双黄连口服液

关于三精双黄连口服液的各项研究一、药品说明书
二、制取方法
金银花、黄芩、连翘，黄芩切片，加水煎煮三次，第一次2小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在80℃时加入2mol/L盐酸溶液适量调节PH 值至1.0～2.0，保温1小时，静置12小时，滤过，沉淀加6～8倍量水，用40%氢氧化钠溶液调节PH值至7.0，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用2mol/L盐酸溶液调节PH值至2.0，60℃保温30分钟，静置12小时，滤过，沉淀用乙醇洗至PH值7.0，挥尽乙醇备用；金银花、连翘加水温浸半小时后，煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对蜜度为1.20～1.25（70～80℃测），冷至40℃时缓缓加入乙醇，使含醇量达75%，充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣加75%乙醇适量，搅匀，静置12小时，滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味，加入黄芩提取物，并加水适量，以40%氢氧化钠溶液调节PH值至7.0，搅匀，冷藏（4～8℃）72小时，滤过，滤液加入蔗糖300g，搅拌使溶解，再加入香精适量并调节PH值至7.0，加水制成1000ml，搅匀，静置12小时，滤过，灌装，灭菌，即得。

三、含量实验测定
双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成，具有辛凉解表、清热解毒功效，对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病有一定疗效。

其中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素是其主要活性成分。

2005年版《中华人民共和国药典》（一部）采用高效液相色谱法只测定了绿原酸、黄芩苷、连翘苷的含量，而且是采用包括甲醇一醋酸一水、乙腈一醋酸一水的不同流动相分别测定。

本试验参照文献，通过优化色谱条件，建立了不经提取分离，利用梯度洗脱法同时测定上述4种成分含量的高效液相色谱法，具有简便可行、准确、快速的特点，减少了配制流动相的步骤和进样次数，提高了工作效率，取得了满意效果。

方法名称：双黄连口服液—黄芩甙的含量—高效液相色谱法
应用范围：本方法采用高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素含量。

本方法适用于由金银花,黄芩,连翘等精制而成的双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素的含量测定。

方法原理：利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定双黄连口服液中黄芩甙含量。

固定相为Nova-Pak C18反相柱;流动相为甲醇水磷酸=50 50 0.2;检测波长为276nm。

1、仪器及试药品名为：
岛津LC-IOATvp高效液相色谱仪；SPD-IOAvp紫外可见检测器；CLSS-VP色谱工作站；CTO-IOASvp柱温箱；7725i手动进样器。

绿原酸对照品（批号110753-200212）、黄芩苷对照品（批号1 10715-200514）、连翘苷对照品（批号1 10821-200609）、汉黄芩素对照品（批号110514-200403）均由中国药品生物制品检定所提
供。

双黄连口服液由中国人民解放军252医院药剂科提供，批号20070115、20070121、20070212.甲醇、乙腈均为色谱纯，磷酸为分析纯，水为三蒸水。

2、色谱条件与系统适应性试验
色谱柱：岛津VP-ODS c柱（250mm×4.6 mm，5μm）；流动相：乙腈（A）一
0.2%磷酸溶液（B）（A+B=100%）作梯度洗脱， t=0—6 min，A：27%；t=6—10
min，A：30%；t=10—15 min. A：60%；15—25 min，A：90%；流速：1.O mL/min；
检测波长：278 nm；柱温：25℃；进样量20μl.在上述色谱条件下，4种待测组分与
邻近组分达到了基线分离，理论塔板数按绿原酸峰计算不低于3 000.
3、溶液的制备
3.1对照品溶液的制备精密称取绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素对照品适量，置10 mL容量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别制成浓度为1.10、
1.03、0.51、0.44 mg/mL的对照品母液。

3.2供试品溶液的制备精密吸取双黄连口服液1.0 mL，置50 mL容量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，0.45 um微孔滤膜过滤，即得。

3.3 阴性对照溶液的制备按处方比例及制备工艺，分别制备缺金银花、黄芩、连
翘的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。

4、线性关系考察
分别精密吸取绿原酸对照品母液0.20、o.40、0.75、1.50、3.O mL，黄芩苷对照品母液0.25、0.50、1.O、2.0、3.0mL，连翘苷对照品母液0.20、0.40、0.60、
1.20、
2.0汉黄芩素对照品母液0.15、o.25、0.50、1.0、2.0 IfIL，对应加入10
IIlL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配制成5个浓度的混合对照品溶液，进样测定，记录色谱图。

以峰面积为纵度标，分别以绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素进样量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程。

绿原酸：Y=1.04×loX+1.40×10，R=0.999 6；黄芩苷：y=3.87×106X——I.26*104，，=0.999 9；连翘苷：
Y=6.44×lOSX+1.74×10 ，R=0.9999；汉黄芩素：Y=6.30×IO~X+1.45×lOs，
r=O.9999结果表明，绿原酸进样量在0.44～6.60 μg范围内，黄芩苷进样量在
0.52～6.18μg范围内，连翘苷进样量在o.20～2.04μg范围内，汉黄芩素进样量在o.13～1.76 μg范围内，线性关系良好。

精密吸取绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素混合对照品溶液注入液相色谱仪，
连续进样5次，绿原酸峰面积RSD：1.12%，黄芩苷峰面积RSD=O.86%，连翘苷峰面积RSD=O.72%汉黄芩素峰面积RSD=0.58%。

结果表明，所选方法精密度良好。

5、稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液，分别在O、2、4、6、8、10、12、24 h进样，测定样
品中绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素的峰面积，结果绿原酸RSD=l_74%，黄芩苷RSD=2.04%，连翘苷RSD=1.81%，汉黄芩素RSD=2.38%，表明样品溶液在24 h内稳定。

6、重复性试验
精密称取同一批号5份样品，按供试品溶液制备方法制备，进样，记录峰面积，
结果绿原酸RSD=1.48%，黄芩苷RSD=1.53%，连翘苷RSD=1.34%，汉黄芩素
RSD=1.58%，表明方法重复性良好。

7、阴性对照试验
分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，绘制色谱图。

结果阴性对照潮液在供试品溶液及对照品溶液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素保留时间相应位置上均无吸收峰出现，表明阴性对照无干扰。

8、加样回收率试验
精密量取同一批号0.2 mL双黄连口服液4份于50 mL祠量瓶中，分别加入绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素对照品溶液适量，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，0.45μ微孔滤膜过滤。

按“2.1”项下色谱条件进样测定其含量，计算加样回收率。

四、双黄连口服液临床应用研究进展
双黄连口服液是由金银花、黄芩、连翘组成的纯中药制剂，具有辛凉解表、清热解毒之功效，是双黄连系列产品中一个全面研究并取得卫生部新药证书的剂型。

现代药理学研究表明双黄连制剂能抗多种病原微生物，具有广谱的杀菌作用；并能降低毛细血管的通透性、减少渗出，具有抗炎、抗过敏作用；还可增强机体产生a一干扰素能力，可显著地增强细胞免疫和体液免疫作用，对病毒也具有较强的抑制作用，并能中和细菌产生的内毒素，同时具抗感染及免疫调节双重作用。

临床主要用于细菌和病毒感染引起的感冒、流感以及肺炎、气管炎、扁桃体炎等症，其疗效确切、安全、有效。

笔者将近几年来双黄连口服液在临床应用的近况综述如下。

1、在小儿上呼吸道感染方面的应用
上呼吸道感染是儿科常见多发病，其发病率占儿科疾病的首位，若治疗不及时易出现严重并发症，如肺炎、心肌炎、脑炎、脑膜炎等，危及患儿生命。

引起上呼吸道感染的病原大多为病毒，目前尚无特效的抗病毒西药制剂。

李霞【1】用双黄连口服液治疗上呼吸道感染(感冒及咽炎)患儿，每次1～2支，每日3次，其中感冒患儿疗程3天，急性咽炎患儿疗程5天。

结果表明双黄连口服液对患儿退热、止咳及流涕、头痛、咽肿痛的缓解效果较好，感冒和急性咽炎疗效明显优于口服小儿速效感冒片。

杨淑清心【2】用双黄连口服液治疗小儿上呼吸道感染，1岁以下每次半支，l岁以上每次1支，每日2次，连续服用4～7天，疗效较好。

表明双黄连口服液治疗上呼吸道感染效果较好。

2、在治疗小儿流行性腮腺炎方面的应用
小儿流行性腮腺炎是由腮腺炎病毒感染引起一种急性传染病，以儿童多发，传染性强。

徐广明【3】等，用双黄连口服液治疗该病，与用病毒唑治疗组对比，腮肿大消退时间分别为(86±12)h、(106±14)h，两者差别有显著意义。

结果表明双黄连口服液治疗小儿流行性腮腺炎的疗效优于病毒唑，见效快，且服用方便，免除注射之苦，值得基层医院推广使用。

3、在治疗口腔炎方面的应用
口腔炎是口腔黏膜的炎症，属临床常见、多发病。

徐汉文【4】用双黄连口服液治疗
口腔炎，每次20ml，每天3次；对照组用洗必泰含漱液漱口，早晚刷牙后含漱，每次15ml，含l
min后吐出。

双黄连口服液组有效率为92．48％，对照组有效率为76．67％，有显著性差异(P<0．05)，且临床研究过程中未见不良反应。

李子莎【5】用双黄连口服液治疗各种临床类型口疮4l例，疗效满意。

说明双黄连口服液疗效明确，安全可靠，可作为口腔炎的常规用药。

4、在治疗传染性单核细胞增多症方面的应用
传染性单核细胞增多症是由EB(Eps Tein—Barr)病毒感染引起的一种急性传染病，以发热、咽喉炎、淋巴结肿大、肝脾肿大、皮疹和外周血见到较多异常淋巴细胞等为主要表现。

西医无特效药物。

刘清池等【6】用双黄连口服液治疗，每次2支，每日3次，每周1疗程，连续服用1．3疗程，并配以精心护理，取得了较好的疗效，未见到任何副作用，且用药方便，值得临床推广。

5、双黄连口服液治疗外感风热感冒
姜源新等报导通过临床试验，对422例外感风热感冒患者按3：1比例进行随机对照试验。

试验组300例，口服双黄连口服液，每次2支(10mE／支)，每日3次，3天为1个疗程；对照组122例，口服清热解毒口服液每次2支(10ml／支)，每日3次，3天为1个疗程。

结果300例应用双黄连口服液的感冒患者中，痊愈率为24．30％，显效率为65．33％，总有效为84．66％；对照组清热解毒口服液痊愈率为24．59％，显效率为61．48％，总有效率为84．43％；对照试验结果显示，拟定剂量下，双黄连口服液与清热解毒口服液的综合疗效相当(P>0．晒)。

双黄连口服液治疗组未见不良反应。

双黄连口服液在临床应用广泛，所治疾病可概括为两大类，一类为感染性疾病，双黄连口服液具有抗菌与抗病毒的双重作用；另一类为免疫功能低下所致双黄连口服液能提高宿主的免疫功能，增强宿主的抗病能力。

五、参考文献
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[2]杨淑清．双黄连口服液治疗小儿急性上呼吸道感染44例临床观察[J]．福建医药杂志，2004，26(5)：113．
[3]徐广明，王志刚．双黄连口服液治疗流行性腮腺炎28例疗效观察[J]．时珍国医国药，2003，14(8)：462．
[4]徐汉文．双黄连口服液治疗口腔炎的临床研究[J]．河北医学，2001，7(3)：218．
[5]李子莎．双黄连口服液治疗复发性口疮疗效观察[J]．浙江中西医结合杂志，2000，
10(8)：499．
[6]刘清池，郭丽华．双黄连口服液治疗传染性单核细胞增多症[J]．中成药，2003，
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吕晓红，姜文．双黄连口服液致荨麻疹1例[J]．医药导报，2000，19(2)：182．
高伟霞，曲秀云．双黄连口服液致过敏反应1例[J]．航天航空医药，2004，15(2)：70．
姜源新，李明，王金陵，等．双黄连口服液治疗外感风热感冒3000例临床观察[J]．中华现代中西医杂志，2004，24(7)：16．
（注：可编辑下载，若有不当之处，请指正，谢谢!）。