MS培养基母液的配制与保存

仪器与用具
1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱；
2、用具：烧杯、容量瓶、量筒、试剂瓶、标签；
3、试剂：95%酒精，0.1-1N NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。

方法步骤
（一）母液的配制
母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍的溶液。

优点：（1）保证各物质成分的准确性。

（2）便于配置时快速移取。

（3）便于低温保藏。

1、MS大量元素母液（10X）
称10升量溶解在1升蒸馏水中。

配1升培养基取母液100ml。

化学药品1升量10升量
①NH4NO31650 mg/L 16．5g
②KNO31900 mg/L 19．0g
③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g
④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g
⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g
2、MS微量元素母液（100X）
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基取母液10ml。

化学药品1升量10升量
①MnSO4·4H2O
（MnSO4·H2O）22．3 mg/L
（21．4 mg/L）
223mg
②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg
③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg
④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg
⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg
⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg
⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg
注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml（即含0．25 mg的量）加入到母液中。

3、MS铁盐母液（100X）
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基取母液10ml。

化学药品1升量10升量
Na2·EDTA37．3 mg/L 373 mg
FeSO4·7H2O27．8 mg/L 278 mg
注意配制时，应将两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。

混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。

4、MS有机物母液（100X）
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基取母液10ml。

化学药品1升量10升量
①烟酸0．5 mg/L 5mg
②盐酸吡哆素（VB6）0．5 mg/L 5mg
③盐酸硫胺素（VB1）
④肌醇100 mg/L 1 g
⑤甘氨酸 2 mg/L 20mg
5、生长调节剂
单独配制，浓度为1-5 mg/ml（书中为0.5-1mg/ml），一般配成4 mg/ml 。

配制培养基母液时注意事项：
①一些离子易发生沉淀，可先用少量蒸馏水溶解，在按配方顺序依次混合；
②配制母液时必须用蒸馏水或重蒸馏水；
③药品应用化学纯或分析纯；
④溶解生长素时，可用少量0．5 –1N的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素类用0．5
–1N的HCl加热溶解。

（二）母液的保存
1、装瓶：将配制好的母液分别装入试剂瓶中，贴好标签，注明各培养基母液的名称、浓缩
倍数、日期。

注意将易分解、氧化的溶液，放入棕色瓶中保存。

2、贮藏：4℃冰箱。

MS培养基配方
编辑本段注意事项：
1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。

2.母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。

3.MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。

其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。

4.组织培养是否能够获得成功，主要取决于对培养基的选择。

不同的培养基具有不同的特点，也就适合于不同的植物种类和接种材料。

在开展组织培养项目时，首先要对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择合适的使用。

组培用的培养基一般包括基础培养基和激素，但是植物激素的种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料有变化，因此各培养基配方中均不列入植物激素。

常用的基础培养基除了有MS培养基，还有B5培养基，N6培养基。