脾细胞分离 红细胞裂解液配制
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1.小鼠脾细胞的制备：
Balb/c小鼠摘眼球放血，处死，75％浸泡消毒2~3min
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超净台内解剖、取脾，剪碎
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于200目筛网中研磨过筛，小平皿收集（小皿放约5ml 20%血清的1640）
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移至离心管中，800rpm，离心5min，弃上清
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加入5ml红细胞裂解液，吹打均匀，静置3～4min
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1000rpm离心5min，弃上清，少量RPMI 1640洗涤2～3遍
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加入2ml RPMI 1640（含10％FBS），吹打均匀，计数
红细胞裂解液配方：
NH4Cl: 0.747g
Tris：0.26g
定容100ml
PH=7.4
0.22um的滤膜抽滤除菌。
注：红细胞裂解液可以从冰箱拿直接出来用，预冷的红细胞裂解液加到细胞中后可以在冰上放置1min左右，裂解更充分些。
我做实验时，一般红细胞裂解液加完离心后，只用1640洗一次，一只小鼠的脾脏细胞最后悬浮于3ml 1640中，稀释50倍计数，即：100ul台盼蓝+880ul 1640（或PBS）+20ul 细胞。
那个问题等师兄过来了帮你问一下。