流体动力学基因转染技术构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小鼠模型

流体动力学基因转染技术构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小
鼠模型
黄丹梅;吴曼鹏;黄晓华;张莹;倪仰鹏;牛永东
【期刊名称】《癌变·畸变·突变》
【年(卷),期】2017(029)005
【摘要】OBJECTIVE:To establish a transiently expressed HBx via hydrodynamic gene delivery in mice. METHODS:Two experimental groups of CD-1 male mice (4 mice per group) were injected with pcDNA-Flag-HBx plasmid or pcDNA empty vector via their tail veins. Mice were then sacrificed and their liver tissues were collected for extraction of RNA and protein. RESULTS:HBx was detected by PCR and Western blotting at the RNA and protein levels,respectively. Transiently expressed HBx effectively regulated the expression of typical target genes,small heterodimer partner (SHP) and cytochrome P4507A1(Cyp7a1) of farnesoid X receptor signaling,as shown by real-time PCR analyses. CONCLUSION:A transient expression model of HBx via hydrodynamic gene delivery in mice was established.%目的:构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小鼠模型,为研究HBx在HBV感染相关原发性肝细胞癌发生中的分子机制奠定基础.方法:8只6～8周龄雄性CD-1小鼠,尾静脉注射真核表达质粒pcDNA-HBx及空载体pcDNA3.0,6～8 h 处死小鼠并收集肝组织,抽提RNA及蛋白.RT-PCR和Western blot检测HBx表达情况;实时荧光定量PCR检测FXR靶基因SHP和Cyp7a1的mRNA表达.结果:核酸和蛋白水平上,pcDNA-HBx注射组小鼠肝脏内均可检测到HBx的表达;空载体
对照组肝组织中未检测到HBx的表达;肝组织中瞬时过表达的HBx可以有效调控FXR通路下游靶基因SHP和Cyp7a1的mRNA表达.结论:成功实现了HBx在小鼠肝脏中的瞬时高表达,为今后整体水平上研究HBx提供了有效的动物模型.
【总页数】4页(P387-389,393)
【作者】黄丹梅;吴曼鹏;黄晓华;张莹;倪仰鹏;牛永东
【作者单位】汕头大学医学院药理教研室,广东汕头 515041;汕头市第二人民医院儿科,广东汕头 515011;汕头大学医学院药理教研室,广东汕头 515041;汕头大学医学院药理教研室,广东汕头 515041;揭阳市人民医院病理科, 广东揭阳 522091;汕头大学医学院药理教研室,广东汕头 515041
【正文语种】中文
【中图分类】Q786
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