azedarach L.)的根、茎、叶、果实中分离得到99株14个属的内生真菌(33株因不产孢子未鉴定).其中7月分离得到7个属,10月得到
14个属的内生真菌.由分离结果可知,根、茎中内生真菌的属多于叶和果实,且曲霉属的灰绿曲霉组、链格孢属和未见孢子Ⅰ在全株均有分布.对各菌株次生代谢物进行检测,可知O-L-5、O-SCⅡ-4和O-RC-3能产生较多的苦楝素,为目的菌株.
(4)发现MA1,MA2,MA13,MA14,MA15几株菌中可能含有苦楝素。
(5)在供试质量浓度为50mg/mL时,菌株MA2的发酵液正丁醇提取物对供试菌中的枯草芽孢杆菌、北京棒状杆菌、绿色木霉有很强的抑菌作用;乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、灵杆菌有很强的抑菌作用,对枯草芽孢杆菌、北京棒状杆菌、绿色木霉有较强抑菌作用。表明两部分均含有抑菌活性成分。且提取物的抑菌作用随浓度增大而增大。菌丝体乙酸乙酯部分对小麦赤霉菌,番茄灰霉菌,辣椒疫霉菌,棉花枯萎菌抑菌活性比总浸膏和正丁醇部分都要强,对苹果炭疽菌比总浸膏和正丁醇部分都要弱。
内生真菌作为真菌类群中的一部分,是一个非常庞大的群体。研究表明内生真菌能产生结构新颖,活性多样的代谢产物,因此,植物内生菌的研究越来越被科学界关注。
苦楝(Melia azedarach L.)为楝科(Meliaceae)落叶乔木,具有广谱性的杀虫作用。大量研究表明,内生真菌能够产生与宿主相同或相似的活性成分。因此,为了进一步寻找活性物质,本文以一株编号为LN-15,经鉴定为痂圆孢属(Sphaceloma de Bary)的苦楝内生真菌为研究对象,利用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶LH-20柱层析、RP-18柱层析等方法,分别对其发酵液和菌丝体乙酸乙酯萃取物部分进行分离纯化,初步研究了该内生真菌的代谢产物成分。结果从发酵液中分离到四个化合物W-1、W-2、W-3、W-4,从菌丝体中分离到两个化合物W-5、W-6。经理化性质和有机波谱鉴定(EI-MS、FAB-MS、1H NMR、13C NMR等),以及与标准化合物对照,确定其中五个化合物结构,分别是:麦角甾-4,6,8(14),22- 四烯 -3- 酮 W-1,过氧化麦角甾醇 W-
(1)从苦楝中共分得70株内生真菌,对其进行分类鉴定,除三种因不产孢未鉴定外,其它的分属于5目、7科、11属,1 8种。
(2)对分离出的17株菌株进行液体培养,并对其发酵产物进行抗菌活性实验。结果表明,在供试质量浓度为50mg/mL时
,MA1,MA2,MA4,MA8,MA9,MA15,MA19七个菌株的发酵液和菌丝体粗提物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、灵杆菌、北京棒状杆菌都有较强的抑制活性。
5.学位论文王琪苦楝内生真菌代谢产物初步研究2007
植物内生真菌(endophytic fungi)是指在健康植物寄主的各种组织和器官内部或细胞间隙中度过全部或近乎全部生活周期而不使寄主表现任何症状的一类真菌。作者于2005年6月至2006年12月对苦楝(Melia azedarach L.)中内生真菌进行了初步的研究,取得了以下结果:
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苦楝内生真菌生物多样性及其代谢产物生物活性的研究
作者:单淑芳
学位授予单位:安徽农业大学
1.期刊论文王琪.傅育红.高锦明.王雅琴.李小明.张鞍灵.WANG Qi.FU Yu-hong.GAO Jin-ming.WANG Ya-qin.LI
(3)在供试质量浓度为50mg/mL时,MA1,MA2,MA4,MA8和MA9五个菌株的发酵液和菌丝体粗提物对小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、苹果炭疽病菌、棉花枯萎病菌表现出了不同程度的抑制菌丝生长活性,而MA1,MA2,MA4,MA8四个菌丝体粗提物对番茄灰霉菌、棉花枯萎菌均有明显的抑制孢子萌发作用。
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