布鲁氏菌外膜蛋白OMP10与宿主细胞互作蛋白的筛选鉴定及其功能研究

布鲁氏菌外膜蛋白OMP10与宿主细胞互作蛋白的筛选鉴
定及其功能研究
布鲁氏菌是一种危害人类和养殖动物健康的细菌，它通过外膜蛋白与宿主细胞进行互作来实现其病理效应。

其中，外膜蛋白OMP10被认为在布鲁氏菌感染过程中发挥重要的角色。

本文旨在通过筛选和鉴定与OMP10相互作用的宿主细胞蛋白，并研究其功能，以深入了解布鲁氏菌与宿主细胞的相互作用机制。

首先，我们通过利用酵母双杂交技术筛选出与OMP10相互作用的宿主细胞蛋白。

将OMP10的基因克隆到酵母表达载体中，并构建酵母双杂交报告质粒。

将该质粒转化至酵母菌株中，并通过培养于选择性培养基上来筛选出与OMP10相互作用的酵母克隆。

随后，从筛选出的阳性克隆中提取质粒，通过测序鉴定其带有的宿主细胞基因序列。

通过生物信息学分析，我们发现OMP10与一系列与蛋白翻译后修饰、胞内运输、凋亡调控等相关的宿主细胞蛋白发生了相互作用。

其中特别引起我们的注意的是一种名为NF-κB的
转录因子。

NF-κB在免疫应答中扮演重要角色，其激活可诱
导一系列免疫反应基因的表达。

此外，NF-κB还参与细胞凋
亡和炎症反应的调节。

这提示OMP10可能通过与NF-κB相互
作用来调控宿主细胞的免疫应答和炎症反应。

为了验证NF-κB与OMP10的相互作用，我们利用共免疫
沉淀实验进一步验证了两者的结合。

通过过表达OMP10和NF-
κB，并共转染至293T细胞中，发现NF-κB可以与OMP10相
互作用，并形成复合物。

此外，我们还观察到OMP10的表达能够促进NF-κB的核定位，进一步支持了两者的相互作用。

接下来，我们进一步研究了OMP10和NF-κB相互作用的
功能。

通过siRNA敲降NF-κB的表达，发现在布鲁氏菌感染下，NF-κB的沉默能够显著减少细胞产生的炎症因子，如IL-1β和TNF-α。

这表明NF-κB的活化是布鲁氏菌感染中炎症反应的重要调节因子，而OMP10与NF-κB的相互作用可能是布鲁氏菌促进炎症反应的机制之一。

综上所述，本研究通过筛选和鉴定与布鲁氏菌外膜蛋白OMP10相互作用的宿主细胞蛋白，并研究了其功能。

我们发现NF-κB是与OMP10相互作用的主要宿主细胞蛋白之一，并且这种相互作用可能在布鲁氏菌感染过程中调控炎症反应发挥重要作用。

这些研究结果为进一步深入理解布鲁氏菌与宿主细胞互作的机制提供了新的线索，有望为布鲁氏菌感染的治疗和预防提供新的靶点和策略
综合以上研究结果，我们发现布鲁氏菌外膜蛋白OMP10与宿主细胞的NF-κB发生相互作用，并形成复合物。

这种相互作用对布鲁氏菌感染中炎症反应的调节起到重要作用。

我们的研究为进一步理解布鲁氏菌与宿主细胞互作的机制提供了新的线索，并为布鲁氏菌感染的治疗和预防提供了新的靶点和策略。