生物饵料

绪论
1生物饵料的概念:特指经过人工筛选的、可进行人工培养的、适合养殖对象食用的优质的饵料生物。

饵料生物的概念:指生活在海洋、江河、湖泊等水域中，可供水产动物食用的各种水生微生物、动、植物
生物饵料学内容：
（1）生物饵料的筛选
（2）生物饵料规模化或大量培养技术研究
（3）生物饵料的营养价值评价
2掌握优良生物饵料所应具备的条件（筛选生物饵料的标准）
1、个体大小适合养殖对象摄食
2、运动速度与分布水层便于养殖对象摄食
3、营养价值高，容易被养殖对象消化吸收
4、代谢产物无毒或毒性不危及养殖对象的健康
5、生命周期短，生长繁殖迅速
6、环境的适应能力强，易于大量培养
3掌握生物饵料的优点
1、对水环境的影响：使用生物饵料，对养殖水体的水质影响较小
2、营养组成：生物饵料的营养丰富，能满足水产动物的营养需求
3、规格多样：生物饵料的大小可满足养殖对象的需求，不同生物饵料可组合成系列饵料，满足养殖对象不同生长阶段的具体需求
4、可消化性好：大多数水产动物喜食生物饵料，而且容易消化。

自身含消化酶，可弥补幼体消化能力的不足
5、可获得性佳：大多数水产动物能方便的摄食生物饵料，可针对养殖对象的运动和栖息习性，选择运动能力和分布水层都适合培养对象的种类
第一章光合细菌
1光合细菌的定义：光合细菌又称光养细菌，是能进行光合作用的一群原核生物。

广义的定义：能够进行光合作用的细菌
狭义的定义：能够进行光合作用且不产生氧气的细菌
2光合细菌的特征：1) 地球上最早出现的具有原始光能合成体系的原核生物
•2) 具多种异养功能（固氮、脱氮、固碳、硫化物氧化等）
•3) 与自然界中的物质循环（氮、磷、硫）有密切关系
•4) 在自然净化过程中起重要作用
•5) 是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用
•6) 没有形成芽胞能力的革兰氏阴性细菌
在废水处理中常用的为红螺菌属和红细菌属
3光合细菌的色素主要存在细胞内的载色体或绿色包囊中：载色体存于与红螺菌科和着色菌科，由细胞膜陷入细胞质内而形成，并与细胞膜相连•绿色包囊存在于绿杆菌科和绿色丝状菌科，分散附着于细胞膜下面，是一个独立的球形细胞器
光合细菌的色素主要有菌绿素a，b，c，d，e及类胡萝卜素
4根据P S B进行光合作用时供氢体的不同，P S B的光合反应可分为三类：1、以硫化氢为供氢体：•CO2 + 2 H2S (CH2O) + H2O + 2 S •
2、以硫代硫酸盐为供氢体：•2 CO2 + Na2S2O3 + 3 H2O 2 (CH2O) + Na2SO4 + H2SO4 •
3、以有机物为供氢体：• CO2 + 2 H2A (CH2O) + 2 A
5根据碳源利用的不同，光合细菌可分三种营养类型：
•光能自养型:利用无机碳
•光能异养型：利用有机碳
•兼性营养型：利用有机、无机碳
6光合细菌在水产上的应用
1作为养殖水体的水质净化剂2作为人工配合饵料的添加剂3作为鱼、虾、贝幼体的促生长因子，促进幼体生长、变态，提高成活率4作为动物性生物饵料的饵料，用于培养轮虫、卤虫、枝角类等动物性生物饵料5病害的防治作用
7光合细菌在水产养殖中应用注意事项
1光合细菌为活得生命体，不可与消毒杀菌剂混合使用。

2、在改善水质方面，应灵活掌握用量和使用的连续性，PSB只有形成优势种群，才能发挥最大的作用3、如果养殖对象已发病，说明病原微生物的浓度已达到或超过发病临界点，光合细菌的用量必须很大，否则没有明显的效果。

此时最好先用杀菌消毒剂治疗，一周后再用光合细菌4、改善水质的最佳使用方法：晴天上午使用；水温高于20℃；池水酸碱度在8左右；浓缩的光合细菌或储存时间较长的光合细菌，在使用前最好应先活化。

通常对菌液进行连续10小时以上的光照5、用作饲料添加剂时，用量以1.2%～1.5%为宜，把菌液喷于饲料表面，稍浸润后即可正常投喂。

拌入光合细菌菌液的饲料应于当天投喂完毕6、光合细菌菌液不能用金属器皿储存，储存环境注意防止高温（42℃），并最好应有一定的光照7、使用前应注意生产日期及光合细菌的
活力。

失效变质应禁止使用，尤其是作为饲料添加剂使用时
8光合细菌的分离过程
9光合细菌培养方式
10光合细菌培养设备
具备能从事微生物学实验的基本设备•1）灭菌器（烘箱、高压蒸汽灭菌锅）2）无菌箱•3）恒温光照培养箱•4）玻璃器皿（试管、培养皿、移液管、锥形瓶等）•5）冰箱6）显微镜•7）接种环8）分光光度计•9）酸度计10）电光源等
※11光合细菌的培养方法
12光合细菌的保种
（1）液态保种：将营养液装入试管或玻璃瓶中，经高压灭菌后进行接种，放置于有光照条件下进行培养，以后每隔20d～30d按上述方法转接培养，以保持其生长活力。

此法保种期短，适宜于生产季节保种
（2）一般采用厌氧低温条件保存•在无菌条件下，将光合细菌菌株的纯培养物，穿刺接种于盛有固体培养基的试管中，重复数次。

在低温弱光（或黑暗）条件下保存一年左右
（3）沙土管保种：取灭菌后的沙土管（干沙土过100目筛）2～3支，将准备好的生长旺盛的纯菌种培养液，转移到无菌沙土管中的沙土内，搅拌数次，在管口塞好棉塞并充分振荡，使菌体与沙土充分混匀。

然后将此沙土管置于装有生石灰或无水氯化钙的广口瓶或干燥器中，经3d～5d，待沙土管充分干燥后，用固体石蜡封口，置于阴凉干燥处保存
第二章微藻的培养
1、熟悉常用微藻的拉丁名和培养生态，掌握常用微藻的应用情况
1、小球藻培养条件：- 温度10~35℃盐度：可驯化最适光强10000lx 最
适pH 6~8
•应用：培养动物性生物饵料，水色及水质的调控
2、微绿球藻温度25~30 ℃盐度：4~36 最适光强10000lx
–最适pH 7.5~8.5
应用：贝类育苗，河蟹幼体及动物性饵料，水色及水质的调控
3、亚心形扁藻适宜培养条件温度20~28 ℃盐度：30~40 光强5000~10000 lx
最适pH 7.5~8.5
应用：贝类育苗，轮虫培养
4、三角褐指藻适宜培养条件温度10~15 ℃盐度：25~32 光强3000~5000 lx
最适pH 7.5~8.5
应用：甲壳类、贝类及棘皮动物的幼体饵料
5、小新月菱形藻适宜培养条件温度15~20 ℃盐度：25~32
光强3000~8000 lx 最适pH 7.5~8.
应用：甲壳类、贝类及棘皮动物的幼体饵料
6、牟氏角毛藻适宜培养条件最适温度30 ℃
盐度：10~15 光强10000~15000 lx 最适pH 8.0~8.9
应用：斑节对虾、泥蚶育苗
7、中肋骨条藻适宜培养条件温度20~30 ℃盐度15~30
光强5000 lx 最适pH 7.5~8.5
应用：斑节对虾、河蟹育苗
8、等鞭金藻3011适宜培养条件最适温度20~30 ℃
盐度10~30 光强7000~9000 lx 最适pH 7.5~8.5
应用：贝类及棘皮动物的育苗
9、湛江等鞭金藻适宜培养条件最适温度25~32 ℃盐度22.7~35.8
光强5000~11000 lx 最适pH 7.5~8.5
应用：贝类及棘皮动物的育苗
10、绿色巴夫藻培养生态：广盐广温种最适盐度10 ~ 40
最适温度15 ~ 30℃最适光强4000 ~ 10000lx
应用：甲壳类和贝类的育苗
11、钝顶螺旋藻适宜培养条件
最适温度30~37 ℃盐度可驯化光强30000~35000 lx
最适pH 8.6~9.5
应用：观赏鱼配合饵料、贝类和甲壳类育苗
2、了解微藻的培养方式，熟悉微藻的培养设施
培养方式：
〃按培养纯度分
纯培养：即无菌培养。

单种培养：指可有细菌存在但只有一种藻类的培养。

混合培养:也称多种培养,是指一培养体系中存在两种或两种以上的微藻细胞同时生长
〃按培养密闭程度分
•开放式培养：指藻液直接与外界空气相通的一种培养方式，
•封闭式培养：指单胞藻在一相对封闭的体系中培养，
〃按采收方式分
一次性培养（批次培养）指一次接种培养后一次性全部采收半连续培养是指在一次接种后，藻液培养到一定密度时部分采收，同时添加等量的新培养液的生产方式连续培养是指在接种后，根据培养液中藻密度或营养盐的消耗量，连续采收藻细胞和添加营养盐
•按培养规模分
藻种培养（一级培养）指以保存藻种为目的藻类培养，
•中继培养（二级培养）指为生产性培养提供大量藻种为目的藻类培养，
•生产性培养（三级培养）是以大量生产藻细胞为目的培养
培养设施：
1、藻种室
2、清洗消毒室：
3、培养室
4、培养容器
5、培养池：
6、水处理系统
7、充气系统
•3、掌握微藻的培养方法
•单细胞藻类的培养过程可分为五个步骤：
容器和工具的消毒→培养液的配制→接种→培养管理→采收
一、容器和工具的消毒：
目的：消灭藻类的捕食者和竞争者
•方法：
•加热消毒：
高温高压灭菌直接灼烧法
煮沸法烘箱干燥法
•化学药品消毒：
70%酒精法高锰酸钾法
漂白粉法稀盐酸法
二、培养液的配制
1培养用水的消毒
一级培养用水
–砂滤——烧开（或高压灭菌）——冷却
•二级培养用水
–砂滤（或脱脂棉过滤）——烧开——冷却
•三级培养用水
–砂滤（或脱脂棉过滤或暗沉淀）——20~100PPm漂白粉12h——2/3量的
硫代硫酸钠中和——2h以上用上清液
•2配方的选择
•根据培养藻类对各种营养盐的需求选择适宜配方
•3营养盐用量的计算
•4营养盐的添加
•逐一加入营养盐，并在下一种营养盐加入之前进行充分搅拌。

营养盐加入的顺序：先氮，后磷，再铁……，直至所有营养盐都按需加入到消毒水中
三、接种：成功接种的关键是把握好藻种的质量、藻种的数量和接种的时间
四、单细胞藻的培养管理：日常管理和敌害生物的防治
日常管理工作包括
–1、藻细胞生长环境因子的监测和调控
–2、藻液生长情况检查
五、采收
采收时机：
–藻类进入相对生长下降期
单胞藻的采收方法
•使用连续式离心分离机
•过滤收集
•沉淀收集
•直接投喂
•4、掌握微藻一次性培养过程中的生长模型及其在微藻培养中的应用
可分成五个时期，依次为
•1、延缓期生长特点：接种后的短时间内藻类繁殖缓慢，细胞数无明显改变
•2、指数生长期生长特点：藻细胞数量随时间呈几何级数递
•3、相对生长下降期生长特点：藻细胞繁殖趋缓，细胞数增加速度减慢
•4、静止期藻液中藻细胞数保持相对恒定
•5、死亡期藻细胞大量老化死亡，细胞数量迅速减少
应用：
*如何缩短或消除延缓期的出现？
1、缩短延缓期在藻类培养上的重要性
接种后延缓期越短，接种培养成功的可能性越大
2、缩短或消除藻类接种后出现延缓期的措施
•1）选择处于新陈代谢快，生长旺盛（处于指数生长期）的藻细胞作藻种
2）接种时保证藻种的浓度达到一定的数量，选择偏高浓度接种
3）选择合适的培养液（包括配方组成及营养盐浓度），减少新旧培养液之间的营养盐差异*如何增加指数生长期的生长效率？
选择生长性能优良的品系
•提供其生长所需的各种最佳环境因子和营养水平
•
*如何延长指数生长期，推迟相对生长下降期出现？
1、适时添加营养盐
•2、人工充二氧化碳（含1%~5%二氧化碳的混合空气）
•3、定期检测并调整培养液的pH
•4、增强光照强度
•5、改变培养方式
5、掌握微藻培养过程中敌害生物的污染途径和防止方法
污染途径：1、培养用水 2、空气 3、容器和工具 4、肥料或营养盐 5、某些昆虫
•6、不严格的操作
•防治方法：对待敌害生物的污染和危害应实行以防为主，防治结合的措施
•清除、抑制或杀灭藻液中的敌害生物的方法：
•过滤法清除大型敌害生物
•使用药物抑制或杀灭敌害生物
•改变环境条件杀灭敌害生物
•6、了解微藻的分离和保种
藻种分离：包括采样、预培养和分离三步骤
1采样：从相应的水体和土壤中采集目标藻种
2预培养：目的：使目标藻种成为优势种，方便分离
•关键措施：合适的培养液，合适的培养条件，合适的培养时间
3分离的方法
•通常采用下列方法：
1、微吸管分离法
2、微水滴分离法
3、平板分离法
4、梯度离心法
5、趋
光法
二、藻种的保藏
•保藏方法：
•液体培养基保藏固体培养基保藏固液双相培养基保藏
超低温保存
•常规保藏条件：低温、弱光
第三章轮虫的培养
1轮虫的特点
1）轮盘（头冠），游泳和摄食功能•（2）咽膨大成咀嚼囊，囊内有咀嚼器•（3）原肾管
2褶皱臂围轮虫的生物学特性
摄食特性：典型的滤食性–对饵料的种类无选择性，但对饵料大小有选择–适宜的饵料大小：25μm以下，尤以15μm以下最为理想–饵料种类：很广，细菌、单细胞藻、小型原生动物、有机碎屑等
繁殖特性：（1）有单性生殖和两性生殖两种，两种生殖方式随环境条件的变化而交替进行单性生殖（又称孤雌生殖、非混交生殖）指母本在繁殖后代的过程中，无需父本配子的参与，母本的卵细胞经有丝分裂形成胚胎
两性生殖：又称混交生殖，指母本在繁殖后代的过程中，母本的卵母细胞经减数
分裂形成单倍体的卵子，与父本的单倍体精子受精后发育为两倍体的胚胎（2）非混交雌体是指通过非混交生殖的方式繁殖子代的雌性轮虫
非混交卵：非混交雌体经过有丝分裂产生双倍体的卵称为非混交卵
单性生殖世代：非混交雌体经有丝分裂产生双倍体的非混交卵，非混交卵能够迅速发育成非混交雌体，又经有丝分裂产生双倍体的非混交卵，一代接一代，这
就是单性生殖世代
混交雌体是指通过减数分裂方式形成卵子的雌性轮虫
混交卵混交雌体经过减数分裂产生单倍体混交卵，混交卵又称需精卵。

混交卵在不受精的情况下发育成雄轮虫
休眠卵：单倍体的混交卵在混交雌体内与雄轮虫的单倍体精子结合为双倍体的受精卵，受精卵进一步发育后形成有厚壳的休眠卵（冬卵）
两性生殖世代：世代中有雌雄个体，雌雄能交配繁殖后代，这样的世代称两性生殖世代•轮虫两性生殖世代出现的轮虫类型有混交雌体、混交卵、雄轮虫和休眠
卵
兼性雌体：在轮虫生活史中可能出现的一类雌体，既可通过有丝分裂形成非混交卵，也可通过减数分裂形成混交卵
※轮虫生活史图
诱发两性生殖的因素外源：1、培养液的盐度–2、光照–3、种群密度–4、低温刺激–5、食物的质和量–6、激素（保幼激素、5-羟色胺等）–及生育酚–7、培养液的pH 内源：1、遗传因素•2、轮虫孤雌生殖的累积世代数•3、母轮虫的日龄
褶皱臂尾轮虫对环境条件的适应•温度：适宜温度L型在10℃～25℃，S型在25℃～35℃•
盐度：适宜范围10～30，对盐度较大幅度突变耐力低
光照：适宜范围4400lx～10000lx •
酸碱度：以中性偏碱性为好•
溶解氧：耐低溶氧能力很强，保持在1.5mg/L之上
化学耗氧量：控制在100mg/L以内
非离子氨：控制在1mg/L以内
3轮虫培养的方法的特点及关键技术
（1）一次性培养：特点：在轮虫接种后直至轮虫收获，中间一般不换水。

轮虫培养密度高，培养期间水质变化大，培养周期短，产量高但不稳定
一次性培养流程：1.培养容器（培养池）的选择和清洗消毒2.培养用水的处理3.轮虫饵料的准备4.接种5.投饵6.搅拌、充气及生长情况的检查7.收获（2）半连续培养：特点：在轮虫接种并达到一定密度后，每天用虹吸法采收一定量的轮虫，并添加等量的培养用水，培养过程中水质较稳定，培养时期长•半连续培
养是目前生产性轮虫培养的常用方式
（3）土池大面积培养：特点：利用室外土池培养，培养技术较易掌握，成本低，轮虫培养
密度小，但收获量大，轮虫基本靠摄食池塘的天然浮游植物为饵料，
轮虫的营养质量好
土池大面积培养流程：1.选择培养池2.清池消毒3.进水4.施肥培养单细胞藻类5.接
种 6.日常管理7.采收
4酵母和微藻培养轮虫的优缺点
单细胞藻类的饵料效果•优点：培养的轮虫营养价值相对高，培养过程稳定
•缺点：轮虫的密度不高，且要花费大量的水体劳力培养单胞藻
酵母的饵料效果•优点：轮虫密度可以达到很高–饵料来源方便
•缺点：轮虫缺乏n-3HUFA，营养价值不高
※鉴于单胞藻和酵母培养轮虫各具优缺点，在实际生产中，用酵母和单胞藻配合培养轮虫，已成为一种规范化的轮虫培养技术
5轮虫的培养强化方法和效果
1、用面包酵母和海水小球藻混合培养轮虫•此法可有效提高所培养的轮虫体内的EPA含
量（达11%～12%）。

•2、利用油脂酵母替代普通酵母饲喂轮虫3、用海水小球藻对用面包酵母培养的轮虫进行二次强化培养4、用乳化后的配合鱼油或鱼油微胶囊对面包酵母培养的轮虫进行营养强化
第五章卤虫的培养
1卤虫的分类卤虫，又称盐水丰年虫，丰年虾，卤虾。

两性生殖的卤虫以相互之间是否存在生殖隔离作为界定种与种之间的主要分类依据2、孤雌生殖的卤虫统称为Artemia parthenogenetica，并在其后加上产地地名，以便将来作为进一步分类的参考
A.salina的两层含义：一是表示此卤虫是两性生殖类型的卤虫
二是表示此两性生殖卤虫的确切名称未知
2卤虫的生殖特性卤虫生殖类型是由种的特性决定，不受环境因子的改变而改变•根据生殖类型，卤虫可分为孤雌生殖的卤虫种和两性生殖的卤虫种
生殖方式生殖方式受内外界环境因子的影响，环境的变化会引起卤虫生殖方式的改变•不论是孤雌生殖的卤虫还是两性生殖卤虫，都可以卵胎生方式或卵生
方式进行繁殖•以卵胎生方式繁殖时，产无节幼体•以卵生方式繁殖时，
又有两种情况：产夏卵和产休眠卵（冬卵）•夏卵能直接发育成自由泳动
的无节幼体•休眠卵的胚胎发育过程中有休眠
影响卤虫生殖方式的因素有：1、盐度•2、饵料的数量和质量•3、养殖水体中的铁离子•
4、溶解氧含量•
5、光周期
3卤虫的摄食特性卤虫是一种滤食性生物（可摄食饵料颗粒大小：几μm～50 μm ，对μm～16μm的颗粒有较高的摄入率•卤虫对食物的种类没有选择性，仅对
食物的大小有选择
4卤虫对生态条件的适应温度卤虫能忍受的温度范围很广，对温度骤变的适应力强
盐度耐高盐的特征是卤虫逃避敌害的主要方法(高效渗透压调节、
耐低氧、休眠）
水中的离子浓度溶解氧
酸碱度中性到碱性孵化要求酸碱度在8～9之间
5卤虫休眠卵卵壳结构最外层是咖啡色硬壳层–硬壳层的主要功能是保护其内的胚
胎受机械和辐射的损伤。

这层壳可被一定浓度的次氯酸盐溶
液氧化除去•中间层为外表皮膜：具有筛分作用•壳的最内
层为胚表皮
6卤虫休眠卵的生理类型广义上的卤虫休眠卵，可分为两种休眠状态：滞育和
静止•滞育由内源性、生理性或结构性机制引起的，处于滞
育状态的卤虫卵，即使在良好的环境条件下胚胎也不能进一
步发育。

静止，特指由于外界不良环境条件所导致的低代谢
水平的状态
7卤虫在水产上的应用应用形式主要有：•初孵无节幼体•卤虫去壳卵•卤虫中后期幼体
及成体
一初孵无节幼体初是卤虫在水产养殖上应用最普遍的形式•卤虫初孵无节幼
体的大小，运动速度、营养成分、适口性等
都能基本满足许多水产动物苗种的需求
二、去壳卵优点：1．去壳同时有消毒作用，可预防病菌通过卤虫卵进入育苗及
养殖水体•2．不会因卵壳和未孵化卵所引起
危害•3．卤虫卵的营养物质得到了最大限度
的保留•4．可节省无节幼体孵化设备及孵化
时间•5．不完全的去壳有利于卤虫卵的孵
化
三、卤虫中后期幼体及成体1）作为观赏水族动物的饵料•2）鱼虾蟹幼体培育中
后期幼体的饵料•3）作为高档配合饲料原料
•4）利用卤虫的非选择性滤食填载药物，作
为生物包囊
8卤虫去壳卵的制作一）卤虫卵的冲洗、浸泡•（二）配制去壳液•每克干燥虫卵需使用0.5g 有效氯和0.15g氢氧化钠，而去壳液的总体积按每克卵14ml的比例配置•去壳液要现配现用•（三）去壳•在去壳过程中，卤虫卵的颜色由棕色变成灰白色，最后呈橘红色，同时可感受到去壳液的温度会上升。

在显微镜或解剖镜下，可看到去壳过程中卵壳表面不断有小气泡产生•（四）冲洗、脱氯
9卤虫的加工流程（一）原料卵收集•（二）用饱和卤水进行比重分离•（三）饱和卤水的冲淋筛分•（四）滞育终止处理•（五）淡水冲洗去盐•（六）用淡水进行比重分离•（七）离心脱水•（八）干燥•（九）分级•（十）包装
10卤虫卵的质量判别一）外观质量的判别•1．色泽与气味•2．泥沙含量•3．破壳与碎壳•
4．空壳•5．含水率•6．大小判别•7．细菌含
量等指标
二）孵化特性的判别•1．孵化率•2．孵化效率•3．孵化产量•4．孵
化速度孵化百分率或孵化百分比，指每百粒卤虫
卵（不包括空壳）能够孵化出的无节幼体的只数
指每克卤虫卵能够孵化出的无节幼体的只数
–孵化效率=孵化百分率×每克虫卵所含卵数三）营养价值判别1．化学分析法2．生物饲养法
海水型卤虫：富含EPA 、DHA
淡水型卤虫：富含亚油酸、亚麻酸
11卤虫卵的孵化方法流程1。

准备工作：•包括孵化容器的安装、消毒及孵化用水的准备•2 。

卤虫卵的清洗、浸泡与消毒•用200mg/L的有效氯或0.02%甲醛浸泡30分钟，再用海水冲洗至无味；或用300mg/L的高锰酸钾溶液浸泡5分钟•3。

卤虫卵的孵化•虫卵的孵化密度应小于每升水2~3克卤虫卵，同时控温、控光、控气及控pH •4。

幼体适时采收分离12卤虫的增值方法一、盐田大面积引种增殖分为永久性引种和暂时性引种
•永久性引种：一次引种，多年收获
•暂时性引种：每个生产季节来临前多需引种
二、室外大量养殖卤虫—盐—鱼/虾综合生产
三、室内水泥池高密度养殖卤虫室内高密度养殖的产量很高，养殖密度
可达10000个/L~2000个/L，每两周的养殖产
量可达5~25kg湿重/m3。