宁心律康颗粒调节Na+-K+-ATP酶抗心律失常的实验

AD） ， depolarization， 而后除极是引起心律失常的一个重要因 素。后除极的频率快、 振幅小、 震荡性波动， 同时膜电位不稳 定， 易于引起异常冲动产生， 从而导致触发活动和心动过速 。 同时动作电位时程的延长， 使细胞更易于发生钙超载现象， APD 的延长也是哇巴因诱发 导致不可逆的细胞损伤 。可见， 豚鼠心律失常的主要原因之一 。综上所述， 哇巴因引起豚鼠
+ K+ATP 酶 关键词： 宁心律康颗粒； 哇巴因； 心律失常； 心肌细胞； Na -
Key words： NXLKG granule； uabain； arrhythmia； heart cell； Na + K+ATP enzyme 中图分类号 CLC number： R285． 5 文献标识码 Document code： A 文章编号 Article ID： 1674 － 8999 （ 2012 ） 09 － 1148 － 02
+ K+ATP 酶是 Nபைடு நூலகம்LKG 抗心律失常的关键 肌细胞膜上的 Na -
2． 2
NXLKG 对静脉注射哇巴因诱发的心律失常模型豚鼠 见表 2 。
表2 宁心律颗粒对心律失常模型豚鼠心肌组织 Na + K+ATP 酶含量的影响 组别 模型组 稳心颗粒组 小剂量组 中剂量组 大剂量组 n 10 10 10 10 10 剂量（ g·kg － 1 ） － 4． 185 6． 975 13． 950 27． 900 （x ± s） 珋
Abstract： Objective： To observe the effect of NXLKG （ ningxinlvkang granule ） on arrhythmia model Guinea pig induced by mainline uabain and investigate its effect on Na + K+ATP enzymic activity． Methods： Prepare arrhythmia model Guinea pig with mainline uabain， and observe the uabain dose when Guinea pig emerge premature ventricualr contraction， ventricular fibrillation， heart arrest and K+ATP enzymic activity． Results： ①NXLKG could increase the uabain dose significantly when the effect on cardiac muscle tissue Na + K+ATP enzymic activity of model the model Guinea pig emerge arrhythmia． ② NXLKG could raise the cardiac muscle tissue Na + K+ATP enzymic activity to achieve antiarGuinea pig significantly． Conclusion： NXLKG could adjust the cardiac muscle tissue Na + rhythmic．
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2012 年 9 月 1 日 第 9 期 No． 9 1 Sep． 2012
中
医
学
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第 27 卷 Vol． 27
总第 172 期 Serial No． 172
CHINA JOURNAL OF CHINESE MEDICINE
Na + K+ATP 酶含量。 1． 5 统计学方法 采用 SPSS 12． 0 统计学软件处理， 计量资料采用均数 ± ± s） 表示， 标准差（ x 珋 统计分析采用 t 检验。 P ＜ 0． 05 为差异 有统计学意义。
+ K+ATP 酶的影响。结果： ①宁心律康颗粒能够显著增加诱发豚鼠出现心律失常时哇巴 停搏时哇巴因用量， 及心肌组织 Na + K+ATP 酶活力。 结论： 宁心律康颗粒能够通过调节心肌细 因的剂量； ②宁心律康颗粒能够显著提高模型豚鼠心肌组织 Na + K+ATP 酶活力， 达到抗心律失常的作用 。 胞膜上的 Na -
安徽中医学院， 安徽 合肥 230038 Anhui University of TCM， Hefei， Anhui， China 230038
+ K+ATP 酶的影响。 摘要： 目的： 观察宁心律康颗粒对静脉注射哇巴因诱发心律失常模型豚鼠的的治疗作用， 并探讨其对 Na -
方法： 采用静脉注射哇巴因法制备心律失常豚鼠模型， 观察宁心律康颗粒用药后对模型豚鼠出现室性早搏 、 心室颤动和心脏
－1 醛麻醉（ 3． 5 mL · kg ） ， 用 Medlab 生物信号采集处理系统
有限公司生产（ 国药准字 Z10950026 ， 批号 080545 ） ； 水合氯
+ 醛： 国药集团化学试剂有限公司生产， 批号： T20060331 ； Na -
记录各组豚鼠正常心电图， 固定、 分离颈总静脉， 插管并连结
+ K+ATP 酶， 心律失常的主要原因是抑制心肌细胞膜上 Na -
2
2． 1
结果
NXLKG 对静脉注射哇巴因诱发的心律失常模型豚鼠 见表 1 。
表1 宁心律颗粒静脉注射哇巴因诱发的心律失常模型豚鼠出现 VP、 VF 和 CA 时所需哇巴因剂量的影响 组别 n 10 10 10 10 10 剂量 （ g·kg － 1 ） － 4． 185 6． 975 13． 950 27． 900 VP 148． 2 ± 26． 8 177． 6 ± 26． 0 166． 8 ± 29． 6
+ K+ATP 酶含量的影响 心肌组织 Na -
靶点之一。 参考文献：
［ 1］李仪奎． 中药药理实验方法学［M］ ． 第 2 版． 上海： 上海科学技术 2006 ： 391． 出版社， ［ 2］万军， 周霞， 黄国钧， 等． 制作哇巴因诱发豚鼠心律失常模型的体 J］ ． 中药药理与临床， 2008 ， 24 （ 4 ） ： 72 － 73． 会［ ［ 3］ Shan H L， Yang B F， Zhou Y H， et al． Effects of Matrine on Aconitine Induced Electrophysiological Changes in Rat Ventricular Myocytes ［ J］ ． Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences， 2004 ， 13 （ 3 ） ： 193 － 197． ［ 4］ Gong D M， Shan H Li， Zhou Y H， et al． The ion targets of arrhythmias in duced by ouabain and aconitine in guinea pig and rat ventricular myocytes［J］． Acta Pharmaceutica Sinica， 2004 ， 39 （ 5 ） ： 328 － 332． ［ 5］龚冬梅， 邹晓龙， 白云龙， 等． 哇巴因和乌头碱对豚鼠和大鼠心肌 2006 ， 40 （ 5 ） ： 细胞钠电 流 的 作 用［J］． 哈 尔 滨 医 科 大 学 学 报， 347 － 350． ［ 6］贾卫国， 邓钰琳， 廖大清， 等． 哇巴因对乳鼠心室肌起搏电流的影 J］ ． 中国心脏起搏与心电生理杂志， 2007 ， 21 （ 3 ） ： 245 － 247． 响［ ［ 7］熊晨， 武彦昭， 郭会采， 等． 低浓度的哇巴因引起豚鼠心室肌细胞 2007 ， 23 （ 10 ） ： 内钙增高 的 可 能 途 径［J］． 中 国 药 理 学 通 报， 1363 － 1367．
－1 输液泵， 静脉恒速注射哇巴因（ Ouabain ） 6 μg · min ， 浓度
K+ATP 酶、 考马斯亮兰蛋白试剂盒均由南京建成生物工程 研究所提供（ 批号： 20080912 ） 。 1． 2 实验动物 豚鼠， 雌雄各半， 体质量 300 ～ 350 g， 由长临河医药科技
30 μg·mL － 1 。监测心电图的变化， 分别记录出现室性早搏 （ ventricular contractions premature， VP） 、 心室颤动（ ventricular fibrillation， VF） 和心脏停搏 （ cardiac arrest， CA ） 时哇巴因 用 量。取心脏按说明书操作， 用 754 紫外可见分光光度计测
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+ + 宁心律康颗粒调节 Na -K -ATP 酶抗心律失常的实验研究 Experimental Sudy on Regulation of Na +-K +-ATP Enzyme to Fight Against Arrhythmia by NXLK Granule 施慧 Shi Hui， 龙子江 Long Zijiang 王靓 Wang Liang，
酶的影响， 为临床应用提供实验依据 。
1
1． 1
材料和方法
药品及试剂 宁心律康颗粒（ NXLKG ） ， 由合肥远志医药科技有限公
（ 27． 900 g·kg － 1 ） ， 按体表面积计算分别相当于临床人日用 2 倍和 4 倍， 0． 01 mL·g － 1 体质量。 每 量 90 g 生药的 1 倍、
（x ± s） 珋
哇巴因剂量（ mg·kg － 1 ） VF 266． 4 ± 6． 3 306． 0 ± 19． 2 290． 4 ± 33． 7
*
CA 324． 0 ± 34． 5 363． 0 ± 24． 5 343． 8 ± 30． 0
*
NXLKG 能够显著增加心肌组织 Na + K+本研究表明，
312． 0 ± 27． 1 ＊＊ 367． 2 ± 36． 7 * 186． 6 ± 29． 7 * ＊＊ 198． 0 ± 34． 4 338． 4 ± 34． 3 ＊＊ 415． 2 ± 29． 7 ＊＊
* P ＜ 0． 05 ， 注： 与模型组比较， ＊＊P ＜ 0． 01
钙超载， 有效地保护心肌， 避免心肌的进一步损伤 。因此， 心
+ ATP 酶活性， 通过增加其活性， 从而增加 K 向细胞内的主动
模型组 稳心颗粒组 小剂量组 中剂量组 大剂量组
这样就调节了细胞内外的离子浓度， 降低自律性， 改善 转运， 传导， 消除折返， 从而减少心律失常的发生 。 同时增加心肌
+ K+ATP 酶活性还可以减少 Na + Ca2 + 交换导致的 组织 Na -
+ K+ATP 鼠模型来研究其抗心律失常作用， 并探讨其对 Na -
有限公司提供， 合格证号： SCXK（ 皖） 2007 － 001 。 1． 3 实验仪器 Medlab 生物信号采集处理系统： 南京美易科技有限公 司； 754 紫外可见分光光度计， 上海精密科学仪器有限公司 2D 型恒流泵： 上海沪西分析仪器厂有限公司生产 。 生产； HL1． 4 实验方法
*
延长了 APD， 使心室自律性升高， 传导减慢， 易于发生折返激 动和后除极， 诱发心律失常
［56 ］ +
VF 和 CA 时所需哇巴因剂量的影响 出现 VP、
。
+ K+ATP 酶， 同时哇巴因通过抑制 Na 使细胞内 Na 浓 + + Ca2 + 交换增强， 度增加， 细胞两侧 Na 梯度减小， 从而 Na + + Ca2 + 交 换 转 移 到 细 胞 外， 使细 胞 内 升 高 的 Na 经 过 Na ［7 ］ Ca2 + 转移到细胞内， 形成钙超载 。
心律失常是临床常见病 、 多发病， 严重的心律失常是心 肌肥厚、 心肌缺血、 心肌梗死及心力衰竭患者的最终死因之 一。心律失常是指心脏冲动的频率 、 节律、 起源部位、 传导速 度与激动次序的异常。 中医属于心悸的范畴， 临床以心悸、 怔忡、 脉象异常为其主要表现， 甚则可见头晕、 目眩、 胸痛气 促、 汗出肢冷或虚脱。宁心律康颗（ NXLKG ） 粒是由人参、 丹 参、 麦冬、 酸枣仁等组成的复方中药制剂， 具有益气养阴、 养 血安神、 定悸复脉的作用， 主治气阴两虚、 心血不足所致各种 心律失常。本实验通过静脉注射哇巴因法制备心律失常豚
［12 ］
取豚鼠 50 只， 雌雄各半， 体质量 300 ～ 350 g， 随机均分 WXG 组（ 4． 185 g·kg － 1 ， 按 为 5 组： 模型组（ 等容量蒸馏水） 、 NXLKG 小剂量组 体表面积计算相当于临床人用量的 2 倍） 、
－1 （ 6． 975 g · kg － 1 ） 、 中剂量组 （ 13． 950 g · kg ） 、 大剂量组
－1 组 10 只， 雌雄各半。各组豚鼠分别按 0． 01 mL · g 体质量
司提供， 其中人参、 丹参、 麦冬、 酸枣仁按照 2 1 1 1 配
－1 伍， 人用量为 90 g·d ； 稳心颗粒（ WXG ） ： 由山东步长制药
灌胃给药， 连续给药 3 d， 末次给药后 30 min， 用 10% 水合氯