中盛溯源推出hiPSC-Luc-GFP细胞株

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中盛溯源推出hiPSC-Luc-GFP细胞株
hiPSC-Luc-GFP细胞株
Rosa26位点是常⽤的基因敲⼊位点;敲⼊该位点的基因表达活性⾼,对旁侧基因影响较⼩。

利⽤CRISPR基因编辑技术,可将外源的基因⽚段定点插⼊到Rosa26位点,实现外源基因的稳定⾼表达。

Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株是由中盛溯源商品化hiPSC细胞株(RC01001-A)制得,利⽤CRISPR基因编辑技术,将Luc和GFP等基因⽚段定点插⼊到Rosa26位点,细胞可以⾼效的表达Luciferase和GFP,可在Nuwacell™ 科研级hPSC培养体系中可以长期稳定快速增殖,具有与⼈类胚胎⼲细胞(hESC)⾼度类似的克隆形态和基因表达,长期维持正常核型,并在体外(in vitro)和体内(in vivo)都具有完备的三胚层分化潜能。

适合科研⽤途的⼲细胞研究和应⽤。

Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP的优势
稳定性⾼,后代表达⼀致
能实现A基因在Rosa26位点及B基因在H11位点同时过表达
外源基因表达不受旁侧基因影响,最⼤程度减少了对内源性基因的影响
结合Cre-loxp系统,还可以构建条件(诱导)性过表达的⼩⿏模型
细胞敲⼊基因信息
▲Nuwacell™ 科研级hiPSC-Luc-GFP细胞株Rosa 26 位点敲⼊基因信息⽰意图。

细胞形态与⽣长情况
▲连续培养的Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞形态图⽰。

荧光倒置显微镜图⽰。

图A、B为正常传代DAY 2细胞图⽰,C、D为正常传代
▲连续培养的Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞形态图⽰。

荧光倒置显微镜图⽰。

图A、B为正常传代DAY 2细胞图⽰,C、D为正常传代DAY 3细胞图⽰。

标尺:100µm。

细胞GFP阳性率检测
▲连续培养的Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)GFP阳性率检测,GFP表达阳性。

上图为流式细胞分析结果,浅灰⾊线条为hiPSC阴性对照;⿊线为hiPSC-Luc-GFP细胞株的GFP阳性率结果。

细胞荧光素酶活性检测
▲Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)荧光素酶(Luciferase)活性检测结果。

上图为RLU(相对荧光强度)分析结果,其中阴性对照为普通hiPSC,hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)的荧光素酶(Luciferase)报告基因表达阳性。

细胞表⾯标志物检测
▲Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞表⾯标志物检测结果。

上图为流式细胞分析结果,其中浅灰⾊线条为同种抗体阴性对照,⿊线为hiPSC 细胞表⾯标志物抗体。

细胞多能基因检测
▲Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞多能基因检测结果。

上图为qRT-PCR分析结果,POU5F1与NANOG为细胞多能基因。

细胞染⾊体核型检测
▲Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞核型检测结果:46,XY。

结果解释:G显带,计数20个分裂相,核型分析5个,未发现染⾊体数⽬或结构异常。

细胞分化潜能检测
▲Nuwacell™ hiPSC-Luc-GFP细胞株(P30)细胞在免疫缺陷⼩⿏体内形成畸胎瘤。

标尺:100µm。

E、F、G分别为神经组织(外胚层)、软⾻组织(中胚层)、肠上⽪组织(内胚层),成瘤时间8周。

附:中盛溯源公司简介
中盛溯源⽣物科技有限公司由全球著名科学家、⼈类诱导多能⼲细胞(hiPSC)发明者之⼀俞君英博⼠领衔创建,并于2016年获得A轮投资1.5亿元⼈民币。

中盛溯源专注于⼈诱导多能⼲细胞与⼈体各种功能细胞的科研与转化,致⼒于提供⾼质量的⼲细胞产品与技术解决⽅案。

中盛溯源研发团队⾄今发表SCI学术论⽂39篇(总引⽤超过21000次)、著作章节6部,获得8个美国专利和3个待审专利。

中盛溯源研发中⼼拥有B+A(百级)级别细胞间5间/1000平⽶,C+A(万级)级别细胞间6间/1000平⽶,分⼦⽣物学实验室350平⽶,SPF级试验动物房220平⽶。

可承接分⼦⽣物学(基因、蛋⽩质⼯程等)、细胞⽣物学(功能细胞定向分化、微器官制备、细胞⽣物学分析与检测等)、试验动物学(疾病动物模型、病理研究等)、和⽣物信息学(全基因组测序、表观遗传分析等)⽅向的科研与转化研究。

截⽌⾄2018年12⽉,中盛溯源已经与国内110余家⼀流科研单位、临床医院、⽣物企业等建⽴业务与项⽬合作。

中盛溯源将为您提供优质的试剂、细胞与服务。

我们期待与您携⼿共⾏,共同致⼒于中国⼲细胞科研与临床转化。

溯源⽣命定制健康
From Life, For Life.。

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